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UNIVERDADE DO ESTADO DO AMAZONAS FUNDAÇÃO DE MEDICINA TROPICAL DR. HEITOR VIEIRA DOURADO PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA TROPICAL MESTRADO EM DOENÇAS TROPICAIS E INFECCIOSAS ESCORPIONISMO NO ESTADO DO AMAZONAS, BRASIL: UM ESTUDO BASEADO NA VIGILÂNCIA EPIDEMIOLÓGICA AMANDA DE LOURDES MACIEL QUEIROZ MANAUS 2014

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UNIVERDADE DO ESTADO DO AMAZONAS FUNDAÇÃO DE MEDICINA TROPICAL DR. HEITOR VIEIRA DOURADO

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA TROPICAL MESTRADO EM DOENÇAS TROPICAIS E INFECCIOSAS

ESCORPIONISMO NO ESTADO DO AMAZONAS, BRASIL: UM

ESTUDO BASEADO NA VIGILÂNCIA EPIDEMIOLÓGICA

AMANDA DE LOURDES MACIEL QUEIROZ

MANAUS

2014

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AMANDA DE LOURDES MACIEL QUEIROZ

ESCORPIONISMO NO ESTADO DO AMAZONAS, BRASIL: UM

ESTUDO BASEADO NA VIGILÂNCIA EPIDEMIOLÓGICA

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Medicina Tropical da Universidade do Estado do Amazonas em Convênio com a Fundação de Medicina Tropical Dr. Heitor Vieira Dourado, para obtenção grau

de Mestre em Doenças Tropicais e Infecciosas.

Orientador: Prof. Dr. Wuelton Marcelo Monteiro

MANAUS 2014

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Ficha Catalográfica

Q3eQueiroz, Amanda de Lourdes Maciel. Escorpionismo no Estado do Amazonas, Brasil: um estudo

baseado na vigilância epidemiologica./ Amanda de Lourdes Maciel Queiroz-- Manaus : Universidade do Estado do Amazonas, Fundação de Medicina Tropical, 2015.

Iv,75 f. : il. Dissertação (Mestrado) apresentada ao Programa de

Pós-Graduação em Medicina Tropical da Universidade do Estado do Amazonas – UEA/FMT, 2014.

Orientador: Prof. Dr, Wuelton Marcelo Monteiro 1.Escorpionismo2.Epidemiologia3. Fatores de riscoI. Título.

CDU: 616.089

Ficha Catalográfica elaborada pela Bibliotecária Maria Eliana N Silva,lotada na Escola Superior de Ciências da Saúde - UEA

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FOLHA DE JULGAMENTO

ESCORPIONISMO NO ESTADO DO

AMAZONAS, BRASIL: UM ESTUDO BASEADO

NA VIGILÂNCIA EPIDEMIOLÓGICA

AMANDA DE LOURDES MACIEL QUEIROZ

“Esta Dissertação foi julgada adequada para obtenção do Título de Mestre em Doenças

Tropicais e Infecciosas, aprovada em sua forma final pelo Programa de Pós-Graduação

em Medicina Tropical da Universidade do Estado do Amazonas em convênio com a

Fundação de Medicina Tropical Dr. Heitor Vieira Dourado”.

Banca Julgadora:

______________________________________ Presidente

______________________________________ Membro

______________________________________ Membro

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AGRADECIMENTOS

A Deus por guiar-me em todos os momentos da minha vida.

Aos meus pais e irmãos queridos, pelo imenso amor, incentivo e suporte em todos os

momentos.

Ao meu esposo por todo amor, compreensão e apoio em todos os momentos.

Ao melhor orientador quem alguém pode ter, Dr. Wuelton Marcelo Monteiro, pela

amizade, oportunidade, paciência, confiança, apoio e ensinamentos.

Ao colaborador, Vanderson Sampaio por seu apoio e compartilhar seu conhecimento.

Ao Sr. Nelson Fé por compartilhar conhecimento e informações.

A todos os professores do programa de Pós Graduação em Medicina Tropical.

Aos funcionários da secretaria do programa de Pós Graduação em Medicina Tropical.

À Universidade do Estado do Amazonas pela qualificação profissional oferecida.

À Fundação de Medicina Tropical Dr. Heitor Vieira Dourado pela possibilidade de

utilização das instalações e materiais.

À Fundação de Vigilância e Saúde do Amazonas (FVS-AM).

À CAPES pelo auxílio financeiro.

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DECLARAÇÃO DAS AGÊNCIAS FINANCIADORAS

Este trabalho foi realizado a partir de informações geradas pela Fundação

de Vigilância em Saúde do Estado do Amazonas (FVS-AM).

A Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior

(CAPES) concedeu bolsa à mestranda.

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RESUMO

O escorpionismo ou acidente escorpiônico é o envenenamento causado pela ferroada

do escorpião. É um problema mundial de saúde pública negligenciado em muitas

partes do planeta, tanto pela alta incidência em alguns locais, mas também pelo

potencial de causar quadros clínicos graves e, ocasionalmente fatais, sobretudo em

crianças. As principais regiões onde esse agravo tem grande importância são o

Oriente Médio, África, sul da Índia e América Latina. Uma característica importante

desse agravo é que ocorre tanto no ambiente rural quanto no urbano. Algumas

espécies de escorpião são altamente adaptáveis ao meio modificado pelo homem,

como aquelas pertencentes ao gênero Tityus, o que torna o escorpionismo ainda mais

preocupante. Objetivos: descrever as características epidemiológicas, demográficas,

a sazonalidade, a distribuição geográfica, a incidência do escorpionismo e identificar

fatores de risco para a gravidade dos acidentes escorpiônicos no estado do

Amazonas, Brasil, entre 2007 e 2012. Metodologia: Todas as notificações de

acidentes escorpiônicos no Amazonas registradas entre 2007 e 2012 no banco de

dados do SINAN serviram como base de informação para o estudo. A incidência foi

calculada para 100.000 habitantes. Para a identificação dos fatores de risco para

gravidade foi realizado um estudo de caso-controle. Na análise estatística, após

análise univariada, foi realizada análise multivariada através de um modelo de

regressão logística e teste de ajuste de Hosmer-Lemeshow (p<0,2), foram

empregados teste do qui-quadrado, cálculo do odds ratio, considerando-se intervalo

de confiança de 95%. Resultados: Ocorreram 1.358 casos de escorpionismo no

Amazonas entre 2007 e 2012, atingindo 98,4% dos municípios do estado. A incidência

média no Amazonas foi de 7 por 100.000 habitantes e vem aumentando com a passar

dos anos. O munícipio com maior incidência média foi Apuí com 167 casos por

100.000 habitantes. Foi verificada sazonalidade dos acidentes escorpiônicos, sendo

influenciada pelo período de cheia dos rios no Centro (Rs= 0,479; p< 0,001) e no

Sudoeste (Rs= 0,261; p= 0,032) do estado. A maioria dos registros ocorreu no sexo

masculino (65,7%), 56% dos acidentes ocorreram na zona rural. A faixa etária mais

atingida foi entre 16 e 30 anos de idade (30,5%). A letalidade foi 0,2% no Amazonas

no período analisado. A idade ≤10 anos (p=0,004) e a Mesorregião Sul do estado

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(p=0,006) foram identificados como fatores de risco para gravidade dos acidentes

escorpiônicos no Amazonas.

Palavras-chave: Escorpionismo, Amazonas, epidemiologia, fatores de risco, caso-controle.

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ABSTRACT

The scorpionism is the poisoning caused by the sting of the scorpion. It is a worldwide

public health problem neglected in many parts of the world. There is a high incidence

in some locations and has the potential to cause serious and sometimes fatal clinical

cases especially in children. The main areas where this injury is of great importance

are the Middle East, Africa, South India and Latin America. Important feature of this

condition is that it occurs both in rural as in urban environment with significant

predominance in the latter in some places. Some species of scorpion are highly

adaptable to the environment modified by humans, such as those belonging to the

genus Tityus which makes it even more disturbing scorpion. Objectives: To describe

the epidemiological, demographic characteristics, seasonality, geographic distribution,

the incidence of scorpion and identify risk factors for the severity of accidents involving

scorpions in the state of Amazonas, Brazil, between 2007 and 2012. Methodology:

All notices of Scorpion stings in Amazonas registered between 2007 and 2012 in

SINAN database information served as the basis for the study. The incidence was

calculated per 100,000 inhabitants. For the identification of risk factors for gravity was

made a case-control. In the statistical analysis, after univariate analysis, multivariate

analysis was performed using a logistic regression model and adjusting the Hosmer-

Lemeshow (p <0.2), were used chi-square test, odds ratio calculation, considering a

95% confidence interval. Results: There were 1,358 cases of scorpion in the Amazon

between 2007 and 2012, reaching 98.4% of the state's municipalities. The average

incidence in the Amazon was 7 per 100,000 inhabitants and is increasing with the

passing years. The municipality with the highest average incidence was Apuí with 167

cases per 100,000 inhabitants. Was observed seasonality of Scorpion stings, being

influenced by the full period of the rivers in the center (Rs = 0.479; p <0.001) and the

Southwest (Rs = 0.261; p = 0.032) of the state. Most records occurred in males

(65.7%), 56% of the accidents occurred in the countryside. The most affected age

group was between 16 and 30 years of age (30.5%). The mortality rate was 0.2% in

the Amazon during the period. The age ≤10 years (p = 0.004) and the Greater Region

State South (p = 0.006) were identified as risk factors for severity of accidents involving

scorpions in the Amazon.

Key words: Scorpionism, Amazonas, epidemiology, risk factors, case-control.

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RESUMO LEIGO

O escorpionismo ou acidente escorpiônico é o envenenamento causado pela ferroada

do escorpião. É um problema mundial de saúde pública, pois tem alta ocorrência em

alguns países, além de causar quadros clínicos graves, podendo levar à morte da

vítima, sobretudo em crianças. Além disso, em muitos países os governos não dão a

devida atenção ao problema, não alertando a população e fazendo programas de

prevenção dos acidentes escorpiônicos. As principais regiões onde esse agravo tem

grande importância são o Oriente Médio, África, sul da Índia e América Latina. Uma

característica importante desse agravo é que ocorre tanto no ambiente rural quanto

no urbano. Algumas espécies de escorpião se adaptam facilmente ao meio modificado

pelo homem, como aquelas pertencentes ao gênero Tityus, o que torna o

escorpionismo ainda mais preocupante. O presente trabalho teve como objetivo

descrever as algumas características epidemiológicas, demográficas, a sazonalidade,

a distribuição geográfica, a incidência do escorpionismo e identificar fatores de risco

para a gravidade dos acidentes escorpiônicos no estado do Amazonas, Brasil, entre

2007 e 2012. Foram utilizados dados do SINAN (Sistema de Informação de Agravos

e Notificação) para realização das análises. Como resultados foram encontrados

1.358 casos de escorpionismo registrados no Amazonas entre 2007 e 2012, atingindo

98,4% dos municípios do estado. A incidência média no Amazonas foi de 7 por

100.000 habitantes e vem aumentando com a passar dos anos. O munícipio com

maior incidência média foi Apuí, no Sul do estado, com 167 casos por 100.000

habitantes. Foi verificada sazonalidade dos acidentes escorpiônicos, sendo

influenciada pelo período de cheia dos rios no Centro e no Sudoeste do estado. A

maioria dos registros ocorreu no sexo masculino (65,7%), 56% dos acidentes

ocorreram na zona rural. Indivíduos com idade entre 16 e 30 anos de idade (30,5%)

foram os mais atingidos. A letalidade foi 0,2% no Amazonas no período analisado,

sendo todas as mortes ocorridas em crianças com 1 a 10 anos de idade. A idade ≤10

anos e a Mesorregião Sul do estado foram identificados como fatores de risco para

gravidade dos acidentes escorpiônicos no Amazonas.

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Distribuição mundial do escorpionismo.........................................................1

Figura 2. Gradiente de riqueza de espécies para as principais famílias com ocorrência

no Brasil......................................................................................................................10

Figura 3. T. obscurus.................................................................................................16

Figura 4. T. metuendus..............................................................................................17

Figura 5. T. silvestris..................................................................................................18

Figura 6. Diagrama de seleção de casos e controles................................................24

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LISTA DE QUADROS

Quadro 1. Classificação dos acidentes escorpiônicos quanto à gravidade e

manifestações clínicas..................................................................................................5

Quadro 2. Tratamento dos acidentes escorpiônicos....................................................8

Quadro 3. Principais espécies de escorpiões com importância médica no Brasil.......11

Quadro 4. Espécies de escorpiões encontradas na Amazônia brasileira pertencentes

à família Chactidae.....................................................................................................14

Quadro 5. Espécies de escorpiões encontradas na Amazônia brasileira pertencentes

à família Buthidae.......................................................................................................15

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LISTA DE ABREVIATURAS, SÍMBOLOS E UNIDADES DE MEDIDA

CAPES Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior

CD14 Cluster of differentiation 14

CEP Comitê de Ética em Pesquisa

FMT-HVD Fundação de Medicina Tropical Dr. Heitor Vieira Dourado

IBGE Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística

IL-6 Interleucina – 6

K Potássio

LTB4 Leucotrieno B4

MS Ministério da Saúde

Na Sódio

PGE2 Prostaglandina 2

Rs Rô de spearman

SINAN Sistema de Informação de Agravos e Notificação

TLR Toll – like receptors

TNF-α Fator de Necrose Tumoral - α

WHO World Health Organization

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SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO.........................................................................................................1

1.1 Epidemiologia.........................................................................................................1

1.1.1 Acidentes escorpiônicos no mundo.....................................................................1

1.1.2 Fatores associados ao escorpionismo.................................................................3

1.1.3 Aspectos clínicos.................................................................................................4

1.1.4 Tratamento..........................................................................................................7

1.2 Acidentes ecorpiônicos no brasil............................................................................8

1.2.1 Vigilância e carga dos acidentes escorpiônicos no brasil....................................8

1.2.2 Fauna escorpiônica no brasil...............................................................................9

1.2.3 Distribuição geográfica e principais espécies de escorpião com importância médica no brasil..........................................................................................................11

1.3 Acidentes escorpiônicos na amazônia..................................................................12

1.3.1 Espécies de escorpião na amazônia brasileira..................................................19

1.3.2 Principais espécies com importância médica na amazônia brasileira...............15

1.3.2.1Tityus obscurus................................................................................................16

1.3.2.2 Tityus metuendus............................................................................................17

1.3.2.3 Tityus silvestris................................................................................................17

1.4 JUSTIFICATIVA....................................................................................................19

2. OBJETIVOS...........................................................................................................20

2.1 Gerais...................................................................................................................20

2.2 Específicos...........................................................................................................20

3. METODOLOGIA.....................................................................................................21

3.1 Modelo de estudo..................................................................................................21

3.2 Área de estudo......................................................................................................21

3.3 População de estudo............................................................................................21

3.4 Coleta de dados....................................................................................................22

3.5 Variáveis analisadas.............................................................................................22

3.6 Delineamento amostral.........................................................................................22

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3.7 Análise estatística.................................................................................................25

3.8 Distribuição geográfica dos acidentes..................................................................26

3.9 Questões éticas....................................................................................................26

4. RESULTADOS ......................................................................................................27

5. DISCUSSÃO..........................................................................................................51

6. CONCLUSÃO.........................................................................................................55 7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS......................................................................56

8. ANEXOS.................................................................................................................62

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1. INTRODUÇÂO

1.1 EPIDEMIOLOGIA

1.1.1 Acidentes escorpiônicos no mundo

O escorpionismo é descrito como envenenamento causado pela inoculação de

toxinas através do aparelho inoculador (ferrão) de escorpiões, podendo determinar

alterações locais (na região da picada) e/ou sistêmicas1. É um problema de saúde

importante, mas negligenciado em muitas partes do mundo, tendo alta incidência em

diversos países2. O Continente Africano, o Oriente Médio, o sul da Índia e a América

Latina, sobretudo México, Brasil e outros países da Região Amazônica (Guianas e

Venezuela) são os locais em que esse agravo possui maior importância devido à alta

incidência e/ou gravidade dos casos. Aproximadamente, dois bilhões de pessoas estão

em áreas de risco para os acidentes escorpiônicos, ocorrendo mais de um milhão de

acidentes, anualmente, em todo o mundo (Figura 1)3.

