Aline Paula Biazus Somacal

FAN

FAN (fator antinuclear) = AAN (anticorpos antinucleares) = ANA = anticorpo antinuclear = PAAC (pesquisa de anticorpos contra antígenos celulares)

O FAN não é um anticorpo antinuclear específico, e sim um teste para avaliar a presença de um ou mais autoanticorpos. Ou seja: é um teste de screening para autoanticorpos.

É uma medida da intensidade e qualidade de produção de autoanticorpos contra os componentes celulares:

Citoplasma Núcleo Nucléolo Aparelho mitótico Padrão misto (colorações de compartimentos celulares distintos ou

diferentes padrões de imunofluorescência diferentes em um mesmo compartimento celular)

Auto-anticorpos

Soro do paciente + secções de tecido(céls Hep-2) + antiimunoglobulina humana de coelho marcada com fluoresceína visualização ao microscópio: cor verde-maçã

Imunofluorescência Indireta

Substratos: Fígado de camundongo Células Hep-2: células de câncer de laringe

humana

Hep-2 é melhor e mais usado atualmente: sensibilidade de quase 100% , identifica anticorpos anticentrômero, antiRo-SSA e anti-PCNA. Especificidade em torno de 85% (falsos positivos).

Fígado de camundongo é menos sensível e mais específico.

Imunofluorescência indireta

Últimos anos teve aumento de sensibilidade e prejuízo na especificidade.

Síndrome do anticorpo antinúcleo idiopático: altas taxas de positividade em indivíduos saudáveis.

Exame solicitado com menos critério por grande variedade de especialistas aumento de resultados positivos em indivíduos saudáveis ou com expressões clínicas pouco expressivas.

PROBLEMAS

Pessoas saudáveis ou com doenças não-reumáticas podem ter teste positivo.

5-10% da população é portadora de algum autoanticorpo antinuclear inespecífico em baixos títulos.

Algumas doenças que podem ter FAN positivo em baixos títulos geralmente: Doenças hepáticas, neoplasias, malária, endocardite bacteriana subaguda, hanseníase, etc.

PROBLEMAS

1. O exame deve ser solicitado apenas quando houver suspeita convincente de doença autoimune.

2. Título: Pacientes autoimunes tem títulos moderados (1/160 e 1/320) e elevados ( > 1/640). Enquanto que indivíduos sadios tendem a apresentar baixos títulos (< 1/80).

3. Padrão de fluorescência: alguns antígenos são específicos para determinadas doenças autoimunes, enquanto outros ocorrem indiscriminadamente em indivíduos autoimunes e não autoimunes.

4. Nível de autoimunidade fisiológica flutua na dependência de sobrecargas, como: infecções, medicamentos(hidralazina, procainamida), neoplasias, HIV, etc.

5. Autoanticorpos precedem a eclosão clínica de certas doenças em anos. O paciente poderá vir a desenvolver uma doença autoimune nos próximos anos. No entanto, alguns pacientes seguem décadas com autoanticorpos circulantes sem desenvolver qualquer sinal de enfermidade autoimune.

Elementos importantes para valorização adequada do exame

ATENTAR PARA OS PADRÕES NUCLEARES HOMOGÊNEOS E PERIFÉRICOS:

PADRÕES FIDEDIGNOS E DE ALTA SENSIBILIDADE.

1. PADRÃO NUCLEAR HOMOGÊNEO:

Anticorpo anti-DNA nativo (dsDNA): marcador de LES.

Anticorpo anti-histona: marcador de LES induzido por drogas, LES idiopático, AR, artrite idiopática juvenil, síndrome de felty e hepatite autoimune.

Anticorpo anticromatina (DNA/Histona, nucleossomo): LES.

PADRÕES DE FAN

2. PADRÃO NUCLEAR PERIFÉRICO

-Autoanticorpos dirigidos contra estruturas da membrana nuclear.

-Anti-DNA nativo se no tecido a cromatina estiver inativa.

-Padrão antigo.

3. PADRÃO NUCLEAR TIPO MEMBRANA NUCLEAR:

-Autoanticorpo contra proteínas do envelope nuclear:

-Cirrose biliar primária (anti-gp 210)-Hepatites autoimunes-Doenças reumáticas (raramente).-Indivíduos sem autoimunidade

-Outros anticorpos: anti-p62(nucleoporina), anti-lamin A, anti-lamin B, anti-lamin C, anti-LBP.

4. PADRÃO NUCLEAR PONTILHADO GROSSO:

-Anticorpo anti-Sm: marcador para LES.

-Anticorpo anti-RNP: Doença mista do tecido conjuntivo, LES e esclerose sistêmica.

5. PADRÃO NUCLEAR PONTILHADO FINO:

-Anticorpo Anti-SS-A/Ro: Síndrome de Sjögren primária, LES, lúpus neonatal, lúpus cutâneo subagudo, esclerose sistêmica, polimiosite e cirrose biliar primária.

-Anticorpo Anti-SS-B/La: Síndrome de Sjögren primária, LES, lúpus neonatal.

6. PADRÃO NUCLEAR PONTILHADO FINO DENSO:

-Anticorpo antiproteína p75, denominado LEDGF/p75: correlação clínica não está bem estabelecida. Há relatos de encontro na literatura em pacientes com cistite intersticial, dermatite atópica, psoríase e asma.

-Indivíduos sadios, tireoidite de Hashimoto, etc.

7. PADRÃO NUCLEAR PONTILHADO PONTOS ISOLADOS:

-Anticorpo anti-p80 coilina: sem associação clínica definida.

