Histotécnica - fases

1. Coleta ou Colheita do material2. Fixação 3. Clivagem4. Desidratação 5. Diafanização 6. Impregnação 7. Inclusão 8. Microtomia 9. Coloração de rotina 10. Montagem

1. Coleta / Colheita do material

- Quem realiza esta fase?

- Tipos: in vivo (biópsia) x post-mortem

Biópsia = é a remoção de tecido de pacientes vivos para exame diagnóstico (amostra obtida por biópsia)

- Acondicionar o material, identificar e colocar a substância fixadora de modo adequado são fundamentais neste momento!

2) Fixação

Conceito: É o tratamento dado a um tecido a fim de se evitar a deteriorização do mesmo por suas próprias enzimas (autólise) ou por microrganismos. Preserva a morfologia e a composição química do tecido através da insolubilidade das proteínas.

X

SangueO2

MitocôndriasBomba Na/K

Lisossomos

Fixadores químicos: Formol a 10 % Bicromato de potássio-Simples Bicloreto de mercúrio Etanol Metanol

Líquido de Bouin-Compostos Líquido de Zenker Líquido de Helly

Fixadores físicos:

-Frio (congelamento/câmaras frigoríficas)-Calor (fixação de esfregaços)

Identificação da substância preparada !

Formol a 10%

Fórmula: 100ml de formol 40% (solução estoque)900 ml de água corrente

Ou

1 litro de formol 40% (solução estoque)9 litros de água corrente

Bom fixador

- agir rapidamente, matando a célula

- não interferir na coloração, aumentando a afinidade

do tecido pelo corante

- preservar morfologia e composição química

teciduais

- evitar a autólise e o crescimento de bactérias e

fungos

- não produzir artefatos ou estruturas artificiais

- ter alto poder de penetração

- endurecer sem deformar

- ser de baixo custo / "atóxico"

- ter ação conservante

Requisitos para uma boa fixação

- intervalo mínimo entre a colheita e a fixação

- contato superfícies/ substância fixadora

- fixador = 20x o volume da peça

- espessura da peça = 1-6 mm

-boa colheita

Cadáver12h48h1 semana

FrescoResfriadoCongelado

Descalcificação

- Quando realizar esta fase adicional ?

Erros

-Coleta:Fragmento não representativo da lesãoDiversos fragmentos sem identificação do localFragmento grande

-Fixação: Pouco formolPote pequenoPote inadequadoPeça muito grande

3) Clivagem

Descrição macroscópica de PC

1-Registro

2-Descrição

a- Local : lesão ou tumor

b- Quantidade: peça única/ retalho/ fragmentos

c- Formato: irregular/ arredondado/ ovalado

d- Tamanho: ...x...x... cm / .... cm diâmetro

e- Superfície externa

TonalidadeLisa / rugosaRecoberta por pele (parcial, total, tricotomizada)Úlcera/ íntegraEnvolta por tecido (do tipo adiposo, conjuntivo)Nodular/papilomatosa/deprimida/ulcerada/crostosaCoberta de sujidades/sangue/muco/pusPresença de ectoparasitasf- Consistência aos

cortesFriável/ gelatinosa/ bem macia/ macia/ esponjosaElástica/ firme-elástica/ firme/ rangente/ pétreaOra macia, ora firme/ deixando fluir líquido

-Material: Navalha, faca,

bisturi

-Tamanho: 2 a 6 mm

- Finalidade

g- Superfície de cortesTonalidade

Irregular/ lisa (compacta)/ fasciculada/ marmóreo/Aspecto fibroso/ untuosa/ lobada ou multilobadacística ou policística (...cm de diâmetro)

Conteúdo dos cistos: consistência (líquido, gelatinoso, caseoso, purulento...)

Tonalidade (brancacenta, pardacenta, rósea, enegrecida, ora.... ora...)

Odor (pútrido, inodoro, amoniacal...)

Planos de corte

Outras possibilidades:

E se o fragmento for pequeno ?- dividir ao meio ou processar inteiro

E se a peça for muito grande ?- Fazer cortes para a penetração da substância

fixadora ou descrever a peça e retirar fragmentos menores para exame, desde que sejam representativos da lesão