Figura 1. Distribuição mundial do escorpionismo (2008)3.

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A região sul da Ásia está entre as principais regiões do planeta a risco de

acidentes escorpiônicos3. Na Índia, o envenenamento está entre as principais causas

de mortalidade e morbidade entre crianças. Nesse país, os acidentes escorpiônicos

representam 4,7% das causas de internação hospitalar, igualando-se ao número de

ocorrências de picadas de serpente4 e estão entre as quatro principais causas de lesões

em crianças5. No Irã, esse agravo também representa um dos maiores problemas de

saúde pública. Em um estudo retrospectivo realizado entre 1997 e 2006 na cidade de

Ahvaz, as picadas de escorpião ficaram em segundo lugar entre as lesões por animais,

atingindo 12,5% dos casos6. A principal espécie de escorpião de interesse médico no

Irã é o Hemiscorpius lepturus7, sendo responsável por mais de 95% dos casos fatais2.

Na Turquia, a maior incidência se dá na região central com 39,03% dos acidentes

escorpiônicos8. Na região leste, 28,3% dos registros de acidentes por animais foram

atribuídos aos escorpiões9.

No norte da África, o escorpionismo também é considerado um dos maiores

problemas de saúde pública2, havendo registro de 50.000 casos por ano na Argélia10.

No Mali, no oeste africano há uma incidência de 476 por 100.000 habitantes, sendo

os escorpiões pertencentes à família Buthidae os principais responsáveis por casos

de escorpionismo nessa região11. No Marrocos a taxa de letalidade dos acidentes

escorpiônicos chega a 15% dos casos, sendo 90% entre crianças abaixo dos 15

anos12.

No Continente Americano a maior incidência de acidentes escorpiônicos está

na America Latina3. No México, são registrados cerca de 250.000 picadas de

escorpião anualmente2, e a incidência registrada é de cerca de 1355 acidentes

escorpiônicos por 100.000 habitantes no estado mexicano de Colima, havendo casos

de indivíduos que foram picados até seis vezes por escorpiões durante sua vida13. Na

Guiana Francesa o número de acidentes escorpiônicos vêm aumentando, sendo

registrada incidência de 20 casos por 100.000 habitantes em 2004 e 43 por 100.000

em 201014. No Brasil, foram registrados mais de 40.000 casos de escorpionismo em

2008, aumentando, anualmente, até chegar ao registro de mais 60.000 casos em

201215.

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1.1.2 Fatores associados à ocorrência do escorpionismo

Países com clima tropical e subtropical são locais onde os acidentes

escorpiônicos ocorrem mais comumente16, sobretudo nos meses mais quentes17,18. A

temperatura alta faz com que esses animais se tornem mais ativos e,

consequentemente, aumenta a sua proximidade com seres humanos19. O volume

pluvial também influencia o número de acidentes escorpiônicos, tendo maior ocorrência

nos meses chuvosos11. Esse aumento se deve, provavelmente, ao fato de a maior

precipitação inundar o habitat natural dos escorpiões, forçando-os a procurar novos

refúgios nesse período13.

Na Turquia, foi constatado que cerca de 94% dos casos ocorrem no verão,

sobretudo durante os meses de julho, que são os mais quentes do ano nessa região17,8.

Isso também foi demonstrado no Irã18 e na Argentina20, em que houve aumento de

casos durante a estação quente. O período em que há aumento do volume

pluviométrico faz com que aumente o número de casos de escorpionismo. Isso foi

observado na Guiana Francesa com picos em abril e maio14, no México entre junho e

outubro13, no oeste africano entre abril e outubro11 e na Venezuela em maio e

setembro21.

Na região Sudeste do Brasil, foi observado que a maioria dos acidentes

escorpiônicos ocorre nos meses quentes e chuvosos, apresentando sazonalidade

semelhante à dos casos de ofidismo22. Em Minas Gerais observou-se aumento no

número de registros entre os meses de setembro a dezembro, período mais quente e

úmido na Região Sudeste 23,24. No nordeste do país também foi registrado aumento dos

casos de escorpionismo nos meses mais chuvosos, entre junho e agosto19.

Além do fator climático, o ambiente também influencia a ocorrência de

acidentes escorpiônicos, pois a alta capacidade adaptativa dos escorpiões permite a

esses artrópodes sobreviverem em diferentes habitats, desde florestas tropicais a

desertos, ao nível do mar ou a altas altitudes. Assim, esses animais estão presentes

tanto no ambiente urbano quanto no rural, sendo encontrados mesmo em ambientes

modificados pelo homem, como habitações, construções entre outros25.

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4

A área urbana pode ser um fator de risco para o acontecimento de acidentes

escorpiônicos, sobretudo o espaço doméstico, onde a maioria dos casos de

escorpionismo ocorre26,20. Porém, em alguns países como a Colômbia, a área rural foi

descrita como um local de risco para acidentes escorpiônicos27,28, verificando-se uma

associação entre a ocorrência do acidente e a presença de mata, aumento da

atividade agrícola e procedência da zona rural29.

No Brasil, as principais espécies de interesse médico pertencem ao gênero

Tityus, o qual possui elevada capacidade adaptativa e distribuição irregular, podendo

ser encontradas em ambientes alterados pela ação do homem30. A modificação de

seu ambiente natural, seja pelo desmatamento ou pela ocupação humana, resulta em

um desequilíbrio na cadeia alimentar, além de acabar com seus locais de abrigo. Isso

faz com que os escorpiões busquem alimento e abrigo em residências, construções

civis e terrenos baldios, passando a habitar o mesmo ambiente que o homem25.

As categorias de trabalhadores mais sujeitos aos acidentes escorpiônicos são

aqueles que atuam na construção civil, madeireiras, transportadoras e

hortifrutigranjeiros, pois manuseiam objetos em que podem estar escondidos os

escorpiões25. No Brasil, a maior frequência de acidentes se dá entre homens em idade

economicamente ativa e no ambiente urbano31. Donas de casas e crianças também

são expostos ao contato com esses animais por permanecerem maiores períodos no

ambiente intra ou peridomiciliar, o qual pode ser local de risco para acidentes25.

1.1.3 Aspectos clínicos

O sintoma mais comum em adultos após uma picada de escorpião é a dor local.

Entretanto, esse aracnídeo pode não inocular o veneno, causando uma picada

assintomática ou “picada seca”25. Quanto à gravidade, os acidentes escorpiônicos são

classificados no Brasil como leves, moderados ou graves pelo Ministério da Saúde.

Essa classificação se baseia em dados clínicos do paciente, de acordo com o

Quadro11.

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Quadro 1. Classificação dos acidentes escopiônicos quanto à gravidade e

manifestações clínicas.

Classificação Manifestações clínicas

Leve Dor e parestesia local.

Moderado Dor local intensa associada a uma ou mais manifestações:

náuseas, vômitos, sudorese, sialorreia discretos, agitação,

taquipneia e taquicardia.

Grave Além das citadas na forma moderada, presença de uma ou

mais das seguintes manifestações: vômitos profusos e

incoercíveis, sudorese profusa, sialorreia intensa,

prostração, convulsão, coma, bradicardia, insuficiência

cardíaca, edema pulmonar agudo e choque.

Fonte. Ministério da Saúde (2010)1.

Acidentes graves e moderados são observados principalmente na infância, em

que manifestações sistêmicas podem surgir em minutos ou poucas horas, como

distúrbios cardiovasculares, digestivos, respiratórios e neurológicos22. Isso se deve à

ação do veneno escorpiônico no organismo, que estimula nervos periféricos

sensitivos, motores e o sistema nervoso autônomo1. A liberação de mediadores do

sistema nervoso autônomo causa danos no miocárdio, arritmias cardíacas, edema

pulmonar, paralisia, espasmos musculares, pancreatite e choque2. O quadro sistêmico

se deve à composição do veneno de escorpião, que é composto por peptídeos,

proteínas, serotonina, histamina e enzimas com potencial para gerar efeitos tóxicos

no organismo32.

Experimentos demonstraram que o veneno de T. serrulatus provoca aumento

nas concentrações de mediadores inflamatórios como interleucina – 6 (IL-6) e fator de

necrose tumoral (TNF-α), além de estimular a liberação de PGE2 (prostaglandina E2)

e LTB4 (leucotrieno B4) por macrófagos peritoneais. Isso é dependente da sinalização

que ocorre através de receptores TLR2 (toll-like receptors), TRL4 e CD14 (cluster of

differentiation 14)33.

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O edema agudo de pulmão foi relatado como sintoma presente nos casos de

escorpionismo graves34,35. Alterações enzimáticas semelhantes às encontradas

durante o infarto agudo do miocárdio, além de alterações no eletrocardiograma e

ecocardiograma, foram observadas durante quadros graves de escorpionismo com

edema agudo de pulmão, indicando presença de lesão no músculo cardíaco35.

Casos clínicos graves ou moderados, devido aos acidentes escorpiônicos,

foram descritos em diversos estudos8,17,36,12. Isso se deve, entre outros fatores, à

presença da enzima hialuronidase no veneno, a qual facilita sua disseminação no

organismo, além agir em sinergismo com neurotoxinas37. Alterações na pressão

arterial também são observadas, podendo haver um quadro hipertensivo ou

hipotensivo. A hipertensão é gerada pela presença de neurotoxinas no veneno38, já a

hipotensão se deve a peptídeos com atividade hipotensora39. A presença de toxinas

que bloqueiam canais de Na+/K+ podem levar à neurotoxicidade40, existindo toxinas

com ação direta no sistema nervoso central41. Toxinas que bloqueiam especificamente

os canais de Na+ são encontradas em abundância no veneno de escorpiões da família

Buthidae, o que pode ser a causa da letalidade desse veneno, pois o bloqueio desses

canais pode levar a um quadro neurotóxico42.

A gravidade dos acidentes escorpiônicos depende de vários fatores como: a

toxicidade e a quantidade de veneno injetada, espécie e tamanho do escorpião, local

da picada, susceptibilidade do indivíduo ao veneno, que, normalmente, aumenta

conforme diminui a idade, bem como fatores relacionados ao tratamento, como

diagnóstico precoce e tempo decorrido entre a picada e o início da soroterapia1,30. No

Brasil, foi observado que o tempo decorrido entre o acidente e o atendimento também

constitui fator relevante para o desenvolvimento de gravidade31,42. O atraso superior a

3 horas até o início do tratamento mostrou relação significativa com o aumento da

gravidade nos casos de escorpionismo24.

A análise da sintomatologia de indivíduos vítimas de escorpionismo

demonstrou a associação entre alguns sintomas e a gravidade do caso. A presença

de sonolência no momento da admissão e ausência de dor local demonstraram

significância estatística para maior gravidade do evento. Apesar de a presença de dor

ser um dos sintoma mais comuns após a picada, a existência de outros sintomas mais

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7

relevantes faria com que esse não fosse relatado pelo paciente. Já a sonolência pode

ser relacionada à presença de proteínas neurotóxicas no veneno que agem no

sistema nervoso central24.

Quanto à mortalidade nos acidentes escorpiônicos, a maioria dos casos ocorre

em crianças. No Brasil, a faixa etária em que há maior ocorrência de óbitos está em

crianças abaixo de 9 anos de idade31. Estudo realizado em Minas Gerais demonstrou

relação significativa entre a presença de hipotensão e insuficiência respiratória na

admissão e o aumento da mortalidade em crianças, sendo que a razão de chance de

evoluir para óbito foi 2,7 vezes maior nos hipotensos e 6 vezes maior naqueles com

insuficiência respiratória23.

Entre as crianças, a chance de evoluir para óbito é maior quanto mais jovem

for o paciente, observando-se aumento de 13% na razão de chance de evolução para

esse evento a cada ano a menos na idade do indivíduo23. Dado que existe uma relação

diretamente proporcional entre a quantidade de veneno no plasma e a severidade do

envenenamento45, os piores sintomas são verificados em crianças abaixo dos 5 anos

de idade19, visto que nessa faixa etária os mecanismos imune são mais frágeis e a

relação entre dose do veneno versus peso corporal é maior11. A demora no

atendimento também contribui para o aumento do número de óbitos. Guerra et al.

observaram que o óbito ocorreu 8,77 vezes mais em pacientes atendidos entre 6 a 12

horas após o acidente escorpiônico quando comparados àqueles atendidos na

primeira hora23.

1.1.4 Tratamento

Nos casos de escorpionismo, quando há somente o quadro local o tratamento

pode ser apenas sintomático. Consiste no alívio da dor com analgésicos por via

sistêmica1. Paracetamol ou salicilatos podem ser grande ajuda, além do resfriamento

ou anestesia no local da picada3.

