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    EXAME MICROBIOLOGICO DE ESCARRO E CULTURA DASECREO DO TRATO GENITAL

    CURSO: BACHARELADO EM FARMCIAMICROBIOLOGIA CLNICA

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    EXAME MICROBIOLGICO DE

    ESCARRO

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    ESCARRO

    O escarro composto de plasma, gua, eletrlitos e mucina;

    Composio qumica: 95% de gua e 5% de slidos totais

    (carboidratos, PTNs, lipdios e DNA);

    Grande parte das infeces so de origem bacteriana;

    Sob estmulo, seja ele inflamatrio ou imunolgico,mastcitos, eosinfilos e as clulas plasmticas podemcontribuir para a formao da secreo.

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    O que ? Exame microscpico da secreo proveniente dos

    pulmes, dos brnquios ou da traqueia.

    Para que serve?

    A anlise do escarro, espontneo ou induzido, possibilitainvestigar a presena de microorganismos (bactrias,vrus, fungos e etc) e de clulas malignas nos pulmes ebrnquios.

    EXAME DE ESCARRO

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    INSTRUES COLETA E TRANSPORTE DOESCARRO AO LABORATRIO

    Com o objetivo de melhorar a qualidade das amostras, opaciente deve ser orientado sobre como realizar uma coletaideal de escarro.

    Aorientao sobre a coleta do escarro busca mostrar aopaciente que o material deve ser proveniente da rvore

    brnquica e no da orofaringe.

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    MATERIAL NECESSRIO

    Potes plsticos, descartveis, com boca larga (50mm dedimetro), transparente, tampa de rosca (40mm), capacidadede 35 a 50 ml;

    Requisio de exame para TB;

    Rtulo (etiqueta ou fita adesiva);

    Papel higinico ou papel toalha;

    Saco plstico;

    Sabonete.

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    COLETA

    ORIENTAES AO PACIENTE

    1. Explicar a importncia do exame para o cliente utilizando termos clarose de fcil entendimento;

    2.Orientar a necessidade de seguir os passos da coleta, pois o materialpara exame de escarro deve ser proveniente da rvore brnquica e no daregio da orofaringe;

    3.Orientar a realizar a higiene bucal na vspera.(Sem Creme dental) 4.Fornecer ao cliente a orientao e simulao da tcnica de coleta,

    utilizando para isto o pote, aproveitando este momento para indicar aquantidade a ser colhida.

    5. Orientar o cliente a inspirar profundamente, retendo por alguns

    instantes o ar nos pulmes.

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    COLETAORIENTAES AO PACIENTE

    6. Aps inspirar profundamente, orientar o paciente a tossir e lanar omaterial diretamente no pote de coleta;

    7. Orientar o paciente a repetir o procedimento por trs vezes para atingira quantidade necessria (5 a 10ml).

    IMPORTANTE:

    A qualidade do material

    fornecido fundamental para oprocessamento e resultadosconfiveis do exame, deveconter a menor quantidade desaliva possvel. Informar o uso

    de antibiticos.

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    TRANSPORTE DE AMOSTRAS PARA O

    LABORATRIO

    Para o transporte de amostras, devemos considerar duascondies importantes:

    Proteo contra a luz solar;

    Acondicionamento adequado para que no haja risco dederramamento;

    Colocar os potes com as tampas bem fechadas e voltadas para

    cima;

    Colocar as requisies dos exames em um envelope ou sacoplstico, fora da caixa trmica ou de isopor.

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    Consistncia e aparncia depende, principalmente, da sua composio: soro,pus e muco. Em situaes patolgicas como: pneumonia e infarto pulmonar

    muito consistente e viscoso.

    Na clnica, denominam-se os tipos de escarro em relao a consistncia como:

    Escarro seroso (muito fluido, incolor ou esbranquiado); Purulento (abscesso)

    Mucopurulento; (pneumonia, broncopneumonia);

    Mucoso (gripes)

    Hemtico (nas hemorragias)

    Existe, tambm, o escarro numular, oriundo das cavernas tuberculosas e

    cavidades bronquiectsicas;

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    O EXAME MICROSCPICO

    feito a fresco ou aps a colorao do escarro e visa identificao decertas estruturas. ;Isola-se o material em uma lmina de Petri;

    As estruturas mais comuns so:

    Fibras Elsticas: originadas do tecido pulmonar - aparecem no abscesso,nas neoplasias casos de tuberculose mais avanada.

    - Espirais de Curschmann: so filamentos espirados - caracterstico na

    asma brnquica;- Cristais de CharcotLeyden: so cristais incolores, pontiagudos e emforma hexagonal - caracteriza a asma brnquica.

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    -Clulas Pigmentadas: so encontradas no escarro de pacientes que

    trabalham em carvoarias, fumantes ou portadores de antracose.

    - Glbulos de Mielina: so incolores e com tamanhos e formas variadas;no apresentam um significado clnico.

    -

    - Gros Actinomicticos: chamados tambm de gros de enxofre,Caracterstico no escarro de pacientes com actinomicose pulmonar(doena infecciosa rara, semelhante tuberculose).

    -

    - Parasitos: encontrar um parasita em uma amostra de escarro extremamente raro.

