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Universidade Federal do Triângulo Mineiro
Instituto de Ciências Biológicas e Naturais (ICBN)Disciplina de Microbiologia Clínica
Professora Dra. Adriana Gonçalves de Oliveira Diagnóstico Microbiológico das Infecções de Pele e Tecido
SubcutâneoJuliana de Morais Palmieri da Silva
Lais de Melo Valente Lázaro Antonio C. Novaes
Curso de BiomedicinaUberaba - MGJunho/2015
Aspectos gerais DIA
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Estrutura anatômica Epiderme (mais superficial) Derme (mais profunda) Camada subcutânea adiposa
http://www.infoescola.com/anatomia-humana/derme/
Aspectos gerais DIA
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Infecções cutâneas Grande diversidade de agentes etiológicos Mecanismos patogenéticos múltiplos Classificação
Primária – Ex.: Erisipela Secundária – Ex.: Complicações de lesões de pele
(abrasões) Aguda Crônica Monomicrobiana – Ex.: Feridas infectadas por
estafilococos Polimicrobianas – Ex.: Condições gangrenosas
cuja etiologia é o Streptococcus spp.
Microbiota normal A pele é um dos sítios colonizados de nosso organismo, sendo que os microrganismos em questão localizam-se em especial nas áreas úmidas, como a virilha e as áreas interdigitais;Dentre esses microrganismos podem ser citados os bacilos difteróides aeróbios e anaeróbios, estafilococos aeróbios e anaeróbios não hemolíticos e bacilos Gram-positivos aeróbios.
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Exemplos: Acinetobacter; Aerococcus; Bacillus; Clostridium
perfringens; Corynebacterium;
Micrococcus; Propionibacterium; Staphylococcus; Streptococcus
(grupo A).
Painel Geral de Provas Bioquímicas
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Celulite Enterobactérias
• Prova da citocromo-oxidase
• Prova da oxidação-fermentação (OF) da glicose
Antraz Bacillus anthracis
• Coloração especial
• Sensibilidade a antimicrobianos
Tuberculose cervical
Mycobacterium tuberculosis
• Pesquisa de bacilo ácool-ácido resistente - BAAR
Infecção pós-operatória
simples Clostridium spp.
• Hidrolise de gelatina;
• Fermentação de carboidrato;
• SIM
Infecção de feridas complicadas
Vibrio vulnificus
• Citocromo-Oxidase;• Fermentação de Carboidratos;
• Prova do Halofilismo; • Teste da Oxidação e Fermentação (OF) da glicose
Gangrena de Fournier Escherichia coli
• Prova da citocromo oxidase;• Oxidação-Fermentação da
glicose (OF);• SIM;• TSI;• Citrato;• Ureia;• Fermentador de lisina;• Voges Proskauer (VP)
Mordedura Pasteurella
multocida
• Prova da Catalase; • Fermentação de carboidratos;
• Urease;• SIM
Coleta de Material
Aspiração
Swab
Biópsia >>> Gold Standard
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Fonte: http://www.sporometrics.com/services/environmental-analysis/supplies-equipment/
LESÃO ABERTA
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Fonte: http://enfermeiro.br.tripod.com/lesoes/id10.html
ABSCESSO FECHADO DIA
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NEOColeta de Material
Fonte: http://enfermeiro.br.tripod.com/lesoes/id10.html
FERIDA DE QUEIMADURA DIA
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NEOColeta de Material
Fonte: http://enfermeiro.br.tripod.com/lesoes/id10.html
PÚSTULA E VESÍCULA DIA
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NEOColeta de Material
Fonte: http://enfermeiro.br.tripod.com/lesoes/id10.html
BIÓPSIA DIA
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NEOColeta de Material
Fonte: http://www.dermatopatologia.com/biopsias/
Swab sem meio de transporte – enviar imediatamente após a coleta
Swab com meio de transporte - enviar em temperatura ambiente(20 a 25ºC) até 8 horas após coleta
Aspirados – em temperatura ambiente (20 a 25ºC) até 2 horas ou injetar a amostra em frasco com meio de cultura apropriado, como, por exemplo, frasco utilizados para hemocultura
Biopsia – em temperatura ambiente (20 a 25ºC) até 2 horas após coleta.