Na existência de quadros sistêmicos é necessário o uso de tratamento

específico com soro antiescorpiônico ou antiaracnídico de acordo com a gravidade do

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caso (Quadro 2). O soro deve ser aplicado por via intravenosa, atentando-se para o

surgimento possíveis reações alérgicas. Crianças devem ser mantidas em regime de

observação continuada com monitoramento das funções vitais, para diagnóstico e

tratamento precoce de quaisquer complicações1. No Brasil, é produzido soro

antiescorpiônico específico para acidentes com o gênero Tityus44.

Quadro 2. Tratamento dos acidentes escorpiônicos.

Fonte. Ministério da Saúde (2010)1.

1.2 ACIDENTES ECORPIÔNICOS NO BRASIL

1.2.1 Vigilância e carga dos acidentes escorpiônicos no Brasil

O Brasil está entre os países do mundo em que o escorpionismo é um problema

de saúde pública emergente e negligenciado. Apesar de registrar alta incidência,

estima-se que ela possa ser ainda maior, já que muitos casos não chegam a receber

atendimento médico, pois são tratados por métodos caseiros ou alternativos2. Isso,

faz com que haja subnotificação, influenciando na escassez de dados

epidemiológicos3. Entretanto, todos os acidentes por escorpião, bem como por

animais peçonhentos, atendidos em unidades de saúde devem ser notificados no

Brasil, independentemente, se houve ou não tratamento específico. As informações

coletadas são incluídas na base de dados do Sistema de Informação de Agravos de

Notificação (SINAN), criado entre 1990 e 1993, para ser operado a partir das unidades

de saúde, com objetivo de obter, reunir e processar dados sobre agravos de

notificação em todo o território nacional1.

No Brasil, a notificação compulsória dos acidentes escorpiônicos foi implantada

em 1988, desde então, vem sendo observado um considerável aumento no número

de casos em todo o país22 atingindo cerca de 50% dos registros de acidentes por

animais peçonhentos. A introdução de dados no SINAN é feita a partir de formulários

Tratamento Classificação N0 ampolas

Antiescorpiônico ou Antiaracnídico

Leve -----

Moderado 2 a 3

Grave 4 a 6

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padronizados. No caso envolvendo acidentes por animais peçonhentos, existe um

formulário único, no qual é discriminado pelo profissional de saúde o tipo de acidente,

além de informações epidemiológicas e clínicas de cada caso1 (Anexo A).

Ocorreram mais de 12.000 acidentes escorpiônicos notificados no Brasil no ano

2.000. A maioria desses casos, cerca de 7.700, ocorreu na região nordeste do país.

Anualmente, foi aumentando o número de casos notificados, atingindo mais de 40.000

registros em 2008. Em 2012, foram notificados mais de 60.000 casos em todo o

território nacional, permanecendo o predomínio de registros no nordeste brasileiro,

com cerca de 29.000 notificações registradas, seguido pelo sudeste com mais de

26.000 registros15. Essas duas regiões também apresentam as maiores taxas médias

anuais de incidência e mortalidade, enquanto que a de letalidade é maior no norte e

centro-oeste. Já as menores taxas médias anuais de incidência, mortalidade e

letalidade estão na Região Sul31.

1.2.2 Fauna escorpiônica no Brasil

Existem, aproximadamente, 1.600 espécies de escorpiões no planeta. Na fauna

escorpiônica brasileira há cerca de 160 espécies25, distribuídas entre 5 famílias:

Ischnuridae47, Bothriuridae, Chactidae, Liochelidae e Buthidae30 (Figura 2). Cerca de

60% das espécies pertencem à família Buthidae, incluindo aquelas de interesse em

saúde pública25.

No Brasil existem 16 espécies pertencentes à Família Bothriuridae, as quais

ocorrem nas cinco regiões do país, sobretudo na faixa leste. O estado com maior

riqueza de espécies nessa família é o Rio de Janeiro, com 4 espécies. Estados da

região Norte como Amazonas, Acre, Rondônia e Roraima não apresentam registros

dessa família30.

Dentro da família Chactidae, 31 espécies ocorrem no Brasil, com distribuição

quase exclusiva na região Norte. Dessas espécies, 14 estão no Amazonas, seguido

do Pará, com 6 espécies e Amapá, apresentando 5 espécies de Chatidae30.

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A família Liochelidae possui apenas duas espécies registradas no Brasil, as

quais localizam-se na Região Norte exclusivamente, sendo encontradas no

Amazonas, Pará e Tocantins30. Há apenas uma espécie da família Ischnuridae

registrada no Brasil, Opisthacanthus cayaporum, com distribuição geográfica no

Tocantins e Pará45.

A maior e mais importante família de escorpiões no Brasil é a Buthidae, tendo

82 espécies registradas. São encontradas em todos os estados da federação, sendo

que, a maioria delas está nas regiões Norte e Nordeste. Aqui encontra-se o gênero

Tityus, de grande importância, por conter principais as espécies de interesse médico

no Brasil30.

Figura 2. Gradiente de riqueza de espécies para as principais famílias com

ocorrência no Brasil30.

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11

1.2.3 Distribuição geográfica e principais espécies de escorpiões com

importância médica no Brasil

Aproximandamente, 25 espécies de escorpiões apresentam risco para o

homem25, tendo interesse médico os escorpiões pertencentes à família Buthidae,

gênero Tityus, que representa cerca 60% da fauna escorpiônica do país22. As

principais espécies do gênero Tityus com importância em saúde pública, são T.

serrulatus, T. bahiensis, T. stigmurus, T. obscurus e T. metuendus25,30 (Quadro 3).

Quadro 3. Principais espécies de escorpiões de importância médica no Brasil.

Espécie Características Distribuição Geográfica

T. serrulatus

Possui tronco marrom escuro, pernas e cauda amarelas, por isso é conhecido como escorpião amarelo. Pode medir até 7 cm de comprimento. É a principal espécie causadora de acidentes graves, com registro de óbitos, sobretudo em crianças.

Nordeste, Sudeste e Sul

T. bahiensis

Por sua coloração escura é conhecido como escorpião marrom ou escorpião preto. Mede cerca de 7 cm. É a principal espécie causador de acidentes em São Paulo.

Sudeste, Centro-Oeste e Sul

T. stigmurus

É o escorpião amarelo do nordeste. Diferencia-se do T. serrulatus por apresentar uma faixa escura longitudinal no tronco.

Nordeste

T. obscurus

Sinônimos: T. paraensis, T. cambridgei. Conhecido

como escorpião preto da Amazônia devido à sua coloração escura. Podem medir até 10 cm de comprimento.

Norte

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T. metuendus

Mede de 7 a 9 cm de comprimento. Possui coloração vermelho-escuro quase negro.

Amazônia

Fonte. Brazil & Porto (2010)30; Ministério da Saúse (2010)1,25.

1.3 ACIDENTES ESCORPIÔNICOS NA AMAZÔNIA

A Região Amazônica está entre as principais regiões do mundo em que o

escorpionismo é um problema de saúde pública, sobretudo nas Guianas, Venezuela

e Região Norte do Brasil. Nessas áreas, esse agravo é negligenciado e dados precisos

são escassos, devido à subnotificação e à escassez de estudos voltados ao

escorpionismo. Estima-se que nessa região a incidência dos acidentes escorpiônicos

seja maior que na América do Sul em geral e no México, chegando a média de 22 em

100.000 habitantes 3.

Na Guiana Francesa, a incidência média do escorpionismo é de 32 em 100.000

habitantes. Nesse território, mais de 50% desses casos foram classificados como de

gravidade moderada e 1,6% como graves14. A incidência na Venezuela chega a 40

em 100.000 habitantes, sendo 7,8% a proporção de casos graves de escorpionismo.

No entanto, estima-se que esse número seja maior, visto que a real magnitude desse

agravo não é conhecida, em razão de haver poucos estudos epidemiológicos sobre

escorpionismo realizados na Venezuela46.

Na Região Amazônica do Brasil, 20% dos casos notificados ao Centro de

Informações Toxicológicas de Belém (CIT- Belém), no Estado do Pará, foram de

escorpionismo47. Em Santarém, a incidência registrada foi de 30 em 100.000

habitantes48. Estudo retrospectivo descritivo realizado entre 1998 e 2004 demonstrou

que, de todos os casos de escorpionismo registrados no estado, 50% ocorreram em

Bélem. Foi constatado também, que cerca de 65% dos casos ocorreram no meio

urbano, sendo 57% no primeiro semestre e 51% na residência49. Em Altamira e Brasil

Novo, municípios do interior do Pará, 59% dos acidentes escorpiônicos foram

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classificados como moderados e 37% como graves, com manifestações neurológicas

em 96% de todos os casos50. Estudo realizado no Acre verificou que 10% dos

seringueiros e 14% dos índios entrevistados, afirmaram terem sido picados por

escorpião ao menos uma vez na vida51.

No estado do Amazonas, observou-se que os meses com maior incidência de

acidentes escorpiônicos foram janeiro, maio e agosto. A faixa etária mais atingida foi

entre 16 a 20 anos, sendo a maioria do gênero masculino. A parte do corpo mais

atingida foram as mãos, cerca de 44% dos registros. Quanto ao local de ocorrência

34% aconteceram no domicílio ou peri-domicílio e a profissões mais atingidas foram

estudantes e trabalhos domésticos (21%). A grande maioria dos indivíduos (90%)

eram residentes em Manaus. Aproximadamente, 2,5% dos pacientes apresentaram

quadro clínico grave, desses, 80% eram crianças com até 12 anos de idade52.

1.3.1 Espécies de escorpiões na Amazônia Brasileira

A região Norte do Brasil é uma das principais responsáveis pela elevada

abundância de espécies de escorpião no Brasil. Nessa região são registradas 68

espécies, representando 52% das espécies de todo o país. Somente no Amazonas

há registro de 38 espécies diferentes. Contudo, a fauna de escorpiões no Brasil é

subestimada devido à falta de especialistas e fomento a pesquisas no assunto30.

Na reserva florestal Adolpho Ducke, localizada na periferia de Manaus o

Brotheas amazonicus é a espécie de escorpião mais abundante. Também são

encontrados nessa área Chactopsis amazônica, Ananteris dekeyseri, A. pydanieli, T.

metuendus53,54 e T. silvestris53.

Os Quadros 4 e 5 descrevem as espécies de escorpiões encontradas nos

estados brasileiros pertencentes à Amazônia.

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Quadro 4. Espécies de escorpiões encontradas na Amazônia brasileira pertencentes

à família Chactidae.

Gênero Espécie Estado

Broteochactas

parvulus Endêmico de Santarém, PA

skuki Mato Grosso

delicatus Amapá

granosus Roraima

mapuera Pará

polisi Amazonas

Brotheas

amazonicus Amazonas

gervaisii Amapá

granulatus Amapá

jourdani Amapá

overali Pará

paraensis Pará

silvestris Pará

Chactopsis

amazonica Amazonas

anduzei Amazonas

insignis Amazonas

Guyanochactas gougei Pará

mascarenhas Pará

Teuthraustes amazonicus Amazonas

lisei Amazonas

Vachoniochactas ashleea Amazonas

Fonte. Lourenço, 200245.

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Quadro 5. Espécies de escorpião encontradas na Amazônia brasileira pertencentes à

família Buthidae.

Gênero Espécie Estado

Ananteris

balzanii Pará, Mato Grosso

dekeyseri Amazonas

luciae Pará

mariaterezae Tocantins

pydanieli Amazonas

Microtityus vanzolinii Amazonas

Rhopalurus

amazonicus Pará

crassicauda Roraima

piceus Roraima

Tityus

clathratus Roraima

bastosi Amazonas

silvestris Amazonas, Acre, Amapá, Pará, Roraima

gasci Bacia amazônica

raquelae Amazonas

stigmurus Mato Grosso, Rondônia

strandi Amazonas

cambridgei Pará

dinizi Amazonas

magnimanus Amazonas

matthieseni Amazonas

metuendus Pará, Amazonas, Acre, Rondônia, Roraima

tucurui Pará

unus Amazonas

Fonte. Lourenço, 200245.

1.3.2 Principais espécies de escorpiões com importância média na Amazônia

brasileira

As principais espécie de importância médica na Amazônia pertencem ao

gênero Tytius, dentre elas: T. obscurus, T. metuendus e T. silvestris30,55. Outra

espécie, pertencente ao gênero Rhopalurus, apontada como causadora de acidentes

é o Rhopalurus amazonicus, com registros de casos no Pará56.

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1.3.2.1Tityus obscurus

Conhecido também como T. cambridgei, T paraensis e T. amazonicus, possui

comprimento total variando de 8,5 a 10 cm e a coloração vai desde marrom-

avermelhado escuro ao negro (Figura 3). Ocorre na floresta amazônica brasileira e

Guiana Francesa57. Pode ocasionar acidentes graves ou fatais30. No Pará a maioria

dos casos de escorpionismo são atribuídos a essa espécie. Em Santarém, a maioria

dos pacientes relatou ser o agente causador um escorpião grande e preto. Todos os

animais, levados pelos pacientes, indicados como sendo causadores do acidente

foram identificados como T. obscurus48.

Um estudo realizado no Pará por Pardal et al., considerando apenas casos

confirmados de envenenamento por T. obscurus, verificou a existência de diferença

na sintomatologia e na gravidade entre indivíduos residentes no oeste e no leste do

estado, sugerindo diversidade na toxicidade do veneno dessa espécie42. Além dos

sintomas locais, a maioria dos pacientes apresentou sintomatologia sistêmica. São

relatados quadros neurológicos com sensação de choque elétrico pelo corpo,

mioclonias, dismetria, disartria entre outros. Isso demonstra que o quadro clínico

causado por essa espécie de escorpião é diferente daqueles descritos em outros

locais do Brasil42,48,58.

Figura 3. T. obscurus59.

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1.3.2.2 Tityus metuendus

Possui 8 a 9 cm de comprimento, coloração marrom-avermelhado escuro até

negro (Figura 4). É encontrado na floresta amazônica brasileira e peruana57. Pode

causar envenenamentos leves e moderados, podendo reproduzir-se assexuadamente

por partenogêse30. Estudo clínico-epidemiológico, realizado na Fundação de Medicina

Tropical em Manaus, verificou que 95% dos escorpiões levados pelos pacientes como

causadores do acidente foram identificados como T. metuendus. Dentre esses

pacientes, um caso grave foi confirmado52. Houve registro de um óbito causado por

essa espécie no Amazonas59.

Figura 4. T. metendus59.

