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I E A - P U B - 3 3
COMISSÃO N A C I O N A L D E E N E R G I A N U C L E A R
Publicação C N E N - l E A - N.« 7
uso DOCr-51 EM PESQUIZA CLINICA E EM PROPEDÊUTICA. I — DETERMINAÇÃO DA VOLEMIA E DA
SOBREVIVÊNCIA DOS ERITROCITOS
VICTORIO MASPES, RÓMULO R. PIERONI e CLARA R. CARELLI
•0
INSTITUTO D E ENUKGIA ATÔMICA Publicação l E A - 33
S A O P A U L O
C. N. E. N. P r e s i d e n t e — A l m i r a n t e Oc tac i l i o C u n h a
C. N. Pq. P r e s i d e n t e — Prof . D r . J o ã o C h r i s t o v ã o C a r d o s o
U.S. P. R e i t o r — Prof . Dr . A n t o n i o B a r r o s d e U l h ô a C i n t r a
I. E. A. D i r e t o r — Prof . D r . M a r c e l l o D a m y d e S o u z a S a n t o s
1.3 C. M. C a t e d r á t i c o — Prof . D r . A n t o n i o B a r r o s U l h ô a C i n t r a
uso DO CR-51 DÊUTICA. I -
E M PESQUISA CLÍNICA E EM PROPE-DETERMINACÃO DA VOLEMIA E DA
SOBREVIVENCIA DOS ERITROCITOS
VICTORIO MASPES, RÓMULO R. PIERONI e CLARA R. CARELLI
1 9 6 0
Os conceitos emitidos no, presente puhlicação representam opiniões de ; e t t s autores, e são de sua exclusiva responsabilidade
A Comissão Nacional de Energia Nuclear não se resonsabiliza pela exatidão, originalidade ou utilidade das informações contidas no presente relatório, e tampouco garante que o uso de qualqíier inforynação, método, processo ou aparelho diimlgados ou descritos no presente trabalho não possam infringir direitos de outrem.
uso DO CR-51 E M P E S Q U I S A C L Í N I C A E E M P R O P E D É U T I C A . I —
D E T E R M I N A Ç Ã O DA V O L E M I A E DA S O B R E V I V Ê N C I A DOS
E R I T R O C I T O S °
Vic tór io Ma.spes*, Rónmlo R. Piei-orii** e Clara R. Care l l i***
I n t r o d u ç ã o
1 — O cromo 51 (Cr-51) t e m sido usado como t r a ç a d o r no e s tudo de
d i f e r en t e s p r o b l e m a s clínicos e em técn icas p r o p e d é u t i c a s •^'^.I-M L-".
- ' Sob a f o r m a de r a d i o c r o m a t o de sódio (em que func iona como an ión)
t e m sido e m p r e g a d o na d e t e r m i n a ç ã o da m a s s a dos glóbulos v e r m e l h o s
(e v o i e m i a ) , da sobrev ivênc ia dos e r i t roc i tos -.<.'<'.i^i.n. 3-.,-".i,:;ii,.is,ni.-ii,
no r econhec imen to e ava l iação q u a n t i t a t i v a de h e m o r r a g i a s ' ' - ' — pr in
c i p a l m e n t e n a s ocor r idas n a s v ias u r i n a r i a s e na d i g e s t a t i v a — , no e s t u d o
da sef iues l ração e d e s t r u i ç ã o dos glóbulos v e r m e l h o s ao nível do baço
e em o u t r a s p e s q u i s a s ^•''''-"'-••'^••''•"'. Sob a f o r m a de c lore to de
r ad ioc romo (em que se c o m p o r t a como ca t ión) t e m sido usado , por e x e m
plo, na d e t e r m i n a ç ã o do volume p l a s m á t i c o '
2 — A l g u m a s vezes r ecor re - se ao c romo 51 ( — r a d i o c r o m o — ) com o
f i to de se ob te r d e t e r i T i i n a d a i n fo rmação , por exemplo , a m a s s a glo-
bular-'"''-'"'-''. N o u t r a s , p r e t ende - se com u m a única dose do t r a ç a d o r , ob t e r
° C o l a b o r a ç ã o e n t r e o I n s t i t u t o -'e E n e r g i a A t ô m i c a ( D R B ) e a l.'* C l ín i ca M é d i c a (Prof .
D r . A. B . d e U l h ô a C i n t r a ) d a F . M. d a U . S. P .
A s s i s t e n t e d o S e r v i ç o d e H e m a t o l o g i a ( C h e f e : D r . M. J a n i r a ) da 1.^ C. M. e da
D R B do l E A .
C h e f e d a D i v i s ã o d e R a d i o b l o l o g i a do l E A .
* * * M é d i c a E s t a g i á r i a ( S e r v i ç o d e H e m a t o l o g i a ) .
4 V. M a s p e s . R. R. P i e r o n i e C. R. Ca re l l i
Uso do Ci-51 na d e t e r m i n a ç ã o da volemia e da sobrev ivênc ia
1 — Sendo o s a n g u e u m a s u s p e n s ã o de p a r t í c u l a s (glóbulos v e r m e l h o s ,
p l a q u e t a s e glóbulos b r a n c o s ) , n u m meio f luido ( p l a s m a ) , p a r a a
d e t e r m i n a ç ã o do vo lume s angu íneo podem ser e m p r e g a d a s t a n t o subs
t ânc ia s que se di luem no p l a s m a , como s u b s t â n c i a s que m a r q u e m os ele
m e n t o s f i gu rados . O -traçador idea! ser ia u m a s u b s t â n c i a que , se m i s
t u r a n d o com o p l a s m a e só nêle, sof resse t r a n s f o r m a ç õ e s me tabó l i ca s m u i t o
l en tas , ou que, m a r c a n d o os glóbulos v e r m e l h o s , por exemplo , e a p e n a s
êles, não eluisse e não ro tu l a s se o u t r o s glóbulos d u r a n t e a mis tu i ' a . N ã o
se conhece, a t é o p r e s e n t e , s u b s t â n c i a que se c o m p o r t e como m a r c a d o r
ideal do p l a sma . Dos m a r c a d o r e s de glóbulos , o Fe-59 (por exemplo)
pode se c o m p o r t a r como ta l . Com efei to , ma rcando - se " in v ivo" os gló
bulos ve rme lhos de um doador , com Fe-59 , podemos uti l izá-los, pos t e r io r
m e n t e , p a r a a d e t e r m i n a ç ã o da m a s s a g lobula r de um recep tor . O f e r r o
r ad ioa t ivo se a p r e s e n t a incorporado à molécula da hemoglob ina , não
elui dos e r i t roc i to s (a não se r q u a n d o há l ise) e não m a r c a novos g lóbulos
d u r a n t e a m i s t u i a . H á , e n t r e t a n t o , i nconven ien tes e l imi tações sé r i a s
ao uso cor-rente do método . Das s u b s t â n c i a s capazes de m a r c a r " in v i t r o "
cs er-itrocitos, o Cr-51 é a que se a p r e s e n t a como m a i s s a t i s f a t ó r i a .
1.1 — E m 1959, Gray e S t e r l i n g ' " p u z e r a m em evidência que o Cr -51 ,
sob a f o r m a de c lore to de r ad ioc romo , complexa-se com as
p ro t e inüs p l a s m á t i c a s e não p e n e t r a s i g n i f i c a n t e m e n t e nos g lóbulos (me
nos de 2 / 0 - A l g u m t e m p o depois (1953) , F r a n k e Gray^^ u t i l i z a r a m
esse compos to p a r a a d e t e r m i n a ç ã o do volume p la smá t i co . A p e z a r de mo
dificações que t ê m sido i n t r o d u z i d a s na técn ica de u t i l ização do c loreto
de radiocromo-'--', o e m p r e g o do m e s m o como r o t u l a d o r do p l a s m a t e m sido
dados p a r a o cálculo da volemia e da sobrev ivênc ia dos e r i t r oc i t o s . E m
casos como este, as t écn icas u sua i s ou são de execução p r á t i c a compli
cada ou r e c o r r e m a manipulaçõe.i •jb.jetáveis, como se dá com as que , p a r a
a d e t e r m i n a ç ã o c o n c o m i t a n t e da voiemia e da sobrev ivênc ia p r e s c r e v e m
a l a v a g e m dos glóbulos a n t e s da r e i n j e ç ã o - ' - : t a l operação pode induz i r
danos aos e r i t roc i tos e a l t e r a r a sobrevivência ' - ' . Com ce r t a f reqüênc ia
o Cr-51 é e m p r e g a d o s i m u l t a n e a m e n t e com o u t r o s t r a ç a d o r e s , como o
1-131 ( m a r c a n d o a so ro -a lbumina h u m a n a , por exemplo) e o Fe -59 (er i
t roc inese) .
3 — No p r e s e n t e t r a b a l h o , ao m e s m o t e m p o que r e e x a m i n a m o s o p rob le
m a da d e t e r m i n a ç ã o da volemia e da sobrev ivênc ia dos e r i t roc i to s
com o auxí l io do Cr -51 , a p r e s e n t a m o s um mé todo s imples que p e r m i t e a
(.btenção dos dois r e s u l t a d o s cem u m a única dose do t r a ç a d o r .
U s o do C r - 5 1 e m p e s q u i z a c l ín ica e p r o p e d ê u t i c a §
r e l egado pa ra s egundo plano e p r i n c i p a l m e n t e depois do r e l a t ivo sucesso consegu ido com o uso da soro a l b u m i n a h u m a n a iodada (1-131). A r a z ã o pr inc ipa l do pequeno e m p r e g o do c lore to de r ad ioc romo deco r r e , a nosso ver , do fa to de o complexo p ro te ín ico f o r m a d o s e r r á p i d a m e n t e d e p u r a d o da c i rculação pelo S R E , inconven ien te esse a p r e s e n t a d o por o u t r a s subs t â n c i a s , como a Rosa -Benga l a 1-131 e o c lore to de r a d i o f e r r o .