TRANSPORTE
Coleta de Material
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Procedimentos
Exames microscópicos Método de Gram
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Procedimentos Cultura
Inoculação Swab sem meio de
transporte Swab com meio de
transporte Seringa Biópsia
Tecido de pele queimada
Incubar por 24 a 72 horas
Fonte: http://biomedicinaemicro.blogspot.com.br/p/culturas-bacterianas.html
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Meios de Cultura
Agar sangue (AS) Agar MacConkey (MC) Agar Chocolate (CHOC) Caldo TSB Caldo tioglicolato (THIO)
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Avaliação da Cultura
Panorama: infecções e agentes etiológicos
Lesões eritematosas e superficiais Impetigo Erisipela Celulite Foliculite, furúnculos e carbúnculo Paroníquia (prega da unha) Micoses superficiais
Ulcerações e nódulos Lesões esporotricoides Blastomicose e Criptococose Difteria cutânea Antraz
Fístulas Tuberculose Infecções mistas ou foco crônico
Queimados
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Panorama: infecções e agentes etiológicos
Feridas cirúrgicas Infecção pós-operatória simples
Clostridium spp. Infecção de feridas complicadas
Vibrio vulnificus Infecções complicadas e lesões causadas por mordedura
Gangrena de Fournier Escherichia coli
Mordedura por animais Pasteurella multocida (cão e gato)
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Margem da área = pouco definida e sem elevação central.
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Lesões Eritematosas e Superficiais: CELULITE
Staphylococcus aureus
Streptococcus spp. do grupo A
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• Vibrio spp. e Aeromonas spp.Introdução
do microrganis
mo
• Ferida ou laceração
Natação em água doce ou
do mar
Celulite
Agentes etiológicos menos frequentes:
Enterobactérias; Pasteurella spp.; Clostridium spp.;
Bacillus antracis; Erysipelotrix sp. Aeromonas spp.; Haemophilus spp.
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Coloração de Gram
Agar Sangue
(AS)
Agar chocolateAgar
MacConkey
Caldo tioglicolato
Caldo trypticase
soja
Celulite
Cultura
Diagnóstico Laboratorial
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Diagnóstico Laboratorial Celulite
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes β-hemolítico
do grupo A
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Identificação de Cocos Gram-positivos
Celulite
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Bacilos Gram-negativos
Fermentador
Oxidase negativo
(-)
Enterobactérias
Oxidase Positivo (+)
Plesiomonas
Vibrio
Campylobacter
Não fermentador
Oxidase negativo
(-)
Acinetobacter
Burkolderia cepacia
Stenotrophomonas
Oxidase positivo (+)
Pseudomonas spp.
Burkolderia spp.
Alcaligenes spp.
Identificação de Bacilos Gram-negativos
Celulite
Identificação de Enterobacteriacea
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Provas Bioquímicas
Celulite
Prova da Oxidação-Fermentação (OF)
da glicose
Dois tubos de ensaio com meio OF-glicose semi-sólido (agulha de platina) Óleo mineral estéril (tubo fechado)
Teste positivo
Meio muda de verde para amarelo
(produção de ácido)
Tubo aberto
• Ácido (amarelo)
• Ácido (amarelo)
• Alcalino (verde ou azul)
Tubo fechado
• Alcalino (verde)
• Ácido (amarelo)
• Alcalino (verde ou azul)
Metabolismo
• Oxidativo• Fermentati
vo• Não-
sacarolítico
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Provas Bioquímicas
Celulite
Prova da Citocromo-Oxidase
Colônias isoladas em placa de Petri com agar MacConkey (alça de platina) Tira com reativo para detecção da enzima (cadeia respiratória)
Teste positivo
Fita adquire coloração azul (em
no máximo 1 minuto)
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Provas Bioquímicas
Celulite
EXEMPLO: Enterobactérias são citocromo-oxidase negativas (-)
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Ulcerações e Nódulos: ANTRAZ
Bacillus anthracis
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Agar Sangue
(AS)
Agar Sangue telurito
Antraz
Cultura
Diagnóstico Laboratorial
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Antraz
Bacilos Gram-positivos
Giemsa Azul de Löeffler Wright
Olt Hiss Tinta da China
Coloração
Cápsu
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Agar Triptona de Soja
(TSA):Sensibilidade aos ATMs
Provas Bioquímicas
Antraz
Bacilos Gram-positivos
Amoxacilina + Ácido
clavulânico
Gentamicina Amicacina
Canamicina
Fluoroquinolonas
Tetraciclina
Cloranfenicol
Rifampicina Vancomicina
AntrazD
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Bacilo aeróbioGram positivo
Imóvel Capsulado
Formador de esporo Crescimento entre 12 e 44ºC
Produção de ácido Colônias opacas
Margens irregulares Aspecto de “cabeça de medusa”
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Fístulas: TUBERCULOSE CERVICAL
Mycobacterium tuberculosis
Paciente com linfadenite cervical
causada por micobactéria (TB
positivo)
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Coloração de Ziehl-Nielsen
(baciloscopia)/ auramina
Agar Lowestein-
Jensen
Meio Middlebrook
7H10 ou 7H11
MGIT Bactec 12B
Tuberculose Cervical
Cultura
Diagnóstico Laboratorial
MB/BacT 3D
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Bacilo imóvel Aeróbio obrigatório
Parede celular com grandequantidade de lipídeos
Álcool-ácido resistente Sensível ao calor e luz UV
Cresce lentamente em cultura
Tuberculose Cervical
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Feridas cirúrgicas
Clostridium spp.