1.3.2.3 Tityus silvestris

Também conhecido como T. duckey, possui de 2,5 a 4,5 cm de comprimento,

com coloração variando do amarelado ao marrom-avermelhado, com manchas por

todo o corpo (Figura 5). Pode ser encontrado na floresta amazônica brasileira, no Peru

e Equador57, podendo causar acidentes moderados e leves30. Há registro de casos de

escorpionismo no Amazonas relacionados a essa espécie52.

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Figura 5. T. silvestris59.

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1.4 JUSTIFICATIVA

O escorpionismo é um problema negligenciado de saúde pública em diversas

regiões do mundo, incluindo-se o Brasil. O número de registros vem aumentando a

cada ano no país. Em 2012, foram notificados mais de 60.000 casos em todo o país,

sendo mais de 3.000 registros na região Norte.

Apesar de a maioria dos acidentes escorpiônicos evoluírem para quadros

clínicos leves e moderados, quadros graves sistêmicos e óbitos também são

registrados, sobretudo em crianças.

O aumento do desmatamento, da ocupação humana desordenada, a falta de

planejamento e de saneamento básico, faz com que haja maior proximidade entre

humanos e escorpiões. Essas ações humanas implicam a redução do hábitat natural

desses animais, fazendo com esses procurem novos locais em busca de alimento e

esconderijo. Somado a isso, algumas espécies de escorpião são altamente

adaptáveis a ambientes modificados pelo homem e ao ambiente urbano, o que torna

esse agravo ainda mais preocupante.

O estudo do escorpionismo no Amazonas é fundamental, visto que, na

literatura, há escassez de dados sobre o assunto no estado. Outro fator que torna

relevante esse estudo é que, provavelmente, os acidentes escorpiônicos são

subnotificados, devido à falta de acesso no interior do estado e ao fato de que esses

acidentes são, muitas vezes, tratados pela medicina tradicional, não chegando a

receber atendimento nos postos de saúde.

Não existem estudos sobre os fatores de risco para gravidade do

escorpionismo no estado do Amazonas. Assim, a realização de estudos referentes a

esse assunto pode servir como base para planejamento de pesquisas futuras, além

de referência para manejo e prevenção dos acidentes com esses animais, a serem

utilizados pelos órgãos responsáveis pela saúde pública.

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2. OBJETIVOS

2.1 GERAL

Descrever algumas características epidemiológicas do escorpionismo no estado do

Amazonas.

2.2 ESPECÍFICOS

- Descrever a distribuição geográfica do escorpionismo no Amazonas;

- Verificar a incidência do escorpionismo;

- Descrever a sazonalidade do escorpionismo;

- Descrever as características epidemiológicas do escorpionismo no Amazonas;

- Estimar a letalidade média do escorpionismo;

- Identificar fatores relacionados à gravidade do escorpionismo.

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3. METODOLOGIA

3.1 MODELO DE ESTUDO

Estudo descritivo dos casos de escorpionismo registrados no estado do

Amazonas, entre 2007 e 2012, para avaliar a carga, características epidemiológicas,

distribuição geográfica e temporal e letalidade. Para identificação dos fatores

associados à gravidade, realizou-se um estudo de caso-controle.

3.2 ÁREA DE ESTUDO

O estado do Amazonas situa-se na região norte do Brasil, sua capital é Manaus.

É dividido em 4 Mesorregiões Centro, Norte, Sudoeste e Sul. Possui 1.559.159,148

km2 de área, 62 municípios e população estimada de 3.807.921 habitantes. A

densidade demográfica é de 2,23 hab/km²60.

A vegetação original principal é a floresta perenófila ombrófila, densa na maior

parte, com árvores de grande porte. Matas de várzeas ocorrem às margens dos rios

e sofrem inundações anuais devido à cheia dos rios. Já as matas de igapó são

permanentemente inundadas pelas enchentes dos rios ou água das chuvas. As áreas

desmatadas se concentram nas margens das rodovias BR-319, BR-174 e AM-01061.

No Amazonas o clima é do tipo Af de Köppen (equatorial superúmido) com

precipitação acima de 2.000mm/ano e temperaturas médias anuais entre 26o e 28oC,

sem uma diferenciação clara entre estação seca e chuvosa. Na sub-região do

Madeira, no sul e sudoeste do estado, ocorre estiagem pouco pronunciada de agosto

a setembro60.

3.3 POPULAÇÃO DE ESTUDO

Todos os casos de acidentes escorpiônicos notificados no SINAN entre 2007 e

2012 no estado do Amazonas.

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22

3.4 COLETA DE DADOS

O SINAN (Sistema de Informações de Agravos de Notificação) tem como

objetivo o registro e processamento de dados sobre agravos de notificação

compulsória em todo o país, gerando informações sobre o perfil de cada agravo. Serve

de base para políticas de manejo na esfera federal, estadual e municipal. Quando há

suspeita de problema de saúde de notificação compulsória, é preenchida uma Ficha

Individual de Notificação (FIN) ou Ficha Individual de Investigação (FII). No caso de

acidentes com animais peçonhentos, os dados clínicos e epidemiológicos são

preenchidos em uma ficha de investigação específica para esse agravo, discriminando

qual o tipo de acidente. As principais variáveis registradas são o local, a data e a zona

de ocorrência do acidente, além de idade, raça, gênero e sintomatologia do

indivíduo62.

Os dados utilizados no presente estudo foram coletados da base de dados do

SINAN, sendo fornecidos pela Fundação de Vigilância e Saúde do Amazônas (FVS-

AM).

3.5 VARIÁVEIS ANALISADAS

As variáveis analisadas foram mês de ocorrência do acidente, sexo, idade, local

anatômico da picada, zona de ocorrência do acidente, tempo decorrido entre a picada

e o atendimento.

3.6 DELINEAMENTO AMOSTRAL

A seleção do grupo de controles e do grupo de casos foi feita considerando-se

a classificação do caso na base de dados do SINAN, que é realizada pelo profissional

de saúde no momento do atendimento do caso, o qual se baseia na classificação do

Ministério da Saúde (Quadro 1), e anota na Ficha de notificação/investigação de

acidentes por animais peçonhentos (Anexo A). Acidentes leves e moderados foram

incluídos no grupo controle e acidentes graves foram incluídos no grupo de casos.

Após essa seleção, realizou-se a amostragem sistemática, que é uma metodologia de

amostragem probabilística, indicada quando os elementos da população a ser

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23

analisada encontram-se ordenados e essa ordem não tem relação com a variável de

interesse (amostragem). Essa metodologia consiste na divisão do número total de

elementos pelo número de elementos a serem retirados da amostra, o resultado dessa

operação é a periodicidade com que cada elemento é selecionado63.

Foram selecionados três controles para cada caso, os quais foram pareados

por mês e ano de ocorrência do acidente, incluindo dois meses anteriores e dois

meses posteriores à data de ocorrência do caso, para se evitar viés histórico, pois

mudanças climáticas, dificuldade de acesso em determinadas épocas do ano,

disponibilidade de soro antiescorpiônico e variação de pessoal da saúde podem

influenciar na classificação dos casos (Figura 6).

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24

Figura 6. Diagrama de seleção de casos e controles.

Todas as notificações de acidentes escorpiônicos no Amazonas entre 2007 e 2012

Seleção de casos e controles

Acidentes graves Acidentes leves e moderados

Casos Controles

Amostragem sistemática

Seleção de 3 controles para caso, com pareamento por

mês e ano

Tabulação dos dados

Limpeza do banco

Análise estatística

Exclusão dos registros sem classificação quanto à

gravidade

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3.7 ANÁLISE ESTATÍSTICA

Após a limpeza do banco de dados, realizada com o auxílio do software

Microsoft Office Excel 2010, as análises descritivas foram realizadas neste mesmo

programa.

A incidência média anual foi calculada através da média de casos por ano e

pela população a risco no meio do período de cada município por 100.000 mil

habitantes. Para a incidência média estadual foi realizado o mesmo cálculo anterior

considerando-se a média da população total no estado no período estudado.

Calculou-se a letalidade fazendo a proporção do n° de óbitos devidos ao

escorpionismo pelo número total de casos de escorpionismo ocorridos no período

estudado, como segue abaixo:

Para a identificação das variáveis associadas à gravidade, a análise foi

realizada com auxílio do programa Statical Package for the Social Sciences (SPSS)

para Windows versão 21.0. Para comparação entre as variáveis foi realizada análise

univariada utilizando-se o teste do Qui-Quadrado. Foi realizada análise multivariada

através de um modelo de regressão logística condicionada por sexo e teste de ajuste

de Hosmer-Lemeshow foi aplicado para variáveis com p<0,2. Em ambas as análises

considerou-se intervalo de confiança de 95%.

Foi realizado o teste de Spearman para avaliar a correlação entre o número

absoluto de casos e os níveis altimétricos mensais dos rios para cada mesorregião do

estado. %. Analisou-se a correlação entre a cheias dos rios e o aumento de casos de

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26

escorpionismo no estado. Para isso, utilizou-se a correlação de spearman, pois

tratam-se de dados não paramétricos. Os dados fluviométricos utilizados foram

retirados do Sistema de Informações Hidrológicas (Hidroweb) 64da Agência Nacional

de Águas (ANA), além de dados do Serviço Geológico do Brasil ou CPRM (Companhia

de Pesquisa de Recursos Minerais)65. No Centro utilizou-se os dados da estação de

monitoramento hidrológico da Bacia do Rio Negro em Manaus, no Norte dados da

estação de Barcelos que monitora o rio Negro. No Sudoeste os dados utilizados foram

os da estação de Gavião que monitora o rio Juruá e no Sul utilizou-se dados da

estação de monitoramento de Humaitá, a qual monitora o rio Madeira.

3.8 DISTRIBUIÇÃO GEOGRÁFICA DOS ACIDENTES

Foi realizada a confecção de mapas utilizando-se a base de dados do SINAN.

As informações foram analisadas com a utilização do software Tableau 8.0. Os dados

foram tabulados considerando todos os casos de escorpionismo notificados entre

2007 a 2012 por Município do Amazonas. Os dados populacionais de cada Município

foram obtidos a partir do Censo e estimativas do IBGE. A incidência foi calculada por

meio da divisão dos casos pela população do meio do período de cada município por

100.000 mil habitantes. Para a análise espacial, foi utilizado o software ArcGIS 10.1.

A análise realizada foi a técnica de Inverse Distance Weighted (IDW) (distância inversa

ponderada), que faz interpolação de pontos em um mapa, definindo um padrão de

dispersão da incidência de casos.

3.9 QUESTÕES ÉTICAS

O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da FMT-HVD,

obtendo-se dispensa da aplicação do termo de consentimento livre e esclarecido

(parecer número 181.252/2012). Para garantir o sigilo e privacidade dos casos, os

bancos de dados cedidos pela FVS-AM não apresentavam o nome ou qualquer outra

informação que permitisse a identificação do indivíduo.

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27

4. RESULTADOS

O artigo intitulado “Scorpion stings in the Western Brazilian Amazon: a surveillance-

based study”, a ser submetido ao periódico Transactions of the Royal Society of

Tropical Medicine & Hygiene (Fator de impacto=1.931), na seção Original Articles

(Vide Instruções aos Autores – Anexo B), apresentado a seguir, compõe os resultados

desta dissertação de mestrado.

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28

ORIGINAL ARTICLE

Scorpion stings in the Western Brazilian Amazon: a surveillance-based study

Amanda M. Queiroza,b, Vanderson S. Sampaioa,b, Iran Mendonçaa,b, Jacqueline

Sachetta,b, Luiz Carlos Ferreiraa,b, Esaú L. Feitosaa,b, Fan Hui Wengc, Marcus V.G.

Lacerdaa,b, Wuelton M. Monteiroa,b,*

aDepartamento de Ensino e Pesquisa, Fundação de Medicina Tropical Doutor Heitor

Vieira Dourado, Manaus 69040-060, AM, Brazil

bEscola Superior de Ciências da Saúde, Universidade do Estado do Amazonas,

Manaus 69040-060, AM, Brazil

cHospital Vital Brazil, Instituto Butantan, São Paulo 05503-900, SP, Brazil

*Corresponding author: Tel: +55 92 2127 3555; E-mail: [email protected]

1Present address: Avenida Pedro Teixeira 25, Manaus 69040-060, Amazonas, Brazil.

Abstract

Background Scorpion stings is an emerging and neglected public health problem in

Brazil, with an increasing number of registrations every year. This paper describes the

epidemiological characteristics and identify factors associated to severity of scorpions

stings in the state of Amazonas, in the Western Brazilian Amazon.

Methods This study included all cases of scorpion stings in the state of Amazonas

reported to Brazilian Notifiable Diseases Surveillance System from January 1, 2007 to

December 31, 2012. A descriptive analysis of the frequencies of the characteristics of

the patients presenting with scorpion stings was done. A case-control study was

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performed to identify factors associated with scorpions sting severity, using the

Brazilian Ministry of Health definitions.

Results and Conclusions The mean incidence rate in the Amazonas was 7 per

100,000 inhabitants/year. Scorpion stings showed a large spatial distribution in the

state and represent a potential occupational health problem for rural populations. Age

<10 years [OR=2.7 (95%CI=1.27-6.04; p=0.01)] and stings occuring in the South

region of the state [OR=2.3 (95%CI=1.31–4.35; p=0.004) were independently

associated with the risk of developing severity. Mapping of scorpions fauna in different

Amazon localities is essential and must be accompanied by the characterization of the

main specific biological activities.

Keywords: Scorpions. Scorpion stings. Epidemiology. Risk fators. Amazon.

Introduction

Scorpion stings are a major health problem worldwide, although neglected in many

parts of the world, with high incidence in several countries1. The African continent, the

Middle East, southern India and Latin America, especially Mexico, Brazil and other

countries of the Amazon region (Guianas and Venezuela) are the locations where this

health problem has greater importance due to the high incidence and/or severity cases.

Approximately two billion people are at risk areas for scorpion envenomation incidents

occurring over a million accidents annually worldwide1. Scorpion venoms release

autonomic nervous system mediators causing myocardial damage, cardiac

arrhythmias, pulmonary oedema, shock, paralysis, muscle spasms and pancreatitis.

Early administration of antivenom is highly effective, together with intensive care

support in severe cases. However, the rapid tissue distribution of scorpion venom

toxins and their ability to cause early death demands early treatment with antivenom

and full cardio-respiratory support2.