1.2 — G r a y e S t e r l i ng , no t r a b a l h o c i t ado ac ima, m o s t r a r a m , t a m bém, a poss ib i l idade da m a r c a ç ã o dos glóbulos v e r m e l h o s com
o Cr-51, sob a f o r m a de r a d i o c r o m a t o de sódio. É s t e p e n e t r a no in t e r io r dos glóbulos, sofre r edução , l igando-se a u m a globina. E s t a l igação é, a t é ce r to pon to , lábil e em conseqüênc ia , h á eluição p a u l a t i n a do r ad io -c romo . O r i t m o dessa s a i d a é, con tudo , b a s t a n t e pequeno se c o m p a r a d o com o de o u t r o s m a r c a d o r e s que t ê m sido usados p a r a os glóbulos , como o P-32. E m méd ia elui cerca de 1'/, do r e m a n e s c e n t e , c ada 24 horasi" '^ '^-" '". P o r o u t r o lado, o r ad ioc romo eluido não m a r c a novas hemác ia s " -^ ' , por se e n c o n t r a r sob a f o r m a de ca t ión ( - d i f e r e n t e m e n t e do P-32 que , eluido, pen e t r a no i n t e r i o r de o u t r a s h e m á c i a s - ) : ao con t r á r io , é r e t i r a d o r á p i d a m e n t e da c i rculação. O m e s m o des t ino t e m o c romo que é l iberado por d e s t r u i ç ã o ( senescenc ia e / o u a g r e s s ã o ) dos glóbulos m a r c a d o s . N e s t a s c i r c u n s t â n c i a s o r a d i o c r o m a t o de sódio é u m m a r c a d o r m u i t o s a t i s f a t ó r i o , q u a n d o se dese ja conhecer a m a s s a dos e r i t roc i to s e / o u a volemia , pois , a sua d i s t r ibu ição pode ser bem a c o m p a n h a d a a t é a homogene ização comple ta . E i s to é m u i t o i m p o r t a n t e q u a n d o se r e c o r r e a u m m é t o d o de diluição isotópica. Como conseqüênc ia , o uso do r a d i o c r o m a t o de sódio t em se genera l i zado , dando l u g a r a que se a b a n d o n e o u t r o s t r a ç a d o r e s , como o tór io B , o P-32, o Rb-86, o Fe -59 . e t c .
2 — Por o u t r o lado, d a d a s as c a r a c t e r í s t i c a s do Cr-51 como m a r c a d o r de e r i t roc i tos , t e m sido e x t e n s a m e n t e u sado p a r a a d e t e r m i n a ç ã o da
d u r a ç ã o méd ia ( sobrev ivênc ia ) dos m e s m o s . De fa to , não m a r c a n d o out r a s h e m á c i a s depois da h e m o c a t e r e s e ( d i f e r e n t e m e n t e do que se p a s s a com o Fe-59 que é r e a p r o v e i t a d o ) e n ã o d e m a n d a n d o t écn icas complicadas p a r a sua med ição (o que se dá com o N-15 , po r exemplo) e r a de se e s p e r a r que ta l sucedesse .
2 . 1 — Contudo , a ex i s tênc ia da eluição cons t i tu i u m a dif iculdade, à s vezes sér ia , p a r a o cálculo da sobrev ivênc ia dos e r i t r oc i t o s m a r
cados com C r - 5 1 . E r e p r e s e n t a m e s m o , a m a i o r objeção que se pode lev a n t a r ao e m p r e g o desse m a r c a d o r , com essa f ina l idade . Com efe i to , a n ã o se r em casos especiais , não é possível d e t e r m i n a r - s e o r i t m o com que a eluição se p rocessa " i n v ivo" . I s to t e m levado a lguns a u t o r e s , como Neche le s e cois-'", a p r o p o r e m que se calcule a p e n a s a chamada , " m e i a - v i d a a p a r e n t e " ou "me ia -v ida Cr -5r ' . P o r o u t r o lado, a exa t i dão da d e t e r m i -
6 V. M a s p e s , R. R. P i e r o n i e C. R. C a r e l l i
nação da sobrev ivênc ia com o Cr-51 — em conseqüênc ia do não conheci
m e n t o do r i t m o da e lu ição —, é g e r a l m e n t e m e n o r do que a que se pode
t e r com o m é t o d o da so ro a g l u t i n a ç ã o d i ferenc ia l de Ashby- ' -" , por e x e m
plo. E n t r e t a n t o a poss ib i l idade do e m p r e g o do Cr-51 em q u a l q u e r pa
c iente , i n d e p e n d e n t e m e n t e de g r u p o s a n g u i n e o e a v iabi l idade da d e t e r -
m.inação da sobrev ivênc ia dos e r i t roc i tos do pac i en t e em sua p r ó p r i a cir
culação, r e p r e s e n t a m v a n t a g e n s t ão g r a n d e s que t ê m levado ao q u a s e
abandono de o u t r o s mé todos (o de A s h b y , inc lus ive) ( o b v i a m e n t e , nos
cen t ros onde o uso do r a d i o c r o m o é exeqü íve l ) .
2 . 2 •— Cabe aqu i , m a i s u m a obse rvação . H á au tores ' ' p a r a os qua i s
a eluição poder ia ser , a n t e s a p a r e n t e , do que f a to real . O que ocor
r e r i a se r ia u m a m a r c a ç ã o não un i fo rme das h e m á c i a s ou u m efei to tóxico
sobre p a r t e dos glóbulos . E s t e s i n c o r p o r a r i a m q u a n t i d a d e de r ad ioc ro
mo que e s t a r i a n a dependênc ia da " i d a d e " : os m a i s " j o v e n s " i nco rpo rando
m e n o s do q u e os ma i s "ve lhos" , d a r i a m l u g a r a u m a c u r v a de de sapa rec i
m e n t o do Cr-51 da c i rcu lação aná loga à o b s e r v a d a e cujo a spec to é ati-i-
buido à eluição. Que não se t r a t a de efe i to tóxico, decor re da d e t e r m i
nação s i m u l t â n e a da sobrevivência , pelo m é t o d o de A s h b y e pelo r ad io -
c r o m o ' - ' - ' - ' A l é m disso, a ver i f icação de que a eluição ocorre "in v i t r o "
leva-nos a ace i tá - la como ocor rendo , t a m b é m , " in v ivo" . N ã o fica,
porém, exclu ída i n t e i r a m e n t e , a h ipó te se de u m a possível m a r c a ç ã o " n ã o
u n i f o r m e " .
a — Técnica
1 — Marcação dasi hemácias — Segu imos a técn ica de m a r c a ç ã o p reco
n izada por Cooper e O w e n ' . E m f rascos de 100 ml coloca-se u m a
solução de A C D (5 ml) de f ó r m u l a especial , com p H um pouco in fe r io r ao
do ACD c o m u m ( p H e n t r e 5 e 5 ,5) . O f rasco con tendo o A C D é fechado
com ro lha de b o r r a c h a e au toc l avado a 120^0 por 15 m i n u t o s . A l g u n s
a u t o r e s r e c o m e n d a m nova es te r i l i zação dos f rascos não ut i l izados , depois
de 14 d ias . N ã o há , po rém, necess idade desse cuidado, s e m p r e que o
p r e p a r o da solução t e n h a sido fe i to de acordo com as t écn icas r ecomen-
dacías em h ipode rmia .
1.1 — I m e d i a t a m e n t e a n t e s da colhei ta do s a n g u e a se r m a r c a d o ,
adic iona-se ao f rasco , de 80 IJ.C a 120 |jic de C r - 5 1 , sob a f o r m a
de r a d i o c r o m a t o de sódio e m i s t u r a - s e bem. N ã o se deve ad ic ionar o
r a d i o c r o m a t o com m u i t a antecedência" , pois , o f a to p re jud ica sua incorpo
r a ç ã o às h e m á c i a s (por ocor re r r e d u ç ã o ) .
1.2 — A segu i r coloca-se na m i s t u r a , 20 ml de s a n g u e colhido com
se r i nga e a g u l h a s r i g o r o s a m e n t e l impas e secas . A a g u l h a
U s o d o C r - 5 1 e m p e s q u i z a c l ín ica e p r o p e d ê u t i c a 7
b-I — Determinação da volemia
1 — Preparo do padrão — Com s e r i n g a seca e agulha de bom ca l ibre ,
retira-se do f r a sco onde se p rocessou a marcação e depois de prévia homogene ização , cerca de 5 ml da m i s t u r a .
1.1 — T r a n s f e r e - s e p a r a u m t u b o de c e n t r i f u g a ç ã o de m a s s a co
nhec ida .
1.2 — Pesa-se , novamente , o tubo e po r diferença, tem-se a massa
M|, da m i s t u r a que s e r v i r á p a r a a ob tenção do padrão e cál
culo dos r e s u l t a d o s .
deve t e r ca l ibre de 9 a 12 déc imos . O sang-ue é t r a n s f e r i d o p a r a o f rasco ,
de l i cadamen te , a f im de e v i t a r t r a u m a nos glóbulos v e r m e l h o s . I nve r
te -se o f rasco, v á r i a s vezes, c u i d a d o s a m e n t e , p a r a m i s t u r a do s a n g u e com
o an t icoagulan te ' .
1.3 — Deixa-se o f rasco á t e m p e i - a t u r a a m b i e n t e , d u r a n t e me ia ho
ra , t endo-se o cu idado de ag i tá - lo , de l i c adamen te , 3 a 4 vezes ,
d u r a n t e esse t e m p o .
1.4 — E m conseqüênc ia , a c r e s c e n t a - s e à m i s t u r a , u m a solução con
t endo de 20 m g a 50 m g de v i t a m i n a C, que vai a g i r como
r e d u t o r .
