BiotecnologiaBiotecnologia

BioquímicaBioquímicaBiologia MolecularBiologia Molecular

Biotecnologia e Biotecnologia e doenças genéticasdoenças genéticas

Neoplasia maligna (cancro)

Em situação normal – Proliferação celular = a morte celular programada (apoptose)

Quando se rompe o equilíbrio – origina-se cancro

Proliferação celularProliferação celularAlteração da regulação por:

- Estimulação da divisão celular- Proto-oncogenes (inativos) por ação

de agentes mutagénicos transformam-se em oncogenes

- Deficiência do mecanismo que impede a divisão- Genes supressores tumorais

(normalmente estão ativos inibindo a divisão celular)

O cancro é sempre genético mas raramente é

hereditário

Técnicas Utilizadas pela Técnicas Utilizadas pela Engenharia GenéticaEngenharia Genética

Separação de genes específicos – utilização de enzimas de restrição

Enzimas de restriçãoEnzimas de restrição“Cortam” o DNA em zonas

específicas

Realiza a atividade do anexo II

DNA recombinanteDNA recombinantePermite criar novas combinações de material genético, capaz de ser herdado, a partir de moléculas de DNA que podem ser de origem diferente.

É necessário:- Enzimas de restrição- DNA ligase- Vetores (p.e. plasmídios)

Utilidade do DNA Utilidade do DNA recombinanterecombinanteProdução de

insulinaProdução de

vacinas sintéticas

Localização de genes responsáveis por algumas doenças genéticas

DNA complementarDNA complementar

Produção de uma cadeia de DNA a partir de mRNA maduro (sem intrões)

Porque se usa esta técnica na produção de insulina?

Polimerização em cadeia Polimerização em cadeia (PCR)(PCR)

Fases do processo:

- aquecimento do DNA para separar as duas cadeias;

- adição de nucleótidos e da enzima DNA polimerase para que a dupla hélice seja reconstruida a partir de cada uma das cadeias simples; 

- repetição do procedimento de modo a produzir cópias suficientes do DNA em estudo.

DNA fingerprintDNA fingerprint“Partem-se” as

cadeias de DNA com enzimas de restrição

Os diferentes fragmentos agrupam-se de acordo com o tamanho

São marcados radioativamente e sujeitos a eletroforese

Obtém-se um “código e barras”

Aplicações da técnicaAplicações da técnica