Countries with tropical and subtropical climates are places where scorpion stings most

commonly occur3, especially in the warmer months4,5. The high temperature makes

the scorpions more active and therefore increases its proximity to humans6. The rain

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30

volume also influences the number of scorpion stings, having higher occurrence in the

rainy months7. This increase is probably due to the fact that the highest rainfall flooding

the natural habitats of scorpions, forcing them to seek refuge in this new period8.

Scorpion stings is an emerging and neglected public health problem in Brazil, with an

increasing number of registrations every year in the country, with 78.091 cases

reported in 20139. In Brazil, the main species of medical interest belong to the genus

Tityus, which has high adaptive capacity in anthropic environments10. Outside the

Amazon, T. serrulatus is the major causative agent os scorpionism, being responsible

by a high severity and lethality rates9,10. The major species of medical interest in the

Brazilian Amazon T. obscurus, T. metuendus and T. silvestris. Scorpion stings in this

region is mostly caused by T. obscurus, especially in the state of Pará, which is the

main cause of accidents, having the potential to cause serious and fatal accidents11.

In the state of Amazonas, Western Brazilian Amazon, a clinical-epidemiological study

found that the majority of reported accidents were caused by T. metuendus, with a

fatality rate of and recorded one death12. A verbal autopsy study carried out in the

state of Acre found that 10% of tappers and 14% of Amerindians had been stung by

scorpions at least once in their lifetime13.

The objective of this paper is to describe the epidemiological characteristics and to

identify risk factors for severity of scorpions stings in the state of Amazonas, in the

Western Brazilian Amazon, based on surveillance records.

Materials and methods

Study area

The State of Amazonas is located in the western Brazilian Amazon (latitude 2°01′,

longitude 73°48′), comprising an area of 1,570,946.8 km2, with four major regions

(North, South, Central and Southwestern) and 62 municipalities. The estimated

population of the state was 3,807,921 inhabitants in 2010, with 74.2% living in the

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urban zones and 25.8% in rural areas. Vegetation cover is mainly a dense evergreen

rain forest. Climate is classified as the equatorial super-humid type, with rainfalls over

2,000 mm per annum and average annual temperatures between 26°C and 28°C.

There is no clear distinction between dry and rainy seasons and the temperatures

present a little variation throughout the state area14. Most of the state's GDP is based

on the industrial sector in the capital Manaus, which hosts a large number of national

and multinational companies. Within the state are increasing investments in areas such

as fish farming, agribusiness and rural production. In the south of the state, the huge

increase of cattle, logging and family farming (most recently mechanized cultivation of

soybeans and cotton), has led to deforestation of large areas.

Study subjects

Cases of venomous animals including scorpion stings are recorded by the Brazilian

Notifiable Diseases Surveillance System [Sistema de Informação de Agravos de

Notificação (SINAN)] based on data abstracted from forms used in the investigation

and follow-up of cases of venomous animals. SINAN is the main survey system for

collection and analysis of national data on scorpion stings in Brazil15. This study was

performed including all cases of scorpion stings in the state of Amazonas reported to

SINAN from January 1, 2007 to December 31, 2012.

Study design and definitions

A descriptive analysis of the absolute and relative frequencies of the characteristics of

the patients presenting with scorpion stings was done. The variables analyzed were

case classification, gender, age, anatomical site of the bite, occurrence area

(rural/urban), the time elapsed between the bite and the medical assistace and lethality

rate.

A map was created with the software ArcMap 10.1 in ArcGIS 10.1 (ESRI, USA) using

estimates of the mean incidence by municipality. The incidence rate was calculated by

dividing cases by the population of each municipality in the middle of the period16 by

100 thousand inhabitants. Spatial interpolation of scorpion stings incidence was

mapped using data from 62 municipalities by the Inverse Distance Weighting (IDW)

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32

method. For this analysis, the output cell size was set to 0.33, a power value of 2 was

used, the search neighbourhood was set to smooth circular with a 30.15 radius and a

smoothing factor of 0.2 was used. No features were used as barriers.

Information about scorpion stings severity is a required field on SINAN survey system.

This information is entered by a healthcare provider at the time of notification of a case

of scorpionism when the diagnosis has been confirmed. Clinical severity of scorpion

stings were classified according the Brazilian Health Ministry guideline17: i) A mild

case was defined as a scorpion sting with local pain and paresthesia; ii) A moderate

case was defined as a scorpion sting with intense local pain associated with one or

more systemic manifestations, including nausea, vomiting, sweating, mild drooling,

restlessness, tachypnea and tachycardia; iii) A severe case was defined as a scorpion

sting with presenting the same symptoms as moderate cases, but evolving to profuse

and uncontrollable vomiting, profuse sweating, severe drooling, prostration,

convulsions, coma, bradycardia, heart failure, acute pulmonary edema and shock.

A case-control study was performed to identify factors associated with scorpions sting

severity. The selection of cases and controls groups was made considering the

classification of the case as outlined above. Severe stings were included in the group

of cases and mild and moderate stings were included in the control group. Since

severity was not so frequent, all severe stings were included as cases. Three controls

were selected for each case through a systematic sampling using the same order of

the original database, dividing the total number of elements in the database without

the cases by the number of controls to be taken from. The result of this operation was

the periodicity with which each element was selected.

Cases and controls were matched by month (two months before and two months after

the date of occurrence of the event) and year of the accident, in order to avoid a

possible historical bias, since climate features, difficult access to certain times of year,

availability of specific antivenom and turnover of health personnel may influence the

case assistance and definition.

Statistical analysis

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33

Data were analyzed using SPSS® version 21.0 for Windows (SPSS Inc.® Chicago, IL,

USA). The annual incidence was calculated using the average of cases in six years

and the population at risk in the middle of the period for the state of Amazonas and in

each municipality, for 100 million inhabitants. Lethality is the number of deaths due to

scorpion stings by the total number of cases of stings occurred. Proportions of severe

cases were compared by Chi-square test (corrected by Fisher' test if necessary);

differences were considered statistically significant for p<0.05. Spearman’s test was

performed to assess the correlation between the absolute number of cases and the

altimetric river levels monthly, for each major region of the state18. The crude Odds

Ratio (OR) with its respective 95% Confidence Interval (95% CI) was determined

considering the severity as the dependent variable. Logistic regression was used for

the multivariate analyses and the adjusted Odds Ratios with 95% CI were also

calculated. A multivariate logistic regression was performed with scorpion stings

severity as the outcome, using an automated backward and forward stepwise

estimation. All variables that were associated with severity at a significance level of

p<0.20 in the univariate analysis were included in the multivariate analysis. Statistical

significance was considered if p<0.05 in the Hosmer-Lemeshow goodness-of-fit test.

Ethical clearance

This study was approved by the Ethics Review Board (ERB) of the Fundação de

Medicina Tropical Dr. Heitor Vieira Dourado (approval number 872.520/2014), as well

as by the ERB of the Health Suveillance Foundation of the Amazonas State. All data

analyzed were anonymized. Since data were obtained exclusively from surveillance

databases, the ERB gave a waiver of informed consent.

Results

General characteristics

Table 1 shows the general characteristics of scorpion stings in the State of Amazonas,

from 2007 to 2012. According to the official reporting systems, during the period of

2007–2012, there were 1,358 cases of scorpion stings in the State of Amazonas. Most

of the records occurred in males, 892 (65.7%) cases. Regarding the area of

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occurrence, 56.2% were reported from rural areas. The most affected age group was

between 16 and 30 years old (30.6%). Stings occurred mostly in the upper (48.1%)

and lower limbs (46.5%), respectively. Regarding time elapsed from the sting until

medical assistance, 86.4% of the cases received treatment within the first six hours

after the sting.

Cases were mostly classified as mild (63.7%), followed by moderate (31.1%) and

severe (5.2%) cases. There were 3 deaths due to scorpion stings in the period,

resulting in a 0.2% lethality rate. The victims were children between ≤10 years of age.

There were 3 deaths due to scorpion stings in the period, resulting in a 0.2% lethality

rate. Lethality rate among children ≤10 years was 1.5%.

There was a slight increase in incidence rates during the study period. In 2007 the

incidence was 4 per 100,000, increasing to 9 cases per 100,000 inhabitants in 2012

(Fig. 1).

Spatial distribution

The mean incidence rate in the Amazonas State was 7 per 100,000 inhabitants/year.

Mapping showed a large swath in the South Region where scorpionism was predicted

to have incidence rates >50 cases/100 inhabitants/year. Incidence rates were also

higher >50 cases/100 inhabitants/year in Manaus surroundings, namely in the

municipality of Rio Preto da Eva (Fig. 2). Incidence rates were unevenly distributed

across the Amazonas State, although there were scorpion stings cases reported from

61 (98.4%) out 62 municipalities.

Most cases (747; 55%) occurred in South region and the region with fewer records

was the North (95 cases; 7%). The municipality with the highest mean incidence was

Apuí with 167 cases per 100,000 inhabitants/year, which in 2012 recorded the highest

incidence, 282 per 100,000 inhabitants/year. Rio Preto da Eva was the second

municipality in number of cases, with an mean incidence of 55 per 100,000

inhabitants/year (Supplementary Table).

Seasonality

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35

Regarding seasonality, there was an increase in the number of scorpion stings in the

Amazonas between June and July. The same was observed in the Central region of

the state. In the Southwest region, the number of cases is higher between February

and May. In South and North regions seasonality was no pronounced (Fig. 3).

There was a correlation between the absolute number of cases and the altimetric river

levels in the Central (p<0.001; Rs=0.479 linear) and Southwest (p=0.032; linear

Rs=0.261) regions. In the South (p=0.834; linear Rs=0.025) and North (p=0.610; linear

Rs=0.061) regions this correlation was not observed (Fig. 4).

Fators associated to severity

For 68 cases of severe scorpion stings during the study period, 204 controls were

selected among mild and moderate cases (Fig. 5). Table 2 summarizes the results of

the univariate and multivariate logistic regression evaluating factors associated with

scorpion stings severity. Age <10 years [OR=2.7 (95%CI=1.27-6.04; p=0.01)] and

stings occuring in the South region of the state [OR=2.3 (95%CI=1.31–4.35; p=0.004)

were independently associated with the risk of developing severity.

Discussion

In this study, it was found a wide distribution of scorpion stings in the state of

Amazonas, where a trend of increasing incidence over the study period was notable.

Case distribution was heterogeneous, with a hot spot observed in the southern state,

especially in Apuí, where the average annual incidence reached 167 cases per

100,000 inhabitants/year, coinciding with the areas of farming expansion from the

southern country. In this region, there is a huge increase of cattle, logging and farming

activities, including most recently mechanized cultivation of soybeans and cotton. In

this context, the destruction of the natural habitat of scorpions could lead to increased

contact between these animals and man during work activities. The incidence in this

municipality compares to the effects found in regions of Irã5, Colômbia19, Turquia20

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and other regions of Brasil21,12, places where scorpion stings are a major health

problem pública.

We emphasized that the scorpion is an important occupational health hazard in rural

areas of the Amazon, affecting mostly males of working age. In some large natural

regions such as Amazonia, human populations have remained low for centuries, and

only in recent years a rapid expansion of colonization has occurred. Isolated cases of

lethal stings have been observed after Tityus metuendus e Tityus obscurus stings.

These are probably equilibrium species and will be partially or totally selected against

by the destruction of their environment before human populations become large and

vulnerable to them22. The edges of the upper and lower limbs were the most affected

anatomical regions, totaling 92% of cases, in agreement with previous results from the

literature23–25. As a preventive measure the protection of these body with the use of

gloves and boots for populations at higher risk during the work is suggested.

The time between the accident and the service in the state was less than 6 hours in

80.7% of cases, which also occurred in other regions of Brazil26. Mostly of the severe

cases (79.4%) also received treatment in up 6 hours after the sting probably

contributing to prevent higher lethality in the Amazon. This may be related to the

location of occurrence of most cases, rural areas in the southern region of the state

(where there are roads and human settings are less isolated) and in urban areas, facts

that would facilitate access to specialized medical treatment.

There was a correlation between the absolute number of cases and the altimetric river

level in the Central and Southwest regions. This increase is probably due to the fact

that most rainfall flood the natural habitat of scorpions, forcing them to seek new

shelters in the period7,8. In the Southeast and Northeast of Brazil, it was observed that

most accidents occur on scorpion rainiest months6,21,23,27. This association was

also suggested in French Guiana28, Mexico8, Venezuela29 and in West Africa7. In

the South and North regions of the State of Amazonas this correlation was not

observed. In the North region, cases are scarce and sparsely distributed. In the South

region seasonality was not observed, which can be explained by the location of the

municipality of Apuí (where the majority of cases was recorded), far from the river

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banks, thus not suffering influence of floods. In this region, agricultural activities

developed during all the year may be related to scorpion stings incidence.

Age <10 years was independently associated with the risk of developing life-

threatening complications. Scorpion stings have greater severity in childhood,

suggesting that there is a directly relationship between venom levels in the plasma and

the poisoning severity30. Thus, venom would reach higher plasma concentrations in

children, since they have lower body mass7. Similar results were found in Mexico8,

Colombia31 and Argentina32. In this work, lethality rate among children ≤10 years was

1.5%, seven times higher than in the general population, showing scorpion stings as

an cause of death in childhood in the Brazilian Amazon. Early administration of

antivenom is highly effective, together with intensive care support in severe cases.

However, the rapid tissue distribution of scorpion venom toxins and their ability to

cause early death especially in young children, demands early treatment with

antivenom and full cardio-respiratory support. Case fatality rate due to scorpion stings

may result from experience of health personnel, supply of appropriate immunotherapy

and quality of care, with the latter being dependent on equipment from health facilities

(resuscitation equipment particularly)2. All these factors are fragile in small towns

isolated in the Amazon, located far from the reference centers.

Interestingly, scorpion stings occuring in the South region of the state were also

independently associated with severity. Unfortunately, there is no report of scorpion

fauna in this region, but we believe this may be due to the toxicity of the venom of

species of Tityus obscurus, since this species has been demonstrated in the State of

Pará causing severity in stings occurring in the western state33, a region that borders

the south of the Amazon. Contact with agents of local the epidemiological surveillance

reported the occurrence of the “black scorpion” in the region (popular name T.

obscurus), reinforcing this hypothesis. It is noteworthy that in SINAN reporting forms

there is no mention to the identification of scorpions.