2 — Preparo da injeção — Após cinco m i n u t o s , homoge in iza - se o con teú
do do f rasco e, com a g u l h a de bom ca l ib re r e t i r a - s e cerca de 20 ml
da m i s t u r a , com s e r i n g a es té r i l e p e r f e i t a m e n t e seca.
2 . 1 — A s e r i n g a con tendo a m i s t u r a é pesada e a m a s s a a n o t a d a .
2 . 2 —• Após a p e s a g e m , m i s t u r a - s e bem o con teúdo da s e r i n g a (na
p r ó p r i a s e r i n g a ) e in j e t a - se no pac ien te . É r ecomendáve l
q u e a punção venosa se ja fe i ta com auxí l io de u m a s e g u n d a s e r i n g a : u m a
vez que se e s t e j a s e g u r o de que a veia e s t á bem canu lada , s u b s t i t u i - s e a
s e r i n g a (pela que con t ém o m a t e r i a l r ad ioa t ivo ) e in j e t a - se . Deve -se evi
t a r que q u a l q u e r porção de m a t e r i a l r ad ioa t i vo se pe rca no tec ido subcu t âneo . Ass ina l a - se o i n s t a n t e em que t e r m i n a a in jeção.
2 . 3 — A s e r i n g a é n o v a m e n t e pe sada . P o r d i ferença , t e m - s e a m a s
sa M¡ do m a t e r i a l i n j e t ado . Note - se que e s t e con t ém, a lém
da r ad ioa t i v idade l igada aos glóbulos m a r c a d o s , u m a parce la devida ao
Cr -51 que n ã o p e n e t r o u n a s h e m á c i a s .
8 V. M a s p e s , R. R. P i e r o n i e C. R. Ca re l l i
1.3 — Centr ifuga- .se , despreza-se o s o b r e n a d a n t e e r e - suspende- se
os glóbulos com solução fisiológica a b u n d a n t e , p a r a l avagem.
E s t a deve ser p roced ida com cuidado, p a r a e v i t a r hemól i se . Cen t r i fu
g a - s e e r epe t e - se a l avagem 3 a 4 vezes. A l a v a g e m dos glóbulos é fe i ta ,
p o r q u a n t o , in t e res sa a p e n a s , a r ad ioa t i v idade i n j e t a d a l i gada aos glóbulos .
1.4 — Após a ú l t i m a l a v a g e m , ac re scen ta - se á g u a d i s t i l ada à qual
se adicionou 20 m g / l i t r o de c r o m a t o de sódio (não r ad ioa t ivo )
como c a r r e g a d o r , e p a r a hemól i se . Tr-ansfere-se p a r a um balão vo lumé
t r i co de 500 ml. Comple t a - se o vo lume com á g u a d i s t i l ada con tendo cro
m a t o de sódio. A t r a n s f e r ê n c i a deve s e r a m a i s comple t a possível . P a r a
i s to o t u b o é lavado , v á r i a s vezes, com a á g u a que vai c o m p l e t a r o volu
me . A adição de c r o m a t o de sódio, como c a r r e g a d o r , s u g e r i d a por Small
e cois-'"' con t r ibu i m u i t o p a r a a exa t i dão dos r e s u l t a d o s .
2 — Cálculo das "contagens injetadas" — Depois da homoge in ização , pi-
pe ta - se 4 ml da solução ob t ida ac ima, em t u b o p lás t ico (T,,) " p a r a
c o n t a g e m " .
2 . 1 — U s a n d o con tado r de c in t i l ação com cr i s t a l de poço, p roce
de-se à c o n t a g e m de T,,. Se ja c,, a contagem líquida ob t ida
(em i m p u l s o / m i n u t o ) . E s s a c o n t a g e m r e p r e s e n t a 4 / 5 0 0 da cont ida na
m a s s a M,, e l igada aos glóbulos .
2 . 2 — Mul t ip l icando-se c,, por 5 0 0 / 4 = 125, t em-se a c o n t a g e m r e
l a t iva ao Cr-51 cont ido em M,, e l igado aos glóbulos . Ind i -
cando-a com C,„ r e su l t a ,
C„ = 125 . c„ (1)
2 . 3 — Como foi i n j e t a d a u 'a m a s s a M¡ da m i s t u r a (da m e s m a mis
t u r a da qua l se t i rou a m a s s a M,, p a r a o p a d r ã o ) , o to t a l C¡
de contaigens injetadas ( l igadas aos glóbulos) ob tém-se , por r e g r a de t r ê s
s imples e r e su l t a .
Mi C¡ = 125 . c , (2)
M„
Note - se que a p rec i são com que se t e r á C¡ e s t á na dependênc ia dos e r ro s
comet idos n a s p e s a g e n s , a s s i m como na p i p e t a g e m do volurrre " c o n t a d o "
e na p r ó p r i a c o n t a g e m . A ocorrência de hemól i se d u r a n t e a l a v a g e m , a
t r a n s f ê n c i a incomple ta dos glóbulos hemol i sados p a r a o ba lão vo lumét r i co ,
a adso rção do radiocr 'omo à v id ra r i a , ou a hemól i se incomple ta dos eriti-o-
ci tos , são a inda poss íveis c a u s a s de êri-o. Como a d e t e r m i n a ç ã o da m a s s a
Uso d o C r - 5 1 e m p e s q u i z a c l ín ica e p r o p e d ê u t i c a 9
4 — Contagem das amostras e cálculo da voiemia — Os q u a t r o t u b o s de
vem " c o n t a d o s " no m e s m o s i s t e m a ut i l izado na c o n t a g e m de T,,. S e j a m
C-,„ C;ÍI„ CI;I, e Ci-„ as c o n t a g e n s l íquidas (em i m p u l s o s / m i n u t o s , por exem
plo) ob t idas . E m gera l , a d i fe rença e n t r e e s sas c o n t a g e n s é da o rdem
do e r ro que podemos e s p e r a r . Es te decor re da imprec i são com que se r e s
tabelece o nível p r i m i t i v o nos t u b o s de c e n t r i f u g a ç ã o e da n a t u r e z a p r o -
ba l í s t ica da p róp r i a c o n t a g e m . Con tudo , q u a n d o h á s e q u e s t r a ç ã o de er i
t roc i tos . Ciii, é s i gn i f i c amen te maior do que as o u t r a s c o n t a g e n s . N e s t a
h ipó tese , despreza-se e s s e dado e usa-se a média dos r e s t a n t e s : caso con
t r á r i o , t o m a - s e a méd ia dos q u a t r o r e s u l t a d o s . Seja C essa m é d i a :
t em-se ,
C = ~ (3)
C r e p r e s e n t a a c o n t a g e m c o r r e s p o n d e n t e ao Cr-51 cont ido nos glóbulos
p r e s e n t e s em 4 ml de s a n g u e , isto é, n u m vo lume g lobu la r igual a 4 . H , ml.
pedo ser fe i ta com prec isão m u i t o ma io r do que a do vo lume por p ipe ta
g e m , es ta e a c o n t a g e m em sí, são a s operações que h a b i t u a l m e n t e l imi
t am a prec isão com que se t em C¡.
3 — . C o l h e i t a e t ratamento d;is a m o s t r a s — Depois de 20,30,60 e 120 mi
n u t o s da in jeção , colhe-se a m o s t r a s de 5 a 6 ml de s a n g u e (puncio-
nando o u t r a veia que não a u sada p a r a a in jeção do m a t e r i a l a t ivo) e, de
u m a das a m o s t r a s , s epa ra - se uma porção p a r a a d e t e r m i n a ç ã o do h e m a
toc r i to ( H | ) .
3 . 1 — A s a m o s t r a s de s a n g u e , i m e d i a t a m e n t e após a colhei ta , são
t r a n s f e r i d a s p a r a t ubos de c e n t r i f u g a ç ã o e o nível a t i ng ido
nê.stes é m a r c a d o com a m á x i m a p rec i são possível .
3 . 2 — A segu i r procede-se a l a v a g e m dos glóbulos por 3 a 4 vezes,
usando-se a b u n d a n t e solução f isiológica.
3 . 3 — Após a ú l t ima l a v a g e m , desp reza - se o s o b r e n a d a n t e e r e s t a
belece-se o nível m a r c a d o com á g u a d i s t i l ada (à qual se a c r e s
cen tou c r o m a t o de sódio não r ad ioa t ivo , como c a r r e g a d o r ) .
3 . 4 — Depois de comple ta hemól ise e homoge in ização , p ipe t a - se 4
ml em tubos p lás t icos p a r a con tagem, m a r c a d o s com T^n,
T:;,,, T,„ e T,,„.
10 V. Maspes , R. R. P ieroni e C. R. Carell i
H,.. C . M„ 0 ,92. H¡
C . M„
V = 543,48 . — ^— (5) c„ . M¡
E s t e r e s u l t a d o n ã o depende de H, m a s da re lação e n t r e o h e m a t o c r i t o pe
r i fér ico e o corpora l . A t r i bu indo - se , um va lo r fixo a e s sa re lação , os r e su l
t ados pode rão ser a f e t a d o s po r u m e r r o s i s t emá t i co , d e c o r r e n t e da d i fe ren
ça e n t r e o va lor e fe t ivo dessa re lação e o usado .
b-II — Determinação da sobrevivência
1 — Colheita e preparo das amostras
1.1 — V i n t e e q u a t r o h o r a s após a in jeção dos g lóbulos m a r c a d o s ,
colhe-se u ' a a m o s t r a de 5 a 6 ml de s a n g u e . Repe te - se a
colhei ta com in t e rva lo s de 3 a 4 d ias , por u m per íodo de 25 a 35 d ias
(oi to a dez a m o s t r a s ) . O t e m p o de a m o s t r a g e m pode rá s e r a u m e n t a d o
ou reduzido , s egundo o p r o b l e m a clínico com que nos d e f r o n t a m o s . E m
pa r t i cu l a r , o in t e rva lo e n t r e as co lhe i tas pode se r r eduz ido e a b r e v i a d o
o t e m p o de a m o s t r a g e m , q u a n d o h á u rgênc i a em se o b t e r o r e s u l t a d o ou
há razões p a r a se s u s p e i t a r de u m a r edução a c e n t u a d a da sobrev ivênc ia .