Vibrio vulnificus
Redução Índigo por Clostridium spp. isolado
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Infecções complicadas: gangrena de Fournier
Escherichia coli
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Gangrena de Fournier
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Provas Bioquímicas
Gangrena de Fournier
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Lesões causadas por mordeduras
Pasteurella multocida
Bactéria cocobacilar Gram negativa
Agar Sangue de carneiro
(AS)
Agar chocolate
Cultura
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Mordeduras
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Provas Bioquímicas
Meio SIM (sulfeto-indol-
motilidade)
Mordeduras
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Teste do Indol
Útil para separar Escerichia coli (positiva) de Klebisiella-Enterobacter-Hafnia-Serratia (negativas – maioria)
fortemente POSITIVA
Mordeduras
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Motilidade
IMÓVEL
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Teste do sulfeto (H2S)
NEGATIVA
Mordeduras
Referências Bibliográficas Livro Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. OPLUSTIL et. al. Editora Sarvier. 3ª ed. 2009 Livro Diagnóstico Microbiológico. KONEMAN et.al. Editora Guanabara Koogan. 6 ed. 2008; Manual de Microbiologia Clínica para Controle da Infecção em Serviços de Saúde. www.anvisa.gov.brDisponível em: < http://www.forumsaude24.com/wp-content/uploads/2013/12/Impetigo-2.jpg>. Acesso em 29/05/2015, às 17h12minDisponível em: < http://aeltec.blogspot.com.br/2009/10/impetigo-nao-e-herpes.html >. Acesso em 29/05/2015, às 17h15minDisponível em: < http://www.scielo.br/img/revistas/abd/v87n2/a13fig04.jpg >.Acesso em 29/05/2015, às 17h19minDisponível em < https://microdidatica.wordpress.com/microbiologia-geral/aspectos-culturais/ >.
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Disponível em < http://www.microregistrar.com/wp-content/gallery-bank/gallery-uploads/o_18vlm8acsd0nmn6idc1ds3eced.jpg >. Acesso em 29/05/2015, às 17h37min. Disponível em < http://pt.slideshare.net/profluiscarloscarvalho/estafilococos-13472102>. Acesso em 05/06/2015, às 14h21min. Disponível em <http://www.infoescola.com/anatomia-humana/derme. Disponível em< http://www.ebah.com.br/content/ABAAAfveUAD/flora-normal-pele-olho-ouvido>. Disponível em < http://www.ufrgs.br/labacvet/files/G%C3%AAnero%20Bacillus%204-2013-1%20vers%C3%A3o%202013.pdf.>. Disponível em < http://cdn.healthaim.com/wp-content/uploads/2015/03/Anthrax.jpg>.
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Disponível em < http://image.slidesharecdn.com/aulasalmonellacqa-090624162645-phpapp02/95/aula-salmonella-cqa-29-728.jpg?cb=1245860843> Disponível em < https://sites.google.com/site/scientiaestpotentiaplus/_/rsrc/1364847401258/reagente-de-kovac/indol%20negativa.JPG> Disponível em < http://www.elsevier.es/imatges/28/28v33n05/grande/28v33n05-90422115fig1.jpg> Disponível em < http://imagem.casadasciencias.org/online/38550418/07-capitulo05_ficheiros/ch5_anthrax.jpg>
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Universidade Federal do Triângulo Mineiro
Instituto de Ciências Biológicas e Naturais (ICBN)Disciplina de Microbiologia Clínica
Professora Dra. Adriana Gonçalves de Oliveira Diagnóstico Microbiológico das Infecções de Pele e Tecido
SubcutâneoJuliana de Morais Palmieri da Silva
Lais de Melo Valente Lázaro Antonio C. Novaes
Curso de BiomedicinaUberaba - MGJunho/2015