-Anticorpo anti-Sp100 – anti-p95: cirrose biliar primária.

8. PADRÃO NUCLEAR PONTILHADO CENTROMÉRICO:

-Anticorpo anticentrômero: esclerose sistêmica forma CREST, cirrose biliar primária e síndrome de Sjögren.

9. PADRÃO NUCLEAR PONTILHADO PLEOMÓRFICO:

-Anticorpo contra núcleo de células em proliferação (Anti-PCNA): LES.

10. PADRÃO NUCLEOLAR HOMOGÊNEO:

-Anticorpo Anti-To/Th: esclerose sistêmica.-Anticorpo antinucleolina: muito raro. Descrito no LES, doença enxerto versus hospedeiro e mononucleose infecciosa.-Anticorpo anti-B23 (nucleofosmina): esclerose sistêmica, alguns tipos de câncer, SAF e doença do enxerto versus hospedeiro.

11. PADRÃO NUCLEOLAR AGLOMERADO:

-Anticorpo antifibrilarina (U3-nRNP): esclerose sistêmica com hipertensão pulmonar.

12. PADRÃO NUCLEOLAR PONTILHADO:

-Anticorpo anti-NOR 90: esclerose sistêmica.

-Anticorpo anti-RNA polimerase 1: esclerose sistêmica forma difusa com comprometimento visceral mais frequente e grave.

-Anticorpo anti-ASE (anti-sense to ERCC-1): encontrado em associação a anti-NOR 90. LES.

13. PADRÃO CITOPLASMÁTICO FIBRILAR LINEAR:

-Anticorpo antiactina: hepatite autoimune e cirrose.

-Anticorpo antimiosina: hepatite C, hepatocarcinoma, miastenia gravis.

14. PADRÃO CITOPLASMÁTICO FIBRILAR FILAMENTAR:

-Anticorpo antivimentina e antiqueratina: doença hepática alcoólica, doenças inflamatórias e infeciosas.

15. PADRÃO CITOPLASMÁTICO FIBRILAR SEGMENTAR:

-Anticorpo antialfa-actinina, antivinculina e antitropomiosina: miastenia gravis, doença de Crohn e colite ulcerativa.

16. PADRÃO CITOPLASMÁTICO PONTILHADO POLAR:

-Anticorpo antigolginas: relatado em ataxia cerebelar idiopática, degeneração cerebelar paraneoplásica e infecções pelo EBV e HIV.

17. PADRÃO CITOPLASMÁTICO PONTILHADO PONTOS ISOLADOS:

-Anticorpo anti-EEA1 e antifosfatidilserina: sem associações clínicas definidas.

-Anticorpo anti-GWB: síndrome de Sjögren primária.

18. PADRÃO CITOPLASMÁTICO PONTILHADO FINO DENSO:

-Anticorpo anti-PL7/PL12: raramente na polimiosite.

-Anticorpo antiproteina P-ribossomal: LES.

19. PADRÃO CITOPLASMÁTICO PONTILHADO FINO:

-Anticorpo anti-histidil t RNA sintetase (Jo1): polimiosite e raramente dermatopolimiosite.

20. PADRÃO CITOPLASMÁTICO PONTILHADO RETICULADO:

-Anticorpo antimitocôndria: cirrose biliar primária e raramente esclerose sistêmica.

21. PADRÃO APARELHO MITÓTICO TIPO CENTRÍOLO:

-Anticorpo anti-alfa enolase: em altos títulos pode estar associado a esclerose sistêmica.

22. PADRÃO APARELHO MITÓTICO TIPO PONTE INTERCELULAR:

-Anticorpo antibeta-tubulina: LES e DMTC.

23. PADRÃO APARELHO MITÓTICO TIPO FUSO MITÓTICO (NuMa-2):

-Anticorpo anti-HsEg5/NuMa-2: associado a diversas condições autoimunes, sem especificidade.

24. PADRÃO MISTO DO TIPO NUCLEAR PONTILHADO FINO COM FLUORESCÊNCIA DO APARELHO MITÓTICO:

-Anticorpo anti-NuMa1: Síndrome de Sjögren.

25. PADRÃO MISTO DO TIPO NUCLEAR PONTILHADO GROSSO E NUCLEOLAR HOMOGÊNEO:

-Anticorpo anti-KU: superposição de polimiosite com esclerose sistêmica.

26. PADRÃO MISTO DO TIPO NUCLEAR E NUCLEOLAR PONTILHADO FINO COM PLACA METAFÁSICA CORADA:

-Anticorpo anti-DNA topoisomerase I (Scl-70): esclerose sistêmica forma difusa e mais raramente CREST.

27. PADRÃO MISTO DO TIPO NUCLEAR PONTILHADO FINO E NUCLEOLAR PONTILHADO:

-Anticorpo anti-RNA polimerase I: esclerose sistêmica-Anticorpo anti-RNA polimerase II: diversas condições autoimunes.Esses anticorpos aparecem em associação

28. PADRÃO MISTO DO TIPO CITOPLASMÁTICO PONTILHADO FINO DENSO E HOMOGÊNEO E NUCLEOLAR HOMOGÊNEO:

-Anticorpo anti-rRNP (antiproteína P ribossomal): LES com psicose lúpica e atividade da doença.

Esses padrões de imunofluorescência podem ser sugestivos, mas não são suficientes para diagnóstico da presença do anticorpo. Para se confirmar a presença de um dado autoanticorpo, são necessários testes mais específicos.

A vantagem do teste de imunofluorescênia é, portanto, a de permitir uma triagem!

LEMBRAR:

OBRIGADA!