4 . — Como f o r a m i n j e t a d a s C¡ " c o n t a g e n s " e em 4.H, ml t em-se C, a
di luição se fez n u m v o l u m e V ,̂ d e glóbulos, que se o b t é m por
r e g r a de t r ê s s imples , do que r e su l t a ,
Ci c„ . Mi
V , = = 500 , . H, (4)
C / 4 . H , C . M„
A prec i são com que se rá conhecido depende rá , a lém dos f a t o r e s j á indi
cados, da e x a t i d ã o com que o h e m a t o c r i t o é d e t e r m i n a d o . N o t e m o s que
p a r a H, devemos t o m a r o h e m a t o c r i t o cor r ig ido (pa ra o p l a s m a " t r a p p e d " ) .
P a r a ta l b a s t a mul t ip l i ca r por 0,96 o r e s u l t a d o encon t r ado .
4 . 2 — O vo lume s a n g u i n e o V, s e r á obt ido j o g a n d c - s e com o h e m a t o
cr i to corpora l H,,.. A s s u m i n d o este como sendo 0,92 H,, r e
su l ta ,
V,. c„ . M¡ H,
V = = 500 . .
U s o d o C r - 5 1 e m p e s q u i z a c l ín i ca c p r o p e d ê u t i c a H
2 — Contagem das amostras
2 . 1 — As a m o s t r a s são " c o n t a d a s " num<i m e s m a d a t a . Dessa for
m a evi ta -se a necess idade de co r reção do d e c a i m e n t o rad io
a t ivo do Cr-51 e t e m - s e m a i s s e g u r a n ç a de que as condições do s i s t ema
de de teção são as m e s m a s em todas a s medições . O t e m p o de c o n t a g e m
é escolhido de ta l f o r m a que a c o n t a g e m da ú l t ima a m o s t r a (a menos
a t i v a ) to ta l ize cerca de 10.000 impulsos e t o d a s a s a m o s t r a s são c o n t a d a s
d u r a n t e esse m e s m o t e m p o ( " c o n t a g e m com t e m p o p r é - e s t ab e l ec id o " ) .
2 . 2 — Os r e s u l t a d o s são levados em u m a t abe la de .sete e n t r a d a s .
N a p r i m e i r a , m a r c a - s e a d a t a da co lhe i r a ; na s egunda , o
in t e rva lo de t e m p o (em dias ) decorr ido desde o dia s e g u i n t e ao da inje
ç ã o ; n a t e r ce i r a , o n ú m e r o de o rdem da a m o s t r a ; na q u a r t a , a c o n t a g e m
b r u t a ; na q u i n t a , a c o n t a g e m de f u n d o ; na s e x t a , a c o n t a g e m l íquida e
na s é t i m a a re lação e n t r e a c o n t a g e m l íqu ida d a s a m o s t r a s sucess ivas e
a da p r i m e i r a , mu l t i p l i cada por cem ( c o n t a g e m r e l a t i v a ) . A c o n t a g e m
de fundo é medida , s i s t e m a t i c a m e n t e , no início e no f im das c o n t a g e n s e,
e v e n t u a l m e n t e , e n t r e a c o n t a g e m das a m o s t r a s sucess ivas . Como todas
a s a m o s t r a s são c o n t a d a s d u r a n t e um m e s m o t e m p o (que é, t a m b é m , o em
que d e t e r m i n a m o s a c o n t a g e m de f u n d o ) , podem se r u s a d a s d i r e t a m e n t e ,
s em necess idade de r edução a impulsos por m i n u t o . Na t abe l a re fe r ida ,
são a inda a s s ina l ados (Tabela I ) n o m e e n ú m e r o de r e g i s t r o do pac ien te ,
a s s im como a d a t a da injeção, o t e m p o de c o n t a g e m e a d a t a da c o n t a g e m .
A s co lhe i tas devem se r fe i t as com o pac ien te nas m e s m a s condições. De
prefei-ência, em repouso , em decúbi to dorsa l e no m e s m o h o r á r i o .
1.2 — Cada a m o s t r a de s a n g u e , logo após a colhei ta , é t r a n s f e r i d a
p a r a um tubo de c e n t r i f u g a ç ã o com a n t i - c o a g u l a n t e , m a r
cando-se c u i d a d o s a m e n t e o nivel super ior a t i ng ido . E m segu ida cen t r i fu
ga-se (2.500 r p m d u r a n t e 20 m i n u t o s ) , despreza - se o p l a s m a e res tabe lece -
se o vo lume p r i m i t i v o com o r igor possível , u sando á g u a d i s t i l ada à qual
se ac rescen tou c r o m a t o de sódio (não r a d i o a t i v o ) , como c a r r e g a d o r . Or̂
glóbulos so f re rão hemól i se e, p a r a que es ta se ja comple ta , é conven ien te
a g i t a r o t ubo .
1 .3 — U m a a l iquota (4 ml, em nosso c a s o ) , é t r a n s f e r i d a p a r a um
t u b o de c o n t a g e m , p a r a m e d i ç ã o pos te r io r . N o t u b o co r r e s
p o n d e n t e a cada a m o s t r a m a r c a - s e a d a t a em que a colhei ta foi p rocedida
e a o rdem.
12 V. M a s p e s , R. R. P i e r o n i e C. R. Ca re l l i
Data Dias n.o da
a m o s t r a
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
contagem ' c o n t a g e m bruta de fundo
c o n t a g e m l íquida
c o n t a g e m relat iva
3 — Cálculo da sobrevivência — O p r o c e d i m e n t o de cálculo a se a d o t a r na
d e t e r m i n a ç ã o da sobrev ivênc ia é condic ionado por d i f e r e n t e s f a to
re s , a l g u n s re lac ionados com o p rob l ema hemato lóg ico em causa e o u t r o s
com a f ina l idade q u e se t e m e m v i s t a . Com efei to, sabe-se q u e a depen
dência das c o n t a g e n s ( r ea l i zadas n u m a m e s m a d a t a ) com o t e m p o , se
t r a d u z , a n a l i t i c a m e n t e , por exp re s sões d i f e r e n t e s " ' - - " s e g u n d o e x i s t a m
ou n ã o f a t o r e s de a g r e s s ã o " e x t e r n o s " ou defe i tos i n t r ín secos nos g lóbu
los, e t c . P o r o u t r o lado, casos há , em que o c o n h e c i m e n t o de que a d u r a
ção da vida dos e r i t roc i to s acha - se s i g n i f i c a n t e m e n t e a l t e r a d a (d iminu i
da, em g e r a l ) , é c l i n i camen te s a t i s f a tó r i o . N o u t r o s , po rém, como q u a n
do se dese ja e s t u d a r a e r i t roc inese , há a necess idade de se o b t e r a d u r a ç ã o
méd ia da vida d a s h e m á c i a s com a ma io r e x a t i d ã o poss ível . N e s t a s cir
c u n s t â n c i a s é prefer íve l , de início, s u b m e t e r os dados a u m t r a t a m e n t o
que , em p r i m e i r a a p r o x i m a ç ã o , se aplica a q u a l q u e r caso. Ao m e s m o
t e m p o , d e s e j a m o s a d v e r t i r que , q u a l q u e r que se ja o mé todo de cálculo
ado t ado , os r e s u l t a d o s são vál idos d e n t r o de c e r t a s h ipó teses . U m a p r e
m i s s a a d m i t i d a — expl íc i ta ou i m p l i c i t a m e n t e — na g e n e r a l i d a d e dos
p r o c e d i m e n t o s d e cálculo que t ê m sido p ropos tos , é a cons t ânc i a do valor médio da volemia d u r a n t e o per íodo da a m o s t r a g e m .
3 . 1 — Procedimento geral — A s s u m i n d o que a d e s t r u i ç ã o d a s h e
m á c i a s se dá ao acaso e que a q u a n t i d a d e de Cr-51 que elui
Tabe la I
N o m e do p a c i e n t e ; . R. G.:
D a t a d a i n j e ç ã o : • • D a t a da c o n t a g e m :
T e m p o d e c o n t a g e m : • •
U s o do C r - 5 1 cm p e s q u i z a c l ín ica e p r o p e d ê u t i c a 13
é proporc iona l à p r e s e n t e , ob tém-se ' " a seg-uinte e x p r e s s ã o pa ra a con
t a g e m da a m o s t r a colhida n u m a d a t a t,
c ( t ) = c„ . e (6)
onde k é a constante de destruição ou de morte das h e m á c i a s e k, é a constante de eluição. A vida média T dos e r i t r oc i t o s é, no caso, d a d a pelo
recíproco de k e a meia-vida T y , — t e m p o f indo o qual o n ú m e r o de gló
bulos m a r c a d o s caí à m e t a d e — é 0,693. T , onde o coeficiente 0,693 é
o l o g a r i t m o n a t u r a l de 2 :
T = 1/k T... = 0 ,693 . T (7)
o r i t m o de va r i ação (d iminu ição) da a t i v i d a d e das a m o s t r a s suces s ivas
(med idas n u m a m e s m a d a t a ) depende de k+k,, cujo rec íproco dá a vida média aparente T, . E s t a acha - se l igada à a s s i m c h a m a d a meia-vida Cr-51 ou meia-vida aparente Tr,, pela re lação, T^,-= 0 ,693.T„. E s t a me ia -
vida a p a r e n t e r e p r e s e n t a o in t e rva lo de t e m p o e n t r e a s co lhe i tas de d u a s
a m o s t r a s cu ja s a t i v i d a d e s (med idas n u m a m e s m a d a t a ) e s t ão e n t r e si
como 2 e 1 ;
T , = l / ( k + k , ) T . . = 0 ,693 . T , (8)
Ind icando com T,, o tempo de meia-eluição ou sem!-período de eluição,
t em-se , 0,693 0,693 0,693
k, = 0 ,693 / T„ = + — (9) T.-.- Ty2 T,.
onde, T„ .T . ,
T = (10) T,. — T . .