The major limitation of this study is related to the lack of standardization in data

collection in different regions of the state, which likely affects the completeness of the

recorded data, as well as the lack of informations such as the kind of scorpion causing

the stings. Unfortunately, information on the specific clinical complications that define

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severity are almost never met in the reporting forms, limiting further analysis of these

variables. However, the broad population coverage and the low cost for the collection

of data allows to obtain valuable information to the public health system. Because

scorpion stings diagnosis and treatment is free of charge in Brazil and because patients

must be notified in SINAN before specific anti-venom treatment is started according to

the clinical severity classification, reporting of scorpion stings cases to SINAN is

believed to be reliable and reasonably complete in Brazil. However, we highlight that

estimates of independent risk factors for complications should be performed by means

of multicenter studies and statistical analyzes consistent with the outcomes.

In conclusion, scorpion stings show a large distribution in the Western Brazilian

Amazon and represent a potential occupational health problem for rural populations in

this region. Age ≤10 years and stings occuring in the South region of the state were

independently associated with the risk of developing severity. Thus, the mapping of

scorpions fauna in different Amazon localities is essential and must be accompanied

by the characterization of the main specific biological activities. The planning of

urbanization and farming activities, in parallel with the awareness of workers at risk for

scorpion stings on the need for the use of personal protective equipment should be

thought as public policies for preventing scorpionism.

Acknowledgements

To Dr. Bernardino Albuquerque, director of the Fundação de Vigilância em Saúde do

Estado do Amazonas (FVS-AM), which gave permission for the use of the data for this

research.

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42

Table 1. Characteristics of the 1,358 scorpion stings reported in the State of

Amazonas, 2007 to 2012.

Characteristics Number %

Sex (n=1,358) Male 892 65.7 Female 466 34.3 Area of occurrence (n=1,340)

Rural 753 56.2 Urban 587 43.8 Age group in years (n=1,358) 0-15 336 24.7 16-30 416 30.6 31-45 338 25.0 >45 268 19.7 Anatomical region of the sting (n=1,321) Head 29 2.2 Upper limbs 635 48.1 Body 42 3.2 Lower limbs 615 46.5 Time elapsed from sting to medical assistance (hrs) (n=1,268)

0-6 1,096 86.4 6-12 91 7.2 >12 81 6.4 Case severity (n=1,303) Mild 830 63.7 Moderate 405 31.1 Severe 68 5.2 Outcome (n=1,358) Discharged 1,355 99.8 Death 3 0.2

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43

Figure 1. Annual incidence of scorpionism on Amazonas (2007-2012).

0

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

2007 2008 2009 2010 2011 2012

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44

Figure 2. Spatial distribution of scorpion stings in the State of Amazonas, from 2007 to

2012.

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45

Figure 3. Seasonality of the scorpion stings reported in the State of Amazonas, by

region, from 2007 to 2012.

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46

Figure 4. Correlation between the absolute number of cases and the altimetric river

levels in the State of Amazonas, 2007 to 2012.

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Figure 5. Flow chart of cases and control selection.

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48

Table 2. Factors associated to scorpion stings severity in the State of Amazonas, 2007 to

2012.

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Supplementary Data

Supplementary Table. Annual mean incidence by municipality in the State of Amazonas, 2007-

2012.

Municipality Population Number of cases

Mean incidence

Municipality Population Number of cases

Mean incidence

Alvarães 14,381 22 26.0 Japurá 7,448 5 11.4 Amaturá 9,794 4 6.9 Juruá 11,439 4 6.2 Anamã 10,766 11 18.0 Jutaí 18,293 20 18.6 Anori 17,072 3 3.1 Lábrea 39,022 28 12.4 Apuí 18,633 181 167.1 Manacapuru 86,985 44 8.6 Atalaia do Norte 15,924 22 24.2 Manaquiri 24,325 12 8.8 Autazes 33,312 7 3.7 Manaus 1,861,838 212 2.0 Barcelos 25,948 9 5.8 Manicoré 48,373 9 3.2 Barreirinha 28,077 7 4.3 Maraã 17,596 15 14.4 Benjamin Constant

34,950 40 20.0 Maués 54,079 16 5.1

Beruri 16,158 1 1.1 Nhamundá 18,720 3 2.7 Boa Vista do Ramos

15,659 3 3.3 Nova Olinda do Norte

31,749 4 2.2

Boca do Acre 31,171 6 3.3 Novo Airão 15,489 11 12.4 Borba 35,919 13 6.3 Novo Aripuanã 22,106 3 2.3 Caapiranga 11,303 1 1,53 Parintins 103,828 100 16,3 Canutama 13,986 17 22.3 Pauini 18,329 2 1.8 Carauari 26,130 40 25.9 Presidente

Figueiredo 28,652 16 9.8

Careiro 33,517 10 5.1 Rio Preto da Eva 26,948 85 55.0 Careiro da Várzea 24,937 1 0.7 Santa Isabel do

Rio Negro 19,292 23 21.1

Coari 77,305 21 4.6 Santo Antônio do Içá

24,890 4 2.7

Codajás 24,067 9 6.5 São Gabriel da Cachoeira

39,097 30 13.4

Eirunepé 31,364 26 14.1 São Paulo de Olivença

32,677 11 5.8

Envira 16,923 7 7.2 São Sebastião do Uatumã

11,241 0 0.0

Fonte Boa 23,198 10 7.4 Silves 8,544 8 15.8 Guajará 14,396 5 5.9 Tabatinga 54,440 7 2.2 Humaitá 45,954 33 12.5 Tapauá 17,903 14 12.2 Ipixuna 23,460 4 3.0 Tefé 61,000 25 6.8 Iranduba 41,947 62 25.4 Tonantins 17,316 3 2.9 Itacoatiara 89,064 36 6.9 Uarini 12,139 13 18.2 Itamarati 7,983 6 12.4 Urucará 16,902 8 7.8 Itapiranga 8,348 5 10.2 Urucurituba 18,679 1 0.9

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Supplementary Figure. Mapping annual mean incidence by municipality in the State of

Amazonas, 2007-2012.

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5. DISCUSSÃO

Ocorreram 1.358 casos de escorpionismo no estado do Amazonas no período

estudado, sendo o terceiro estado da Região Norte em número de registros, ficando

atrás do Pará com 7.780 registros e Tocantins com 2.341 registros. No Brasil, a Região

Norte é a terceira colocada em número de notificações, sendo o Nordeste o primeiro

colocado e o Sudeste o segundo. No Amazonas, como em todas as outras regiões do

país, ocorreu aumento da incidência dos acidentes escorpiônicos com o passar dos

anos15, o que demonstra a importância desse agravo no Brasil. Isso pode ser devido

ao aumento populacional e à destruição do habitat natural dos escorpiões, com

consequente aumento na proximidade entre esses animais e o homem66, além disso

a maior eficiência nas notificações do SINAN também pode ter contribuído pra o

aumento no número de registros.

No Amazonas, 62% dos municípios tiveram incidência abaixo de 10 em

100.000 habitantes, incluindo a capital, Manaus, com incidência de 1,96 em 100.000.

Em 35% dos municípios a incidência ficou entre 10 e 30 em 100.000 habitantes. O

município com maior incidência média foi Apuí com 167 casos em 100.000 habitantes.

A incidência nesse município se compara às incidências encontradas em regiões do

Irã18, Colômbia29, Turquia67 e outras regiões do Brasil26,23, locais em que o

escorpionismo é um problema emergente de saúde pública2,3. A elevada incidência

em Apuí pode estar relacionada à atividade agropecuária intensa no munícipio, na

qual se baseia a economia local68, fazendo com que ocorra destruição do meio

ambiente e, consequentemente, maior proximidade desses artrópodes com os seres

humanos66.

Quanto à periodicidade dos casos, numa análise geral do estado, observa-se

um pico das ocorrências no mês de julho, o que é influenciado pelo fato de que na

mesorregião Centro Amazonense, onde a maioria dos casos foram registrados (55%),

haver maior número de registros no mês de julho, o que é demonstrado no gráfico de

sazonalidade dessa região do Amazonas. Foi demonstrada correlação estatística

entre o período de cheia dos rios e o aumento do número de casos de escorpionismo

no Centro (Rs= 0,479; p< 0,001) e no Sudoeste (Rs= 0,261; p= 0,032) do estado. Isso

pode ser justificado, pois o aumento do nível dos rios é fator que pode influenciar o

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aumento do número de casos de escorpionismo, já que o habitat natural dos

escorpiões é inundado e esses animais são obrigados a buscar abrigo em outros

locais, aumentando a proximidade com seres humanos e, assim, o risco de ocorrência

de acidentes11,13,19. No Norte do estado não foi observada tal correlação,

possivelmente, por haver baixo número de acidentes escorpiônicos nessa região e,

sendo assim, não ser possível verificar a variação da distribuiçao temporal dos casos.

Na Mesorregião Sul, não foi verificada sazonalidade dos registros, o que pode ser

devido à forte atividade agropecuária desenvolvida nessa região durante o ano, o que

aumentaria a proximidade entre seres humanos e escorpiões, visto que nessa região

a maioria dos casos (62%) ocorreu na zona rural, ambiente próximo ao habitat natural

de escorpiões. Além disso, nessa região, o município com maior número de registros

foi Apuí, o qual não está localizado à margem de rio, não sofrendo, assim, influência

de cheias.

A maioria dos acidentes ocorreu no sexo masculino 65,7% (892), o que está de

acordo com a literatura23,69 ,70 ,71. A ocupação é um dos principais fatores para que

esse gênero seja mais atingido, pois os homens constituem a maior parte da mão- de-

obra na construção civil e no trabalho agrícola, ambientes favoráveis à proliferação de

escorpiões1,25. Na zona rural ocorreram 55,5% (753) dos registros, concordando com

estudos no Marrocos43 e Turquia72. O maior número de ocorrências provenientes da

zona rural se justifica, pois no Amazonas grande parte da população da maioria dos

municípios depende do extrativismo vegetal como meio de sobrevivência, existindo

programas governamentais de incentivo à produção florestal, piscicultura e agricultura

sustentável69.

A faixa etária mais atingida foi de jovens entre 16 e 30 anos de idade, idade

economicamente ativa, totalizando 30,6% dos casos notificados. Outros estudos

encontraram resultados similares no Pará74 e na Bahia75. As extremidades foram a

região anatômica mais atingida, totalizando 92% dos casos, os membros superiores

somaram 46,7% dos casos e os membros inferiores 45,3%. Resultados semelhantes

foram encontrados na literatura24,69,76. Isso pode ser devido ao fato de os membros

serem as partes do corpos mais expostas usadas para realizar trabalhos manuais e

locomoção, estando desprotegidos muitas vezes.

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53

O tempo decorrido entre o acidente e o atendimento no estado foi menor que 6

horas em 80,7% dos casos, o que também ocorreu em outras regiões do Brasil75. A

maioria dos casos graves (79,4%) recebeu atendimento nessa faixa de tempo,

provavelmente, esse seja uns dos fatores para que a letalidade não seja alta no

Amazonas (0,2%) e se assemelhe à nacional que é 0,16%31. Isso pode estar

relacionado à localidade de ocorrência das maioria dos casos graves, em que 41,1%

ocorreram na Região Sul do estado. Nessa região há estradas e pouco isolamento,

fato que facilitaria o acesso a tratamento médico especializado.

Quanto à classificação dos acidentes, casos leves e moderados somaram

90,9% dos registros, o que pode ser devido à faixa etária, já que a gravidade dos

acidentes escorpiônicos está diretamente ligada à idade (normalmente mais graves

na infância) e 75,2% dos acidentes atingiu indivíduos acima dos 16 anos.

Não foi demonstrada correlação estatística entre gravidade e gênero, área de

ocorrência e região anatômica afetada. Na análise entre faixa etária e gravidade foi

encontrada significância para 0-10 anos de idade (p=0,006; OR: 2,756). Resultados

semelhantes foram encontrados no México13, Colômbia28 e Argentina20. A gravidade

do escorpionismo é maior na infância23, pois existe uma relação diretamente

proporcional entre a quantidade de veneno no plasma e a severidade do

envenenamento45. Assim, o veneno atinge maior concentração plasmática em

crianças, já que possuem menor massa corpórea11. Outro fator que pode influenciar

na gravidade é espécie de escorpião, entretanto não possível identificar a possível

espécie causadora dos acidentes no Amazonas, visto que na ficha de registro do

SINAN não há campo para que seja preenchida essa informação.

Houve significância estatística entre a Mesorregião do estado e a gravidade,

sendo identificada o Sul como fator associado à gravidade (p=0,011; OR: 2,1). Não há

relato da fauna escorpiônica nessa região, mas tal associação pode ser devido à

diversidade na toxicidade do veneno de espécies de Tityus obscurus, uma vez que foi

verificada maior gravidade nos casos de escorpionismo ocorridos no oeste no Estado

do Pará43, região que faz fronteira com o Amazonas. Agentes locais de vigilância

epidemiológica relataram a ocorrência do "escorpião negro" nessa região, o que

reforça essa hipótese.

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A principal limitação deste estudo está relacionada com a falta de padronização

na coleta de dados em diferentes regiões do estado, o que provavelmente afeta a

integridade dos dados registados, bem como a falta de informações, tais como o tipo

de escorpião causador de acidentes. As informações sobre as complicações clínicas

específicas que definem gravidade quase nunca são preenchidas de modo completo

nas fichas de notificação, limitando ainda mais a análise destas variáveis. No entanto,

a ampla cobertura da população e o baixo custo para se conseguir os dados, permite

a obtenção de informações valiosas para o sistema público de saúde. Porque o

diagnóstico e tratamento de picadas de escorpião é gratuito no Brasil e porque os

pacientes devem ser notificados no SINAN antes do tratamento específico anti-

veneno, o qual é iniciado de acordo com a classificação de gravidade clínica, acredita-

se que os relatórios de casos de escorpionismo do SINAN são confiáveis e

razoavelmente completos no Brasil.

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55

6. CONCLUSÃO

6.1 O escorpionismo é um problema emergente e negligenciado no Amazonas

e atinge, principalmente, pessoas do gênero masculino, moradores da zona rural e as

picadas, na maioria dos casos, atingem os membros superiores e inferiores. A real

incidência não é conhecida, visto que muitos casos são tratados pela medicina

tradicional, além disso, as grandes distâncias no estado e a complexidade de acesso

dificultam a busca por tratamento especializado.

6.2 No Amazonas, o escorpionismo é amplamente distribuído, estando

presente em todas as regiões do estado.

6.3 A letalidade no estado se assemelha à nacional e está associada à idade,

já que todos os óbitos ocorreram em crianças com idade menor ou igual a 10 anos.

