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AS IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA FINGERPRINTING)

AS IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA “FINGERPRINTS”) · segmentos de DNA repetitivo localizados em muitos cromossomos. O padrão obtido consiste em aproximadamente 20 a 30 bandas

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Page 1: AS IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA (DNA “FINGERPRINTS”) · segmentos de DNA repetitivo localizados em muitos cromossomos. O padrão obtido consiste em aproximadamente 20 a 30 bandas

AS IMPRESSÕES

DIGITAIS DO DNA

(DNA FINGERPRINTING)

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IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA

(DNA FINGERPRINTS)

- O QUE SIGNIFICA? -

Com base no estudo de uma bateria de 12-20

microssatélites, é possível obter perfis genéticos

praticamente indivíduo-específicos, muito úteis na

investigação de paternidade, identificação de vítimas

e criminosos.

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IMPRESSÕES DIGITAIS DO DNA

(DNA FINGERPRINTS)

- TÉCNICAS -

RFLP (Restriction Fragment Lenght Polymorphism).

PCR (Polymerase Chain Reaction).

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RFLP

Polimorfismo de Comprimento de Fragmento de Restrição:

1) Coleta de amostras biológicas que podem ser saliva, sangue, esperma, cabelo, entre outros.

2) Extração e purificação do DNA.

3) Corte com enzimas de restrição (tesouras moleculares que reconhecem e cortam seqüências específicas do DNA).

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4) Eletroforese: onde, através de uma corrente elétrica, são separados os fragmentos de DNA por tamanho.

A partir daí, é formada uma espécie de código de barras que é a identificação individual e intransferível de cada

indivíduo.

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CORRIDA DO GEL

• Os fragmentos de DNA migram para o pólo positivo fragmentos menores () migram mais rápido, fragmentos maiores ()migram mais devagar.

-

+

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VISUALIZAÇÃO DO DNA

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5) Transferência para membrana de nylon

(southern blotting).

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6) Uso de sondas: pequenos segmentos de DNA radioativados, cuja seqüência de bases é conhecida. Acoplam-se às seqüências de DNA das quais são complementares, ligando-se às mesmas.

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SLP (single-locus probe) e MLP (multi-locus-probe).

SLP: detecta um único segmento de DNA repetitivo em um único cromossomo. Seu uso resulta em um padrão que contém no máximo duas bandas: uma para cada segmento de DNA reconhecido em cada membro do par de cromossomos homólogos. Para a obtenção de padrões mais característicos de cada pessoa, são necessárias várias sondas. Devido à sua sensibilidade, são empregadas nas investigações criminais.

MLP (multi-locus-probe): detectam vários segmentos de DNA repetitivo localizados em muitos cromossomos. O padrão obtido consiste em aproximadamente 20 a 30 bandas. Por isso, a probabilidade de duas pessoas tomadas ao acaso apresentarem todas as bandas exatamente com a mesma posição é extremamente baixa (1:10 trilhões).

TIPOS DE SONDAS

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RESULTADO DO TESTE

1- Análise forense: assassinato

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RESULTADO DO TESTE

2- Análise forense: estupro

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A simulação acima demonstra que,

biologicamente, há apenas um filho e

uma filha do casal.

No caso acima, a mãe não sabe

quem é o pai biológico.

3- Paternidade:

RESULTADO DO TESTE

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www.bioloja.com

PCR

Reação em Cadeia da Polimerase): permite que um fragmento específico da molécula de DNA seja amplificado milhares de vezes em apenas algumas horas.

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PCR – GEL DE

POLIACRILAMIDA

Eletroforese vertical

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ANÁLISE CRIMINAL: O DNA FORENSE

Estupro

Mary Higgins foi violentada no Central Park em Nova York. Três suspeitos foram presos. O exame de DNA revelou o verdadeiro agressor.

As evidências (sangue

do agressor e um fio de

cabelo) foram usadas

no teste para achar o

culpado.

O indivíduo 3 foi

condenado.

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ANÁLISE CRIMINAL: O DNA FORENSE

Estupro múltiplo

M. C. foi vítima de assalto e assassinato em sua própria casa. O laudo da Polícia Civil confirmou também que M. C. foi estuprada.

Peritos identificaram lesões vaginais e anais e recolheram amostras de secreção para analisar (E), bem como da vítima (V) e dos três suspeitos (S1, S2 e S3).

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UM CRIME (QUASE) PERFEITO.

Assassinato

Uma esposa desaparecida. Um marido desesperado. Ingredientes de uma trama quase perfeita para eliminar uma pessoa. Phillipe Landmeier tinha planejado tudo. Só não contava que oito anos depois o seu crime viria à tona.

Phillipe aguarda

a execução

desde 1995.

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O ASSASSINATO DA MODELO INFANTIL JONBENNET RAMSEY: UM CRIME SEM

SOLUÇÃO?

No dia seguinte ao Natal de 1996, JonBenet Ramsey (6 anos), supostamente seqüestrada, foi encontrada morta por estrangulamento e espancamento no porão de sua casa, em Boulder (Colorado):

principais suspeitos os pais, Patsy e John Ramsey:

inocentados pelo exame de DNA.

Mais de uma década após o assassinato e o caso

ainda parece inacabado: O professor John Mark Karr (41 anos) confessou

que drogou e estuprou JonBenet e acabou matando-a acidentalmente.

A autópsia não encontrou evidências de ingestão de drogas.

Foram encontradas feridas vaginais, mas não é certo que a menina tenha sido estuprada.

Os pais

John Mark Karr

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O ASSASSINATO DA MODELO INFANTIL

JONBENNET RAMSEY: UM CRIME AINDA

SEM SOLUÇÃO?

As promotoria do Colorado retirou as acusações contra Karr pelo assassinato da modelo infantil:

DNA do professor não corresponde ao do sangue encontrado na roupa íntima da vítima.

Suspeito de matar miss

mirim foi inocentado por

exame de DNA

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O ASSASSINO DE RODMAN DAM,

1987.

1987: casal de noivos – Matthew Brock e Kelly Lynn Perry (também estuprada) - é achado baleado na cabeça (bala de rifle calibre 30) em Rodman Dam, área de recreação na Flórida.

Principais suspeitos: os adolescentes Randall Scott Jones e Chris Reesh.