T = Ti/2 / 0,693 = 1,443. TVi (11)
3 . 1 . 1 . — P a r a a c o n t a g e m re l a t iva t em-se ,
R = 100 — = 100 . e (12 Co
T o m a n d o o l oga r í t imo n a t u r a l ,
log R = log 100 — ( k + k j ) t (13)
' J
3 . 1 . 2 — As c o n t a g e n s r e l a t i v a s são r e p r e s e n t a d a s n u m grá f ico
l inear ( f i g u r a 1) e n u m grá f i co semi - loga r í tmico ( f i g u r a
2 ) . No p r ime i ro , pela posição média dos pon tos t r a ça - s e u m a c u r v a ex-
14 V. M a s p e s , R. R. P i e r o n i c C. R. C a r e l l i
ponencia l e, no segundo , u m a r e t a . A l inha a s s i m ob t ida é a curva de sobrevivência. E s t a n ã o p a s s a r á , n e c e s s a r i a m e n t e , pelo pon to que r e p r e
sen t a a c o n t a g e m re l a t i va (lOO'/í ) c o r r e s p o n d e n t e à p r i m e i r a a m o s t r a
( t e m p o z e r o ) .
N o g rá f i co l inear , t r a ç a - s e pelo p o n t o t = 0 , u m a t a n g e n t e à c u r v a de
sob rev ivênc ia : a in t e r secção des t a com o eixo das abcissas-" da r - se -á no
ponto t = T, . Tem-se , a s s i m , u m a p r i m e i r a e s t i m a t i v a da v ida m é d i a
a p a r e n t e . U m a s e g u n d a e s t i m a t i v a pode s e r ob t ida a p a r t i r da inc l inação
Fie. I
I- R= 100 c ( t) /co ÜTongente por t = 0
da r e t a no g rá f i co semi - loga r i tmico , pois , o coef ic iente a n g u l a r da m e s m a
é — l / ( k - l - k , ) = T;,. P o r o u t r o lado, T,, a i n d a pode s e r e n c o n t r a d o , no g r á
fico semi - loga r í tmieo , t i r a n d o - s e u m a para le la r ' à r e t a t r a ç a d a , pelo
ponto do eixo das o r d e n a d a s que r e p r e s e n t a log 100 e p r o c u r a n d o a abc i ssa
U s o do C r - 5 1 e m pesqu iza c l ín ica e propedêut i ca 15
que, em r', co r r e sponde à o r d e n a d a r ep resen ta t iva - ' ' de R = 37 'X. A
p a r t i r de T,, pode-se ca lcular T. Mais usual , po rém, é d e t e r m i n a r - s e , de
inicio, a meia-vida Cr-51 (T<,), p r o c u r a n d o - s e (no g rá f i co l inea r ou no
semi - loga r í tmico ) o t e m p o f indo o qual R cai à m e t a d e . Obt ido T.-r cal-
Fig . 2
cula-se T por i n t e r m é d i o d a (10) o que imploca no c o n h e c i m e n t o de T,. (o que , a l iás , ocorre q u a n d o d e s e j a m o s p a s s a r de T„ p a r a T ) . Acontece
que T,, a s s u m e , p a r a cada indiv íduo, va lo r d i v e r s o : na l i t e r a t u r a encon
t r a m - s e va lo res que vão de 45 a 90 d ias e indicações de que T,, n ã o t e m
re lação def in ida com idade, sexo, e n t i d a d e mórb ida , biot ipo, raça , e t c .
P o r esse mot ivo , c o s t u m a m o s t o m a r T,. igual a 60 d i a s . o b v i a m e n t e , a
a r b i t r a r i e d a d e dessa escolha d e t e r m i n a um e r r o s i s t e m á t i c o no cálculo da
sobrev ivênc ia , inf luindo na exa t i dão dos r e s u l t a d o s . Calculado Ti,^ , T
é d a d o pela (11 ) .
3 . 1 . 3 — Dese jando-se p a r a T„ um va lor m a i s s a t i s f a t ó r i o do que
o obt ido a t r a v é s dos g rá f icos , pode-se r e c o r r e r ao m é t o d o
dos m í n i m o s q u a d r a d o s . A j u s t a - s e a (6) ou a (12) aos dados por esse
mé todo . Do pon to de v i s t a d a p r á t i c a c o r r e n t e , o p r o c e d i m e n t o é t r a b a
lhoso, e, em ge ra l , i n t e i r a m e n t e desneces sá r io .
3 . 1 . 4 — Q u a n d o os pon tos , no g rá f i co semi - loga r í tmico , n ã o se
a j u s t a m bem a u m a r e t a , deve-se p r o c u r a r o u t r o s p roced i
m e n t o s de cá lcu 'o .
18 V. M a s p e s , R. R P i e r o n i e C. R. C a r e l l i
' c ( t , ) ! ^ ' c„
e x p r e s s ã o que p e r m i t e o cálculo de T. Par-a o b t e r k, b a s t a reso lver a
equação c ( t , ) . x - — 2 c ( t , ) . x + c ( t , ) = O (18)
onde c ( t , ) e c(t;.) t ê m o s igni f icado ac ima e c(t:!) é o valor de c ( t ) p a r a
t igual a 3t , e X é e ^""i*' . Obt ido x calcula-se ki t o m a n d o o l o g a r í t i m o
de x : log X = — k , t , (19)
3 . 2 — Outros prccedimentos de cálcuío — Ocor rendo a h ipó te se
a v e n t a d a em 3 . 1 . 4 e 'ou se t e m r-azões p a r a f o r m u l a r o u t r a s
h ipó teses em re lação ao processo de d e s t r u i ç ã o dos e r i t roc i to s , s u b m e t e m o s
os dados a o u t r a s manipulações. A escolha do novo p r o c e d i m e n t o de cál
culo é fe i ta em base ao primeir^o r e s u l t a d o e a ou t ro s dados , clínicos e la
bo ra to r i a i s . Devemos a d v e r t i r que , n e m s e m p r e , e n c o n t r a m o s soluções
i n t e i r a m e n t e s a t i s f a t ó r i a s p a r a a q u e s t ã o .
3 . 2 . 1 — E n c o n t r a n d o - s e T d e n t r o da " f a i x a n o r m a l " (70 a 130
d ias ) ou m u i t o p r ó x i m a des ta , procur^a-se a . jus tar aos da
dos ( con tagens e t e m p o ) a equação
c ( t ) = c„ ( 1 — t T ) . e (14)
que descreve bem a dependência das c o n t a g e n s ( rea l i zadas n u m a m e s m a
d a t a ) das a m o s t r a s sucess ivas , com o t e m p o , q u a n d o a s h e m á c i a s são
" n o r m a i s " . E s s a equação p e r m i t e ob te r T e k,, não havendo necess ida
de de se a s s u m i r um valor a r b i t r á r i o p a r a T,. (e p o r t a n t o p a r a k , ) . Dois
c a m i n h o s podem ser seguidos , pa r t i ndo - se da ( 1 4 ) . O p r i m e i r o cons i s te
em se d e t e r m i n a r os va lores de T e k,, a j u s t a n d o - s e a (14) aos dados pelo
mé todo dos m í n i m o s q u a d r a d o s . É o p r o c e d i m e n t o ma i s prec iso , m a s não
aconse lháve l — do ponto de v i s t a da p r á t i c a c o r r e n t e — a m e n o s que se
t e n h a à d isposição um c o m p u t a d o r e le t rônico . O ou t ro cons i s te no se
gu in t e ' " : Po r meio de um gráf ico l inear , em que r e p r e s e n t a m o s as con
t a g e n s em função do t e m p o , d e t e r m i n a m o s a s c o n t a g e n s que t e r í a m o s
p a r a a m o s t r a s colhidas n u m a d a t a t, e n u m a d a t a p o s t e r i o r t j = 2 t i .
Tem-se ,
c ( t , ) = c „ ( l — t , / T ) . e~-^^ (15)
c ( t , ) = c „ ( l — 2 t , / T ) . e -"^' . (16)
E levando a (15) ao q u a d r a d o e d ividindo a (16) pelo r-esuitado, t e m - s e ,
c ( t , ) 1
( 1 _ 2 t , / T ) ( l — t , / T ) - ^ ' (17)
Uso d o C r - 5 1 e m p e s q u i z n c l ín i ca e p r o p e d ê u t i c a 17
3 . 2 . 1 . 1 — R e p r e s e n t a d o com T J/i o t e m p o f indo o qual m e t a d e
da população m a r c a d a de sapa rece d a c i rculação, t e m - s e
T = 2 . T % (19)
N o t e m o s que no caso T1/2 r e p r e s e n t a , t a m b é m , o que em méd ia vão v iver
(depois da m a r c a ç ã o ) a s h e m á c i a s m a r c a d a s .
3 . 2 . 2 — H a v e n d o indicações de que a s h e m á c i a s , desde sua for
mação , f i cam su,]eitas a um f a t o r letal , p r o c u r a m o s a j u s t a r
aos d a d o s a equação ' "
- K t - K L (e — e ) - k i t
c ( t ) = c„ . e (21) - K L
1 — e
onde K é a consta.nte de agressão. N u m grá f ico semi - loga r í tmico essa
equação é r e p r e s e n t a d a por u m a cu rva que se decompõe em duas r e t a s ,
uma de coeficiente a n g u l a r — ( K + k , ) e o u t r a de coef ic iente a n g u l a r — k, .