6.4 A faixa etária entre 0 e 10 anos e a população residente na Região Sul do

estado anos são fatores de risco relacionados à gravidade dos acidentes

escorpiônicos no Amazonas. Assim, o mapeamento da fauna escorpiônica em

diferentes regiões do estado é essencial e deve ser acompanhado pela caracterização

das principais atividades biológicas do veneno de escorpiões.

6.5 A sazonalidade dos acidentes escorpiônicos no Amazonas está relacionada

fluviosidade nas regiões Sudoeste e Centro do estado, em que nos períodos de cheia

dos rios, há aumento dos casos de escorpionismo.

6.6 Deve haver políticas públicas para aumentar o acesso ao saneamento

básico, limpeza pública e de terrenos, conscientização dos trabalhadores de setores

de risco para acidentes escorpiônicos da importância do uso de equipamentos de

proteção individual, além de divulgação, para a população, dos fatores que

influenciam a proximidade desses animais com o homem. Preservar o habitat natural

dos escorpiões, contendo o crescimento desordenado das cidades e da agropecuária,

consiste em importante fator para o controle desse agravo.

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32. Cologna CT, Peigneur S, Rustiguel JK, Nonato MC, Tytgat J, Arantes EC. Investigation of the relationship between the structure and function of Ts2, a neurotoxin from Tityus serrulatus venom. Febs J 2012;279(8):1495–504.

33. Zoccal KF, Bitencourt S, Paula-Silva FWG, Castro K De, Bordon F, Arantes EC. Molecular Patterns from Tityus serrulatus to Induce Macrophage-Derived Inflammatory Mediators. 2014;9(2).

34. Amaral C f. S, Rezende NA, Pedros TMG, Pedroso ERP, Nogueira JM, Magalhães RA, et al. Tratamento intesivo do acidente escorpiônico. Análise de 35 casos. XXV Congresso da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical. 1989;208.

35. Hering SE, Vichi F leite, Marques MMA, Arevolo J, Jurca M, Romero LSC, et al. Evidências bioquímicas, Eletrográficas e Ecocardiográficas de Lesão Cardíaca no Escorpionismo Grave. XXV Congresso da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical. 1989;207.

36. Uluğ M, Yaman Y, Yapici F, Can-Uluğ N. Scorpion envenomation in children: an analysis of 99 cases. Turk J Pediatr 2012;54(2):119–27.

37. Horta CCR, Magalhães BDF, Oliveira-Mendes BBR, do Carmo AO, Duarte CG, Felicori LF, et al. Molecular, immunological, and biological characterization of Tityus serrulatus venom hyaluronidase: new insights into its role in envenomation. PLoS Negl Trop Dis 2014;8(2):e2693.

38. Ettinger K, Cohen G, Momic T, Lazarovici P. The effects of a chactoid scorpion venom and its purified toxins on rat blood pressure and mast cells histamine release. Toxins 2013;5(8):1332–42.

39. Verano-Braga T, Rocha-Resende C, Silva DM, Ianzer D, Martin-Eauclaire MF, Bougis PE, et al. Tityus serrulatus Hypotensins: a new family of peptides from scorpion venom. Biochem Biophys Res Commun 2008;371(3):515–20.

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40. Oliveira FN, Mortari MR, Carneiro FP, Guerrero-Vargas JA, Santos DM, Pimenta AMC, et al. Another record of significant regional variation in toxicity of Tityus serrulatus venom in Brazil: a step towards understanding the possible role of sodium channel modulators. Toxicon 2013;73:33–46.

41. Ossanai LT, Lourenço GA, Nencioni AL a, Lebrun I, Yamanouye N, Dorce VAC. Effects of a toxin isolated from Tityus bahiensis scorpion venom on the hippocampus of rats. Life Sci 2012;91(7-8):230–6.

42. Pardal PPO, Ishikawa EA, Vieira JL, Coelho JS, Dórea RC, Abati PA, et al. Clinical aspects of envenomation caused by Tityus obscurus (Gervais, 1843) in two distinct regions of Pará state, Brazilian Amazon basin: a prospective case series. J Venom Anim Toxins Incl Trop Dis 2014;20(1):3.

43. Ghalim N, El-Rafny B, Sebti F, et al. Scorpion envenomation and serotherapy in morocco. Am J Trop Med Hyg 2000;62:277-83.

44. Instituto Brasileiro do Meio Ambiente - IBAMA. www.guiabutanta.com/butantan/vacinas.htm

45. Lourenço WR. Scorpions of Brazil. 1st ed. França: Les Éditions de I’If; 2002.

46. De Sousa L, Bonoli S, Quiroga M, Parrilla P. Scorpion sting epidemiology in Montes Municipality of the State of Sucre, Venezuela: geographic distribution. Rev Inst Med Trop Sao Paulo. 1996;38(2):147–142.

47. Barroso E, Hidaka A, dos Santos A, Matos França J, de Sousa A, Rodrigues JV, et al. Centipede stings notified by the “Centro de Informações Toxicológicas de Belém”, over a 2-year period. Rev Soc Bras Med Trop. 2001;34(6):527–30.

48. Pardal PPO, Castro, Lívia Correa Jennings E, Pardal JS, Oliveira, Monteiro MR de C da C. Epidemiological and clinical aspects of scorpion envenomation in the region of Santarém, Pará, Brazil. Rev Soc Bras Med Trop. 2003;36(3):349–53.

49. Marçal AS, Ramos SM, Barbosa WO, Gadelha MAC, Pardal PPO. Distribuição espacial do escorpionismo no Pará. Rev Soc Bras Med Trop. 2005;38(suplemento I):58.

50. Sperotto LS, Yamao EYS, Knowles BM, Camilo FS, Silva MA, Sousa RD, et al. Estudo clínico e epidemiológico de 27 de escorpionismo em Brasil Novo/Altamira-PA. Período: fevereiro a setembro/2000. Rev Soc Bras Med Trop. 2001;34(suplemento I).

51. Pierini SV, Warrel DA, De Paulo A, et al. High incidence of bites and stings by snakes and other animals among rubber tappers and amazonian indians of the jurua valley, Acre state, Brazil. Toxicon 1996;34:225–36.

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52. Souza ARB, Arakian SKL, Buhrnhein PF. Estudo clínico-epidemiológico dos acidentes escorpiônicos atendidos no Instituto de Medicina Tropical de Manaus no período de 1986 a 1994. Rev Soc Bras Med Trop. 1995;28(suplemento I):167.

53. Höfer H, Wollscheid E. The relative abundance of Brotheas amazonicus (Chactidae, Scorpiones) in different habitat types of a Central Amazon rainforest. J Arachnol. 1996;24:34–8.

54. Araújo JS. Métodos de amostragem, influência dos fatores ambientais e guia de identificação dos escorpiões (chelicerata, scorpiones) da reserva ducke, manaus, amazonas, Brasil. Universidade Federal do Amazonas - UFAM; 2007.

55. Yamano EYS, Hidaka AS V., Negrão SG, Souza N, Lima SG, Souza ZN, et al. Aspectos epidemiológicos e clínicos dos acidentes por escorpiões orientados pelo centro de informações toxicológicas de Belém no período de maio de 1997 a novembro de 1998. Rev Soc Bras Med Trop. 1999;32(suplemento I):394.

56. Pinheiro MTL, Oliveira SMS. Ocorrência de escorpiões e acidentes escorpiônicos no bairro Elcione Barbalho, Santarém-PA. Rev Soc Bras Med Trop. 2003;36(suplemento I):85–6.

57. Almeida RB. Atlas das espécies de Tityus C. L. Koch, 1836 (Scorpiones, Buthdae) do Brasil. Universidade de São Paulo; 2010.

58. Pardal PPO. Escorpionismo em Itaiatuba Pará. Rev Soc Bras Med Trop. 2006;39(suplemento I):75.

59. Cardoso JL, Fan WF, Araújo FAA, Santalucia M, Lopes SJM. Escorpionismo nas macro-regiões do Brasil. Rev Soc Bras Med Trop. 1995;28(suplemento I):167.

60. Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística - IBGE. Unidades da federação. http://www.ibge.gov.br/estadosat.

61. Dinerstein E, Olson D, Graham D, Webster A, Primm S, Book-Binder M. Conservation assessment of the terrestrial eco-region of Latin America nd the Caribbean. Bank W, editor. Washington; 1995.

62. Ministério da Saúde. http://dtr2004.saude.gov.br/sinanweb/

63. Neto PLC. Estatística. Ed. Blucher Ltda; 1977.

64. Agência Nacional de Águas - ANA. Hidroweb.ana.gov.br.

65. Companhia de Pesquisa de Recursos Minerais. www.cprm.gov.br.

66. Lourenço WR, Cloudsley-Thompson JL, Cuellar O, et al. The evolution of escorpionism in Brazil in recents years. J Venom Anim Toxins 1996:2.

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67. Ozkan, O., Kat I. Mesobuthus eupeus scorpionism in Sanliurfa region of Turkey. J Venom Anim Toxins incl Trop Dis. 2005;11:479–91.

68. Instituto Brasileiro de Geografia e Estatística - IBGE. Cidades. http://www.cidades.ibge.gov.br.

69. Nunes CS, Bevilacqua PD, Jardim CCG. Aspectos demográficos e espaciais dos acidentes escorpiônicos no Distrito Sanitário Noroeste, Município de Belo Horizonte, Minas Gerais, 1993 a 1996. Cad Saúde Pública do Rio Janeiro. 2000;16(1):213–23.

70. V. C, R. J, J. J, V. G, Héctor, D. A, et al. Envenenamiento escorpiónico en El Palmar, estado Bolívar-Venezuela. Kasmera. 2011;39(1):43–8.

71. Amorim AM, Carvalho FM, Brazil RML-S, Kobler T. Acidentes por escorpião em uma área do Nordeste de Amaralina, Salvador, Bahia, Brasil. Rev Soc Bras Med Trop. 2003;36(1):51–6.

72. Yılmaz F, Arslan ED, Demir A, Kavalci C, Durdu T, Yılmaz EM, et al. Epidemiologic and clinical characteristics and outcomes of scorpion sting in the southeastern region of Turkey. Ulus Travma Acil Cerr Derg. 2013;19(5).

73. Governo do Estado do Amazonas. http://www.amazonas.am.gov.br/o-amazonas/economia/.

74. Neto A, Maestri AB, Carmo SF, Menezes H, Chalkidis C, Souza J ,Pardal PPO. Aspectos do escorpionismo no estado do pará-brasil. Rev Para Med. 2008;22(1):49–55.

75. Lira-da-Silva RM, Amorim, AM, Carvalho FM, Brazil TK. Acidentes por escorpião na cidade do salvador, bahia, brasil (1982 – 2000). Gaz Méd Bahia 2009;79(Suplemento 1):43–9.

76. Abourazzak S, Achour S, El Arqam L, et al. Epidemiological and clinical characteristics of scorpion stings in children in fez, morocco. J Venom Anim Toxins incl Trop Dis 2009;15:255–67.

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8. ANEXOS

8.1 ANEXO A – FICHA DE NOTIFICAÇÃO/INVESTIGAÇÃO DE ACIDENTES POR

ANIMAIS PEÇONHENTOS

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8.2 ANEXO B – Instruções aos autores

MANUSCRIPT FORMAT AND STRUCTURE

Please prepare your typescript text using a word-processing package (save in .docx

format).

Save and upload the complete text of the manuscript (i.e. title page, abstract, text,

reference list and figure legends) as a single file. Tables and figures should be

submitted as separate files (with appropriate file names), tables in Word or Excel and

figures in an appropriate file format saved at a size and resolution suitable for print

publication (see relevant section on submitting figures below). Each single figure

should be saved in a separate file. Where a figure is made up of several panels these

can be submitted in a single file, but must be of an appropriate file format and

resolution.

Include the files for any supplementary material to be submitted with your manuscript.

Please use short, simple filenames when saving all your documents, and avoid special

characters, punctuation marks, symbols (such as &), and spaces. Macintosh users

must also type the extension at the end of the chosen file name (.doc, .rtf, .jpg, .gif, .tif,

.xls, .pdf, .eps, .ppt, .mov or .qt).

Submitting figures: Each figure should have a title and a descriptive legend of a

maximum of 200 words and must provide enough detail to allow the figure to stand

alone. The description should indicate the interesting points of the figure. If a figure

has been published elsewhere it is essential that you have permission to reproduce or

adapt it for publication. It is the authors’ responsibility to obtain such permission from

the copyright holder and copies of permission should be forwarded to the Editorial

Office.

If figures include patients and the patients could recognise themselves please obtain

their written consent to publication before submitting your manuscript. You will be able

to download the consent form from the submission page.

Please be aware of the requirements for figure file formats and resolution. Figures

submitted to the Journal should be high-resolution .eps, .tif or .ppt files in vector

graphics and/or editable formats. We also accept figures e.g. flowcharts in Word or

Excel. Minimum resolutions are 300 d.p.i. for colour or tone images, and 600 d.p.i. for

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65

line drawings, saved at the size at which you would want it published in the print journal.

Saving images in a high resolution at a small size means that resolution will be lost

when they have to be enlarged.

Title page

The title should be short, specific and informative and include the type of study. Avoid

abbreviations and formulae where possible.

Authors and affiliations

Give the first name, initial(s) and surname of each author.

To ensure that the authors’ full surnames and forenames are tagged correctly, for

accurate indexing online, it is important to check that:

(i) all names have the correct spelling and are in the correct order (first name, then

family name); occasionally, the distinction between forenames and surnames can be

ambiguous.

(ii) initials are correct.

Below the names, list the authors’ affiliation addresses (where the actual work was

done). Indicate all affiliations (department, institution, city with postcode and country)

with a lowercase superscript letter immediately after the author’s name and in front of

the appropriate address. Indicate the corresponding author with an asterisk, and

provide his or her telephone number and email address.

If an author has moved since the work described in the article was done, or was visiting

at the time, a ‘Present address’ may be indicated as a footnote to that author’s name.

Superscript numerals are used for such footnotes. The address at which the author

actually did the work must be retained as the main, affiliation address.

Inclusion of a footnote stating that ‘The authors wish it to be known that, in their opinion,

the first x authors should be regarded as joint First Authors’ is permitted if the

appropriate box is checked on the submission website.

An example of how the affiliations should be presented is shown below:

Name Onea, Name Twob,1, Name Threec,*

Affiliation one; bAffiliation two; cAffiliation three

*Corresponding author: Tel: +00 0 000 0000; E-mail: [email protected]

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1Present address: xxxxx

Any deletions or additions to the author list after acceptance of the paper must be

submitted in writing, signed by all authors, to the Editorial Office.