100
FfG. â
AM.
K + k.tl-e-'*'-)
Fig. 3
18 V. Maspes , R. R. P ieroni e C. R. Carel l i
N a f i g u r a 3 r e p r e s e n t a m o s u m caso no qua l ocor reu a h ipó te se s u p o s t a .
U m a aná l i se g rá f i ca da c u r v a t r a ç a d a e m papel s emi - loga r í tmico p e r m i t e
o b t e r e s t i m a t i v a s desses coef ic ientes . A e x p r e s s ã o da vida méd ia T é,
a g o r a ,
T = ( l / K ) — K L
1— e (22)
onde L é a vida méd ia que t e r í a m o s caso não oco r r e s se a g r e s s ã o . A
d e t e r m i n a ç ã o de T envolve, no caso, L e K. O a j u s t e da (21) aos dados
( c o n t a g e n s e t e m p o ) pelo mé todo dos m í n i m o s q u a d r a d o s p e r m i t e encon
t r a r a s c o n s t a n t e s em q u e s t ã o e o cálculo de T. No caso da f igu ra 3 ,
ob teve-se K = 0,014; L = 100 e T = 53,8 d ias .
0.1
0.01
FIG. 4
A.M.
I - log C ( t )
--kt a-KL
T= 53.8 dias
15 30
L= 100 dias
4 5 60
Fig. 4
75 90 105
dias
3 . 3 — Quando os p r o c e d i m e n t o s a n t e r i o r e s não são ap l icáve is e / o u
não conduzem a r e s u l t a d o s c l i n i camen te s a t i s f a t ó r i o s , recor
r e m o s à equação
U s o do Ci'-51 e m p e s q u i z a c l ín ica e p r o p e d ê u t i c a 19
T = — (24) 6.T;
e s u a d e t e r m i n a ç ã o envolve o cálculo de Ti e T.,„ o que se faz a j u s t a n
do-se a (23) aos dados , pelo mé todo dos m í n i m o s q u a d r a d o s . A (24)
dá a v ida méd ia q u a n d o T,., é m e n o r que T i : n a h ipó t e se c o n t r á r i a , T s e r á
dado po r e x p r e s s ã o aná loga , que se ob t ém, p e r m u t a n d o n a (24) esses dois
s ímbolos .
4 -— Comentários
4 . 1 — A d e t e r m i n a ç ã o da sobrevivênc ia com auxí l io do Cr -51 , da
m e s m a f o r m a que pelo mé todo de A s h b y , envolve u m a a n á
lise da evolução de " c o n t a g e n s " com o t e m p o . E s t a é fe i ta p rocu rando - se
a j u s t a r equações empí r i ca s ou deduz idas em base a h ipó te ses p laus íve is ,
aos r e s u l t a d o s das medições r ea l i zadas . V á r i o s au tores" ' " ' - ' " ' ' - ' - ' " ' t e m
e x a m i n a d o a q u e s t ã o . A c i m a ind icamos o que a exper iênc ia nos t e m su
ger ido . Podem ocor re r s i tuações n a s qua i s os p r o c e d i m e n t o s de cálculo
indicados não se m o s t r e m s a t i s f a t ó r i o s e o u t r o s c a m i n h o s são poss íveis .
D e s e j a m o s a s s i n a l a r que, em cerca de t r e z e n t a s d e t e r m i n a ç õ e s de sobre
vivência (com uso do Cr-51) j á r ea l i zadas e m nosso L a b o r a t ó r i o , o pr i
mei ro p r o c e d i m e n t o ( 3 . 1 ) se m o s t r o u adequado , na g r a n d e ma io r i a dos
casos . Vez ou o u t r a , o u s o da (21) ou da (23) levou a r e s u l t a d o s capazes
de p e r m i t i r me lho r e n t e n d i m e n t o do q u a d r o clínico. No e s t u d o da sobre
vivência de e r i t roc i to s de indiv íduos n o r m a i s a (14) é a equação de esco
l h a : po rém, os r e su l t ados obt idos com a m e s m a — q u a n d o a s a m o s t r a s
de s a n g u e são colhidas d e n t r o do p r i m e i r o m ê s após a m a r c a ç ã o — não
d i fe rem, de f o r m a s ign i f i can te , dos que se t e m com a ( 6 ) , f a to esse j u s
t i f icado po r P ie ron i e col'*'.
4 . 2 — Di f e r en t e s au tores ' " ' - " r e f e r e m u m a queda inicial , m a i s a c e n t u a d a , da r a d i o a t i v i d a d e dos g lóbulos , n a s p r i m e i r a s
c ( t ) = c . , ( l — t / T ¡ ) ( l — t / T . . , ) . e (23)
p r o p o s t a po r CaHender e coHs" p a r a o mé todo de A s h b y e a d a p t a d a ao
mé todo do r ad ioc romo. T¡ é a du ração m é d i a da vida das h e m á c i a s na
ausênc ia de f a t o r a g r e s s i v o e T,.x é um t e m p o ca r ac t e r í s t i co deste. E s s a
equação se t r a n s f o r m a na ( 1 4 ) , q u a n d o não há f a t o r ag re s s ivo , pois ,
l /T , , , é e n t ã o nulo. A vida média (e fe t iva ) das h e m á c i a s é dada por
20 V. M a s p e s , R. R. P i e r o n i e C. R. C a r e l l i
vin te e q u a t r o t ioras após a m a r c a ç ã o e re in jeção . A razão dêsse f a t o não
se acha bem esclarecida : pode ser i n t e r p r e t a d o admi t i ndo - se que p a r t e
do Cr-51 que p e n e t r a nos glóbulos se acha f r a c a m e n t e / ou não l igada à
g lobina , e lu indo m a i s r a p i d a m e n t e , com semi-per íodo de 1,5 dias-'". Co-
ihendo-se a p r i m e i r a a m o s t r a a se r u t i l izada na d e t e r m i n a ç ã o da sobrev i
vência , v in te e q u a t r o h o r a s depois da m a r c a ç ã o , o efei to d e c o r r e n t e dêsse
f a to é, p r a t i c a m e n t e , e l iminado .
4 . 3 — A i n t e r c o r r ê n c i a de a l t e r ações n a s condições do p a c i e n t e
pode a l t e r a r ou não, o aspec to da cu rv a de sobrev ivênc ia .
I m a g i n e m o s que o r i t m o de p rodução dos glóbulos se ja , a p a r t i r de um
dado m o m e n t o , d iminu ido , t r a d u z i n d o - s e por u m a r edução do h e m a t o c r i t o .
Como o o r g a n i s m o t e n d e a m a n t e r a volemia, o vo lume de d i s t r i b u i ç ã o pe r
manece o m e s m o : n e n h u m a a l t e r a ç ã o s e r á o b s e r v a d a na c u r v a de sobre
vivência . O m e s m o ocorre q u a n d o h á u m a u m e n t o do r i t m o de p r o d u ç ã o
( consequen te a t r a t a m e n t o com cor t icoïdes , po r exemplo) : o h e m a t o c r i
to t e n d e a a u m e n t a r , m a s desde que a volemia não se a l t e re , o a spec to
da c u r v a de sobrev ivênc ia c o n t i n u a r á o m e s m o . S u p o n h a m o s , a g o r a , q u e
o p a c i e n t e e n t r e em cr ise hemol í t i ca , h a v e n d o u m a r edução do h e m a t o
c r i t o : o a spec to da c u r v a de sobrev ivênc ia se rá modi f icado e essa m u d a n ç a
t r a d u z u m a r edução da vida dos e r i t roc i to s . N a h ipó tese f i g u r a d a , os
dados d e v e r ã o ser r e u n i d o s em dois g r u p o s a s e r e m t r a t a d o s s e p a r a d a
m e n t e . Ter -se-á dois r e s u l t a d o s : um ind ica rá a v ida m é d i a dos glóbulos
v e r m e l h o s do pac i en t e fo ra da c r i se e o ou t ro , d u r a n t e a cr ise . F a t o s e m e
l h a n t e t e r á l u g a r quando , d u r a n t e a p rova , um f a t o r hemol í t ico p r e s e n t e
s e j a r emov ido ou de ixe de a g i r : a sobrev ivênc ia i r á a u m e n t a r , modi f i can-
do-se, c o n s e q ü e n t e m e n t e , o a spec to da cu rva .
4 . 3 . 1 — Os p r o c e d i m e n t o s de cálculo ind icados são vál idos na su
posição de que a volemia do pac i en t e se m a n t e n h a , em
m.édia, c o n s t a n t e . Sabe-se que o o r g a n i s m o t e n d e a m a n t e r a v o l e m i a :
e s t a acha - se su je i t a a oscilações (em conseqüênc ia de d i f e r e n t e s causas ,
como p o s t u r a , por e x e m p l o ) , m a s , seu va lor médio não v a r i a de f o r m a
a c e n t u a d a ( t omando- se o p a c i e n t e em condições a n á l o g a s ) , a m e n o s q u e
o c o r r a m h e m o r r a g i a s . É claro que h a v e n d o modif icações da volemia o
vo lume de d i s t r i bu ição dos g lóbulos m a r c a d o s é a l t e r a d o : a s a m o s t r a s
não r e p r e s e n t a r ã o m a i s a m e s m a f ração dêsse vo lume e i s to i nduz i r á e r r o
n a c o n t a g e m que se t r a d u z i r á poi' u m a d i spe r são — m a i o r ou m e n o r dos
pon tos r e p r e s e n t a t i v o s , ao r e d o r da cu rv a de sobrev ivênc ia . T u r n b u l l e
cols-*- i n d i c a r a m como co r r ig i r esse e r ro , fazendo d e t e r m i n a ç õ e s s e r i a d a s
d a volemia . Do pon to de v i s t a da p r á t i c a c o r r e n t e é p re fe r íve l colher-se
um n ú m e r o r e l a t i v a m e n t e e levado de a m o s t r a s (cerca de dez, no m é t o d o
que ind icamos) : os e r r o s d e c o r r e n t e s d a s osci lações da volemia t e n d e m
a se compensa r .
U s o d o C r - 5 1 c m p e s q u i z a c l ín ica e p r o p e d é u t i c a 21
4 . 3 . 2 — Urna o u t r a causa de e r ro , que pode a f e t a r os dados é re
p r e s e n t a d a pela v a r i a ç ã o da re lação e n t r e o h e m a t o c r i t o
corporal e o per i fé r ico . Tu rnbu l l e cois ' - e x a m i n a m , t a m b é m , essa ques
t ão , ind icando cor reção que envolve — como no caso da volemia — a de
t e r m i n a ç ã o se r iada do vo lume s a n g u i n e o . A nosso ver , u m a a m o s t r a g e m
a d e q u a d a con to rna o p rob lema .
4 . 3 . 3 — E m algun.í casos , o a spec to da cu rva de sobrev ivênc ia
sofre a l t e rações que não podem ser c o n v e n i e n t e m e n t e in-
terpre t fu las . N ã o se pode, en t ão , p r e t e n d e r ob te r va lores precisos p a r a
a v ida média . O mnis (jue ;-e pode fazer são e s t i m a t i v a s g r o s s e i r a s , que
se rão , e n t r e t a n t o , ú te i s do pon to de v i s t a clínico.
4 . 4 — Dian t e do expos to e t endo enr v i s ta que o emprê.go de o u t r a s
equações que não a (6) envolve, quase s e m p r e , o uso do mé-
t(;do dos m í n i m o s q u a d r a d o s , é que r e c o m e n d a m o s , como ro t ina , o pr i
me i ro p roced imen to ( 3 . 1 ) .
R e s u m o
Os a u t o r e s , depoi.i de r e c a p i t u l a r e m , b r e v e m e n t e , a s apl icações que o
Cr-51 t em e n c o n t r a d o em jresquiza clínica e p ropedêu t i ca , e x a m i n a m o
seu e m p r e g o na d e t e r m i n a ç ã o do vo lume g lobu la r e volemia , a s s i m como
no e s tudo da sobr-evivência, dos e r i t roc i to s . Ind icam como, com u m a única
dose do t r a ç a d o r pode se r obt ida a vo lemia e a sobrev ivênc ia , sem neces
s idade da " l a v a g e m " dos glóbulos m a r c a d o s , a n t e s da re in jeção .
A d o t a m e j u s t i f i c a m , um p r o c e d i m e n t o de cálculo da vida méd ia dos
e r i t roc i tos , e x a m i n a n d o v a r i a n t e s ú te i s em a l g u n s casos . C o m e n t a m o
p rob lema das va r iações da volemhi e s u g e r e m a coleta de um n ú m e r o
e levado de a m o s t r a s como capaz de c o m p e n s a r os e r r o s d e c o r r e n t e s de
f lu tuações da volemia e da re lação e n t r e o h e m a t o c i t o corpora l e o per i
férico.
R e s u m e n
Los a u t o r e s , después de r ecap i t u l a r , b r e v e m e n t e , las apl icac iones que
el Cr -51 ha e n c o n t r a d o en investigí ' .ción clínica y p ropedéu t i ca , e x a m i n a n
su empleo en la d e t e r m i n a c i ó n del vo lumen g lobula r y voiemia, así como
en el e s tud io de la sobrev ivenc ia de los e r i t roc i to s . I n d i c a m como, con
una única dosis del t r a z a d o r puede se r ob t en ida la voiemia y la sobrev i
vencia , sin necess idad del lavado de los g lóbulos m a r c a d o s , a n t e s de la
i-einyeción.
A d o p t a n y ju s t i f i can , un p r o c e d i m e n t o de cálculo de la v ida média
de los e r i t roc i tos , e x a m i n a n d o v a r i a n t e s ú t i les en a lgunos casos . Co-
22, V. M a s p e s , P . R. P i e r o n i e C. R. C a r e l l i
A g r a d e c i m e n t o s
Os a u t o r e s agr .adecem ao A l m i r a n t e Octacil io Cunha , D.D. P r e s iden
te da C.N.E.N. e ao Prof. Dr . Oda i r P . Ped roso , D.D. S u p e r i n t e n d e n t e do
Hosp i t a l das Clínicas. G r a ç a s à c o m p r e e n s ã o e boa v o n t a d e dos m e s m o s
é que és te t r a b a l h o se t o rnou possível .
Referências
1 — A d n e r , P . L. a n d S j o ü n , S. — U n e x p e c t e d b l e e d g r o u p i n c o m p a t i b i l i t y r e v e a l e d
by Cr-.51 labell.,,d r ed cel ls — S c a n d . J . C l in . & L a b . I n v e s t . 9: 26,5-629. 1957
2 — A s h b y . W. — T H d r h t e r m i n a ' i o n of t h e l e n g h cf life of t r a n s f u s e d b l o o d c o r p u s c l e s
in m a n — J . E x p . M e d . 28: 2S7-281, 1913.
3 — B i r k e l a n d , S. — A m e t h o d f ; r q u a n t i t a t i v e e v a l u a t i o n o i red cell t u r n o v e r in
h u m a n s . I — N o r m a l v a l u e s — S c a n d . J . C l in . & L a b . I n v e s t . IC: 72-80, 1958.
4 — B i r k e l a n d , S. — A m e t h o d for q u a n t i t a t i v ? e v a l u a t i o n cf r e d cell t u r n o v e r in
h u m a n s : I I — C l i n i c a l a p p l i c a t i o n s — S c a n d . J . C l in & L a b . I n v e s t . 10: 81-90, 1958.
5 — B i r k e l a n d , S. — T h e u s e of i so tope C r - 5 1 for s t u d y i n g d e i l r u c t i o n of r e d cel ls in
h s a l h y h u m a n s — S c a n d . J . Cl in . & L a b . I n v e s t . 1«: 122-132, 1,558.
6 — C a l l e n d - r , S. T., P o w e l l , E, O. a n d W i t t s , L. J . — N o r m a l r e d - c e l l s u i v . v a l in m'_n
a n d w o m e n — J . P a t h , a n d B a c t e r i o l . .5.;: 513-532, 1.Ç47.
7 — C o o p e r , M. a n d O w e n , C. A . — L a b e l i n g h u m a n e r y t h r o c y t e s w i t h r a d i o c h r o n i u m
— J . L a b . & Cl in . M e d . 47: 65-71, 1956,
8 — C r o s b y , W. H . — M'^thods for t h e . ' tudy of h e m o l y t i c d i s e a s e — A n . N e w Y o r k
A c a d . Se i en . 77: (¡15-622, 1959.
9 — C u n n i n g h a m , T. A. M c G i r r , E. M. a n d C l e m e n t , W. E. — T h 3 efioct of p r i o r
c ; n ! a c t b e t w e e n ac id c i t r a t e d e x t r o s e a n d s o d i u m r a d i o c h r o m a t e s : l u t i o n s on t h e
ef f ic iency w i t h w h i c h C r - 5 1 labe l s r a d cel ls — J . L a b . & C l m . M e d , 50: 777-787, 1957.
IC — D o n o h u e , D . M., M o t u l s k y , A. G., G i b l e t , E. R., P i r z i o - B i r o U G., V i r a n u v a t t i ,
V. a n d F i n c h , C. A . — T h e use cf c h r o m i u m as a red cel l t ag — B;'it. J . H a e m a t .
1: 24S-233, 19,55.
11 — B o r n h o i i t , A . C. — T h e i n t e r p r e t a t i o n cl' r ed cell s u r v i v a l c u r v e s — Blood — (!:
1284-1222, 1351.
J2 — E a d i e , G. S. — S t u d i e s of i-ed cell s u r v i v a l — A n n N e w Y o r k A c a d . S e i e n . 77:
737-752, 1C59.
m e n t a n el p rob lema de Ias va r i ac iones de Ia volemia y sug ie ren la colecta
de un elevado n ú m e r o de m u e s t r a s como capaz de c o m p e n s a r los e r r o r e s
r e s u l t a n t e s de las f luc tuac iones de la voiemia y de la re lac ión e n t r e el he
m a t o c r i t o corpora l y el per i fér ico .
U s i do C r - 5 1 c m p e s q u i z n c l in ica c p i o p e d ê u t i c a 2 o
1?. — Ead ie , G. S, a n d B r c w n , I. W. — T h e p o l e n t u d life s p a n a n d u l t i m a i ; s u r v i v a l
cf f resh r e d b lood c : l l : in n o r m a l h e a l t h y r e c i p i e n t s s t u d i e d b y s i m u l t a n e o u s
C r - 5 1 t a g g i n g a n d c i f f e ren t i e l h e m o l y s i s — J. C l in . I n v e s t . 31: 625-63" , 1955.
14 — E l j augh , F . G., E m e r s o n , C. P. , a n d Ro£.:i, J . — T h e use cf r a d i o a c t i v e c h r o m i u m 51
as an e r y t h r o c y t e t a g g i n g a g : n t for t h e d e ' . e r m i n a t i o n of r e d cel l s u r v i v a l in
v i v ; — J . Cl in . Inv;ist . :V1: 12G0-1278, 19.53.