Abstract

The second page of the manuscript should contain the Abstract, which will be printed

at the beginning of the paper.

The Abstract of a published paper needs to encourage the reader to read or obtain the

full text. It is also used by referees to decide whether they are willing to review. Make

sure that your Abstract is comprehensible to reviewers and readers before they have

read the paper. Use it to describe accurately and succinctly the content, scope and

importance of the work reported. Do no use reference citations. Avoid non-standard or

uncommon abbreviations unless essential, in which case define them at first mention.

A structured abstract (background; methods; results; conclusions) is required for all

Original Articles and Short Communications. For Commentaries and Reviews, the

Abstract should not be structured.

Word limit: the Abstract should not exceed 200 words for Original Article and Review

submissions or 100 words for Short Communications and Commentaries.

Accession numbers

If you are reporting new sequence accession numbers (DDBJ/EMBL/Genbank), these

should be listed below the abstract as well as being cited within the text.

Keywords

Immediately after the Abstract, please list up to six keywords. All keywords should be

capitalised and in alphabetical order, separated by commas.

Authors are recommended to use keywords from the US National Library of Medicine's

Medical Subject List, wherever possible. Choosing keywords in this manner may help

increase citation of your paper by making it more discoverable.

The suitability of keywords can be checked on the NLM MeSH Browser at

http://www.nlm.nih.gov/mesh/.

Main text

Start the main text on a new page.

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67

Commentaries should not have section categories, but Original Articles, Short

Communications and Systematic Reviews should normally have standard section

headings, as follows.

Introduction. State here the key objectives of the work reported, and provide some

background.

Materials and methods. Provide sufficient detail to allow the work to be reproduced. If

a review, please provide details of the literature search carried out.

Results. Results should be precisely presented once, in the text, tables or figures,

without discussion of their significance. When results are presented in tables or figures,

the text should comment only on the important points.

Discussion. This should explore the significance of the results, not repeat them.

Highlight any limitations of the study in a separate paragraph and discuss in full.

For Short Communications, the Results and Discussion sections can be combined.

Conclusions. The main conclusions of the study should be presented in a short

concluding paragraph at the end of the Discussion section.

Reviews other than systematic reviews do not need to include Materials and methods,

Results and Discussion sections. They must, however, include Introduction and

Conclusions sections and the rest of the manuscript should be separated by

appropriate headings and subheadings where necessary. They should also include

Review criteria, detailing the searches performed to identify papers included in the

review and any selection criteria applied to them.

Authors’ statements

These should include in the following order: Authors’ disclaimers (if required); Authors’

contributions; Acknowledgements (if required); Funding; Competing interests; Ethical

approval.

Authors’ contributions

All authors listed on the manuscript should have contributed significantly to the

experimental design, its implementation, or analysis and interpretation of the data. All

authors should have been involved in the writing of the manuscript at draft and any

revision stages, and have read and approved the final version. Anyone who made

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major contributions to the writing of the manuscript should be listed as an author (e.g.

’ghost writing’ is prohibited by the Journal). Any other individuals who made less

substantive contributions to the experiment or the writing of the manuscript should be

listed in the acknowledgements section. The guarantors of the paper must be named.

Please make sure that the Declaration of author contributions is signed by all authors

when submitting.

Please use the following format (use initials to refer to each author): CJ and HGM

conceived the study; BJA and CJ designed the study protocol; BJA and HGM carried

out the clinical assessment; CJ and FT carried out the immunoassays and cytokine

determination, and analysis and interpretation of these data. BJA and CJ drafted the

manuscript; BJA HGM and FT critically revised the manuscript for intellectual content.

All authors read and approved the final manuscript. BJA and CJ are guarantors of the

paper.

Acknowledgements

Acknowledgments and details of non-financial support must be included at the end of

the text, after ‘Authors’ Contributions’, and not in footnotes. Personal

acknowledgements should precede those of institutions or agencies. Authors should

obtain permission to acknowledge from all those named in the Acknowledgements and

forward details of this permission to the Editorial Office at the time of submission.

Please note that acknowledgement of funding bodies and declarations regarding

competing interests should be given in separate Funding and Competing Interests

sections, respectively.

Funding

Please give details of all funding sources for the work in question, and note the

following rules:

The sentence should begin: ‘This work was supported by …’

The full official funding agency name should be given, i.e. ‘the National Cancer Institute

at the National Institutes of Health’ or simply 'National Institutes of Health' not ‘NCI'

(one of the 27 subinstitutions) or 'NCI at NIH’ (full RIN-approved list of UK funding

agencies)

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69

Grant numbers should be complete and accurate and provided in brackets as follows:

‘[grant number ABX CDXXXXXX]’

Multiple grant numbers should be separated by a comma as follows: ‘[grant numbers

ABX CDXXXXXX, EFX GHXXXXXX]’

Agencies should be separated by a semi-colon (plus ‘and’ before the last funding

agency)

Where individuals need to be specified for certain sources of funding the following text

should be added after the relevant agency or grant number 'to [author initials]'.

An example is given here: ‘This work was supported by the National Institutes of Health

[P50 CA098252 and CA118790 to R.B.S.R.] and the Alcohol & Education Research

Council [HFY GR667789].

Competing interests

At the point of submission, each author should reveal any financial interests or

connections, direct or indirect, or other situations that might raise the question of bias

in the work reported or the conclusions, implications or opinions stated – including

pertinent commercial or other sources of funding for the individual author(s) or for the

associated department(s) or organisation(s), personal relationships, or direct academic

competition. When considering whether you should declare a competing interest or

connection please consider the competing interests test: Is there any arrangement that

would embarrass you or any of your co-authors if it was to emerge after publication

and you had not declared it?

As part of the online submission process, corresponding authors are required to

confirm whether they or their co-authors have any competing interests to declare, and

to provide details of these. If the Corresponding author is unable to confirm this

information on behalf of all co-authors, please contact the Editorial Office. It is the

Corresponding author’s responsibility to ensure that all authors adhere to this policy.

If the manuscript is published, competing interests information, including if none was

declared, will be communicated in a statement in the published paper.

Ethical approval

Authors should observe high standards with respect to publication ethics as set out by

the Commission on Publication Ethics (COPE) and International Committee of Medical

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70

Journal Editors (ICMJE). By submitting your manuscript to the Journal it is understood

that it is an original manuscript, is unpublished work and is not under consideration

elsewhere. Falsification or fabrication of data, plagiarism, including duplicate

publication of the authors’ own work without proper citation, and misappropriation of

the work are all unacceptable practices. Manuscripts submitted to the Journal may be

checked for originality using anti-plagiarism software. Any cases of ethical misconduct

are treated very seriously and will be dealt with in accordance with the COPE

guidelines.

Authorship and 'Umbrella' groups

Many large collaborative studies are organised under a group name which represents

all the participants. All articles must have at least one named individual as author.

Authors who wish to acknowledge the umbrella group from which the data originate

should first list the author(s) of the article and follow this with 'on behalf of the GROUP

NAME'. If necessary, the names of the participants may be listed in the

Acknowledgements section.

Animal experiments

When reporting animal experiments, authors should indicate whether the institution’s,

national research council’s or any other law on the care and use of laboratory animals

was followed.

Human subjects

When reporting on human subjects, authors should indicate whether the procedures

followed were in accordance with the ethical standards of the Helsinki Declaration

(1964, amended most recently in 2008) of the World Medical Association. Manuscripts

should include a statement that the patient’s written consent was obtained and any

information, including illustrations, should be as anonymised as far as possible.

Authors should indicate that the design of the work has been approved by local ethical

committees or that it conforms to standards currently applied in the country of origin.

The name of the authorising body should be stated in the paper.

We encourage authors to use the following tools to ensure good practice in reporting

their work:

• The CONSORT checklist of items to include when reporting randomised trials;

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71

• The STARD checklist of items for reporting studies on diagnostic accuracy;

• The PRISMA checklist for systematic reviews and meta-analyses.

If you have no declaration to make for funding, competing interests and ethical

approval please insert the following statements:

Funding: None.

Competing interests: None declared.

Ethical approval: Not required.

References

Full references should be provided in accordance with the style of TRSTMH and the

Oxford SCIMED referencing style, following the instructions and examples below.

References must be numbered in the list in the order in which they appear in the text

using superscript numbers which are placed after punctuation marks and should not

be in brackets or parentheses. All references present in the reference list must be cited

in the text. Any references applicable only to display items (i.e. not cited in the main

text) should be cited in the relevant table, box or figure legend and added to the end

of the reference list.

Journal titles and author initials should be properly abbreviated and punctuated. Page

numbers should be truncated, i.e. 345–9 and not 345–349.

Et al. is used; for references with more than four authors, list the first three followed by

et al.

If a web address is included, give the accessed date – see example 4 below.

The citation of journals, books, multi-author books and articles published online should

conform to the following examples:

Kennedy T, Jones R. Effect of obesity on esophageal transit. Am J Surg

1985;149:177–81.

Long HC, Blatt MA, Higgins MC et al. Medical Decision Making. Boston: Butterworth-

Heinemann; 1997.

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72

Manners T, Jones R, Riley M. Relationship of overweight to haitus hernia and reflux

oesophagitis. In: Newman W (editor). The Obesity Conundrum. Amsterdam: Elsevier

Science, 1997;352–74.

Public Health Laboratory Service. Antimicrobial Resistance in 2000: England and

Wales. http://www.hpa.org.uk./infections/topics_az/antimicrobial_resistance/amr.pdf

[accessed 7 January 2004].

Personal communications (J. Jones, personal communication) must be authorised in

writing by those involved, and unpublished data should be cited in the text as

(unpublished data). References to manuscripts submitted, but not yet accepted, should

be cited in the text as (B. Jones and L. Smith, manuscript submitted) and should not

be included in the list of references. Citations of submitted manuscripts should include

all authors involved (use et al if more than four). If referring to a website, cite the web

URL in parenthesis at the appropriate mention in the text.

Please note that Wikipedia cannot be cited as a reference.

TABLES, TEXT BOXES AND FIGURES/ILLUSTRATIONS

Text boxes, tables and figure illustrations should be submitted as seperate files.

Tables

All tables should be cited in the text and numbered according to the order they are

cited. Each table must have an explanatory title, so that it can be understood without

reference to the text. Tables must be prepared using Excel spreadsheets or the table

function of Word i.e. they must be cell based (tabs and hard returns must not be used

to separate columns and rows). Avoid overcrowded tables and keep words to a

minimum. Shading should not be used in tables. Give the units in which results are

expressed in parentheses at the top of each column or start of each row; do not repeat

units in each entry. Avoid blank cells by using ND, NA, etc. and define in a footnote

below the table body. If p-values in a table are not significant, replace numbers with

NS (define NS in footnote). Define any non-standard abbreviations alphabetically in a

footnote, even if they are defined in the text. Indicate any explanatory footnotes with

lowercase superscript letters, as in the example below:

CFR: case fatality rate; DOT: directly observed treatment; TST: tuberculin skin test.

a Per 1-year increase.

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73

b p-value <0.01.

Check carefully that the data given in tables are correct and that percentages add up

to 100%.

Please note that tables must be provided in an editable format (such as .doc, .docx or

.xls) and not in picture format (such as .tif).

Text boxes

Text boxes are a useful way of presenting information such as lists, formulae,

questionnaires, literature search criteria or quotes. Cite each box within the text and

number them consecutively in order of appearance. Provide each with an explanatory

title.

Figures and illustrations

Number figures consecutively, in order of their citation within the text; use A, B, etc. to

denote different panels.

Each figure must have a complete caption (figure legend) on the last page of the

manuscript that clearly explains all elements of the figure, including different panels

and abbreviations. Figure legends must not exceed 200 words.

The Journal reserves the right to reduce the size of illustrative material. Wherever

possible, photographs should fit within the print area (180mm wide) or within a column

width (90mm wide).

Figures cannot be edited or relettered by the Publishers or Editorial Office. When

creating figures, please make sure any embedded text is large enough to read. Any

characters not easily readable in the submitted figure will most likely be illegible in the

final version.

Any photomicrographs, electron micrographs or radiographs must be of high quality;

add arrows to indicate points of interest. Photomicrographs should provide details of

staining technique and a scale bar. Patients shown in photographs must have their

identity concealed or must have given their written consent to publication.

Certain image formats such as .jpg and .gif do not have high resolutions, so you may

elect to save your figures and insert them as .tif instead. Please see the notes on file

submission at the start of this guidance.

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General points:

Make sure you use uniform lettering, symbols and sizing in your original artwork

Arial font should be used in figures

The axes of graphs must be clearly labelled and should be carefully chosen so as to

occupy the space available to the best advantage

Line drawings should be as simple as possible: do not use overcomplicated figure

styles, e.g. three-dimensional graphs (when there are only two data sets), fine lines,

backgrounds behind graphs, gradations of stippling and unusual symbols.

Define any abbreviations in the figure legend, even if they are defined in the main text.

For useful information on preparing your figures for publication, go to

http://cpc.cadmus.com/da.

Colour illustrations

Authors can choose to have their figures published in colour in print at a charge of

£350/$600/€525 per figure.

Alternatively, TRSTMH also offers free reproduction of colour figures in the online

version (figures in the print version will appear in black and white). When submitting

your manuscript, you will be asked if you require colour reproduction for the print

journal and if so, to confirm the colour figure charge. If you require colour reproduction

of figures in the print journal you will be asked to approve a cost when you receive the

proofs of your paper. You will be asked to complete the payment process at the time

of publication, and if required further information will be provided by the Production

[email protected] and Journals Customer Services departments

[email protected] Figure captions must be suitably worded to apply to both the

print and online versions of the article.

SUPPLEMENTARY DATA

Supporting material that is not essential for inclusion in the full text of the manuscript,

but would nevertheless benefit the reader, can be made available by the publisher as

online-only content, linked to the online manuscript. The material should not be

essential to understanding the conclusions of the paper, but should contain data that

is additional or complementary and directly relevant to the article content. Such

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information might include more detailed methods, extended data sets/data analysis or

additional figures.

All material to be considered as supplementary data must be submitted at the same

time as the main manuscript for peer review. It cannot be altered or replaced after the

paper has been accepted for publication, and will not be edited.

All text and figures must be provided in suitable electronic formats. Please indicate

clearly all material intended as supplementary data upon submission and name the

files e.g. ‘Supplementary Figure 1’, ‘Supplementary Data’, etc. Also ensure that the

supplementary data is referred to in the main manuscript where necessary, for example

as ‘(see Supplementary data)’ or ‘(see Supplementary Figure 1)’.