15 — F i e s c h i , A., di P i e t r a n t o n . j , F . y T i z i a n e l l o , . — L a c u r v a de s u p e r v i v e n c i a e r i -
t r o c i t á r i a o b t e n i d a m e d i a n t e cl m é t o d o de l c r o m o r a d i c a c ü v o (Cr -51 ) — S a n g : e
4: 335-3.5C, lZ5d
16 — F r i s c h i , A.. F a n n a c c i u l l i , I., T i z i a n e l l o , A . — L ' i m p i e g o di c m a z i e m a r o a t e con
C r - 5 1 n e l l o .çtudi-: de l ia . i p l cnomcga l i a e de l l e scd i de T a m o , a t t r c s i — M i n e r v a
N u c l c a v a :?: 85-i:4. 1359
17 — Fi-ank, I I . ai ;d Gia.v, S. J . — T h e d e t e r m i n a t i o n cf p l a s m a v o l u m e in m a n w i t h
r a d i o a c t i v e c h r o m i c c h l o r i d e — .T. Cliiy I n v e s t . ;Í2: 991-999, 1353
IS — G i b s o n , J . G. and S c h e i t l i n , W. A. — m e t h o d e m p l o y i n g r a d i o a c t i v e c h r o m i u m for
a s s a y i n g v i ab i l i t y of h u m a n e r y t h r o c y t e s r e t u r n e d to t h s c i r c u l a t i n a f t e r r e f r i
g e r a t e d .storage — J . L a b . & Cl in . M e d . 46: 679-688, 1955
— G r a y , S. J . a n d S t e r l i n g , K. — T h e t a g g i n g of r ed cel ls a n d p l a s m a p r o t e i n s w i t h
r a d i o a c t i v e c h r c m i u m . J . C l in . I n v e s t . 29: 1604-1613, 1S50
20 — G r e g e r s e n , M. I. a n d R a w s o n , R. A . — Blood v o l u m - ~ P h y s i o l . R e v . 3d: 307-342,
1959
N — H a r r i s , I. M., M c A l i s t e r , -J, M. a n d P r a n k e r d , T. A . .1. - T h e r e l a t i o n s h i p cf a b n o r
m a l r ed cel ls to t h e n o r m a l s p l e e n — Cl in . Sc i en . IG. 223-23Ü, 19.57
22 — H u g h e s J o n e s , N. C. a n d Mol l i son , P . L . — T h e i n t e r p r e t a t i o n of m e a s u r e m e n t s
w i t h C r - 5 1 l abe l l ed r ed ce l ls — C h n . Sc i en . 15: 207-218, 1956
23 — J a n d l , J . H . a n d G r e e n b e r g , M. S. — T h e s e l e c t i v e d e s i r u c t i c n of t r a n s f u s e d " c o m -
P ' j t ib le" n o r m a l cel ls in t w o p a t i e n t s w i t h s p l e n o m e g a l l y J . C l in . I n v e s t . 4!t: 233-245, 1957
2'i — J a n d l , ,T. H., G r e e n b e r g . M. S , Y c n e m o t o , R. H . a n d Ca.stel, W. B , — C l i n i c a l d e t e r
m i n a t i o n of t h e s i t e s of red cell eeques ' i - a t ion in h e m e ly t i c a n e m i a s — J . Cl in .
I n v e s t . 35: 842-867, 1955
25 — J o n e s , N. C. H. a n d Szui ' , L. — D e t e r m i n a t i c n of t h e s i tes of red cell d e s t r u c t i o n
u s i n g C r - 5 1 l abe l l ed ce l ls — Br i t H a , m a t . 3: 320-331, 1957
2:; — Mc Cal l , M. S., S u t h e r l a n d , D. A., E i s e n t r a u t , A. M. a n d L a n z , H . — T h e t a g g i n g
cf l e u k e m i c leukocyte.j w i t h r a d i o a t i v o c h r o m i u m a n d m e a s u r e m e n t of t h e in v i v o
s u r v i v a l — J . L a b , & Cl in . M e d . 45: 717-724, 19.55
27 — M a s p e s , V. — S o b r e v i d a d e e r i t rc c i tos . Mod i f i cação do m é t o d o de A : h b y — R e v ,
H c s p . Cl in . U n i v . S, P a u b 12: 208- , 1952
: 8 — M a s p s, v . , F i c r o n i , R. R. o M e l l o n e , O, — S u p e r v i \ - ê n c i a de las s a n g r e s t r a t a d a s
c e m v io le t a d e .genciana. S u i m p o r t â n c i a e m la p ro f i l ax ia d e la e n f e r m e d a d d e
C h a g a s t r a n s m i t i d a m e d i a n t e t r a n s f u s i ó n — S a n g r e 4: 45-59, 1959
2?, — Mol l i ; on , P . L. a n d Veal l , N . — T h e uso of t h e i so tope C r - 5 1 as a l a b e l to r r e d
ce l l s — B"i t . J . H a e m a t . 1: 62-74, 1955
24 V. M a s p c s , 1!. R P . c i o n i e C. R. C a i c l l i
30 — N e c h c l e s , T. F . , W e i n s t e i n , I. M. a n d L c r o y , G. V, — R a d i ; a t i v e s o d i u m c h r c m a t c
for the s i u d y of s u r v i v a l of r ed c e l l ; — I — T h e effect of s o d i u m Chromate on r ed cel ls . — J . L a b . & Cl in . M e d . 42: 358-376, 1E53
31 — Fiei-oni , R. R. e M a s p e s , V. — Al.gur. , aspecto.- c"o p r o b l e m a da d e t e r m i n a ç ã o da
s o b r e v i v ê n c i a dos e r i t r o c i t o s com C r - 5 1 — E m p u b l i c a ç ã o
3? ~ R e a d , R. C , Wi l son , G. W. a n d G a r d n e r , F . H . — T h e u s e of r a d i o a c t i v o s o d i u m
Chromate to e v a l u a t e t h e life s p a n of r ed b lood cel l in h e a l t h y a n d c e r t a i n hr ' .e.-
tological disorders — A m . J , M i d . So. 228: 40-52, 1954
33 — R o c h e , M. — I n v e s t i g a t i o n on t h e physiope. tholc gy of u n c i n a r i a s i s — p a p e r 2323
— S e c o n d U n i t e d N a t i o n s I n t e r n a t i o n a l C e n f e r e n o e o t h e P e a c t f u l l Us 'es of A t o
m i c E n e r g y — G e n e v e , 1958
34 — R o c h e , Iv:., P e r e z - G i m e n e z , M. E., L a y r i s s e , M. a n d Di P i i s c o . E. — S t u ; \ v of
u r i n a r y a n d fecal e x c r e ion cf r a d i o a c t i v e c h r o m i u m C r - 5 1 in m a n . I t s use in
te m e a s u r e m e n t cf i n t e s t i n a l b lood loss a s soc i a t ed w i t h h o o k w o r m inf-ctiei:! —
J . C l in . I n v e s t . SSi: 11831192. 1957
35 — S m a l l , W. J . a n d V e r l e c p . M. C. — D e t e r m i n a t i o n of t h e blood v : l u m e ue-ing r a
d i o a c t i v e C r - 5 1 : mcdificaäcns c l d i e original technique. J . L a b . & Cl in . M e d .
47: 255-260, 195S
33 _ S t e r l i n g , K. a n d G r a y , S. J . — D e t e r m i n a t i o n of t h e c i r c u l a t i n g r e d cell v o l u m e
in m a n b y r a d i o a c t i v e c h r o m i u m — J . Cl in . I n v e s t . 29: 1614-1619, 1950
37 — S t e h l m a n , J r . , F, a n d D o h n e i d c r m a n , M. A . — A p p l i c a t i o n of t h e Cr -512 t e c h n i q u e
t o t h e s t u d y of e x p e i i m e n t a l hemely . i i s in t h e dog . J . L a b . & Cl in . M e d . 4 Í : 72-82,
1956
38 — S t r u m i a , M. M. — T h e life span cf e r y t h i o e y L s a n d t h e i r pos t — t r a n s f u a i o n s u r
v iva l — P r o g r e s s in H e m a t o l . 1: 74-BC, 1957
39 — S u d e r m a n , H . J., W h i l e , F . D . a n d I s r a e l s . L . G. — E l u t i o n of c ' u c m i u m 51 from
l a b e l e d h e m o g l o b i n s cf h u m a n a d u l t a n d co rd b lood — S c i e n c e 126: c5C-'i51, 1957
40 — S u t h : r l a n d , D . A., Mc Call , M, S., G r o v e s , M. T. a n d Mui rheac l , E. E. - T h e s u r
v iva l of h u m a n e r y t h r o c y i e s e s t i m a t e d liy m e a n s ot cel ls l a g g e d w i t h r a d i o a c t i v e
chromium: a s t u d y of t h e normal .state — J . L a b , & Cl in . M e d , 4:!: 717-723, 1954
41 — S u t h e r l a n d , D . A, a n d Mc Cal l , M. S. — T h e m e a s u r e m e n t of s u r v i v a l cf h u m a n
e r y t h r o c y i e s by in v ivo t a g g i n g w i t h C r - 5 1 — Biood I t : 648-349, l s 5 5
42 - T u r n b u l l , A,, H c p e , A . a n d Verc l , D . — T h e effect cf change : ; in r ed cell a n d
p l a s m a volumes in t h e e-timation of r e d ce l l survival — Cl in . S c i e n . IS : 389-399, 1957
43 — Zipf, R, E., W e b e r , J . M. a n d G r o v e , G. R. — T h e a p p l i c a t i o n of g r a v i m e t r i c t e c h
nic to t h e s i m u l t a n e o u s d e t e r m i n a t i o n of p l a s m a v o l u m e u s i n g r a d i o i e d i n a l e d h u
m a n s e r u m a l b u m i n a n d r e d cell m a s s u s i n g s o d i u m r a d i o c h r c m a l e — A m . J .
C l in . P a t h . 25: 487-494, 1955