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    EXAME BACTEROLGICO

    Obter uma informao conclusiva torna-se rara - a dificuldade que seencontra em separar as pores provenientes das vias areas inferioresdaquelas que se originam na cavidade oral, nasofaringe e nos seio

    paranasais salvo quando o germe isolado o bacilo de Koch.

    Comum a contaminao com: diplococos Gram +, Neisseria catarrhalis,Streptococos sp. ou Str. Viridans, difterides, Hemophilis influenzae,staphilococos

    Os principais exames:Baciloscopia; em esfregao corado do material(exame direto);Cultura em diversos meios;

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    Lmina com esfregao corado pelo Gram orienta a teraputica antibitica

    contra germes Gram + ou Gram -.

    Lamina corada pelo Mtodo de Ziehl-Neelsen pesquisa de BARR praticadoem tres dias consecutivos ou 2 em dois dias at copletar 3 dias.

    Dever existir 100.000 bacilos cm3.Colorao em vermelhoClassificao( - ) negativo - ausencia( + ) positivo - menos de 1 p/ campo( ++ ) positivo - 1 a 10 p/ campo

    ( +++) + de 10 p/ campo

    Laminas Coradas por outros mtodos Azul-algodo, Giensa, e PAS.

    BACILOSCOPIA

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    CULTURA DE ESCARRO

    Demora 1 a 2 meses pelo mtodo tradicional ;

    Reduo do tempo pelo mtodo automatizado;

    A cultura um mtodo de elevada especificidade esensibilidade no diagnstico da TB;

    Nos casos pulmonares com baciloscopia negativa, a cultura

    do escarro pode aumentar em at 30% o diagnsticobacteriolgico da doena;

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    CULTURA DE ESCARRO

    Cultura simples - Meio agar-sangue p/ identificao do germen maisprovaavel.

    Cultura em Sabouraudidentificao de Fungos

    Cultura para bacilo de Koch feito com vrios meios de culturas especiais:( Loevenstein Jensen. Calmette, Gurrin, PetragnaniA e , PetragnaniB. E

    Exigido de 35 a 45 dias para dar resultados.

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    CULTURA DE ESCARRO

    A cultura para micobactria indicada nos seguintes casos:

    Suspeita clnica e/ou radiolgica de TB com baciloscopia repetidamentenegativa;

    Suspeitos de TB com amostras paucibacilares (poucos bacilos);

    Suspeitos de TB com dificuldades de obteno da amostra (por exemplocrianas);

    Suspeitos de TB extrapulmonar;

    Casos suspeitos de infeces causadas por Micobactrias no tuberculosas(MNT); (nestes casos o teste de sensibilidade pode ser feito com MIC).

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    O CULTIVO DAS MICOBACTRIAS

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    MICOBACTRIAS

    Mycobacterium

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    Cerca de 60 espcies, maioria saprfitas do solo;

    M. tuberculosis, M. bovis, M africanum: tuberculose;

    M. leprae: hansenase; nica no cultivvel emlaboratrio;

    Mycobacterium

    Gnero de actinobactrias altamente patognicas

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    PROPRIEDADES GERAIS

    - aerbias estritas, fracamente Gram-positivas, intracelulares

    - bastonetes, sem flagelos, no formam esporos

    - no produzem toxinas e no possuem cpsula

    - BAAR (bacilo alcoolacido resistente ) positivos: parede celular retm fucsina bsica

    Mtodo de colorao de Ziehl -

    Neelsen

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    Mtodo de Colorao de Ziehi-Neelsen:

    Soluo lcool cidoSoluo de Fucsina

    de Ziehi-Neelsen:

    Soluo azul de

    metileno

    Interpretao do

    resultado:

    Reao Positiva = Vermelha

    Reao Negativa = Azul

    CoranteDescorante Corante

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    TRATAMENTO

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    CULTURA DA SECREO DO

    TRATO GENITAL

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    PRINCPIO DO TESTE

    Isolar cepas de bactrias em meios ricos e suplementados.

    SIGNIFICADO CLNICO

    No trato genital feminino e masculino podem ocorrer diversas doenas, deetiologia bacteriana, fngicas, parasitrias e virais.

    A coleta adequada das amostras e seu processamento laboratorial sofundamentais para o correto diagnstico.

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    Coleta da amostra: Procedimento mdico especializado

    Tipos de amostra:Genital feminino:Vagina swab da vagina posterior ou

    parede vaginal.Crvix- swabdo canal endocervical.Uretra swab da secreo do canaluretral.Glndula de Bartholin aspirado comseringa.Lquido Aminitico - aspirado com seringa.Endomtrio aspirado transcervical.

    Trompa de Falpio aspirado ou swabobtido durante procedimento cirrgico.Leso Genitalswabdo lquido serosoobtido da base e das bordas da leso.DIU ( Dispositivo Intra Uterino)DIU ousecreo em tubo estril.

    Genital Masculino:Uretra swabda secreo da uretraanterior e/ ou urina de 1 jato (

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    MATERIAL REQUERIDO

    Estufabacteriolgica;Microscpio tico;Bico de Bunsen.Ala calibrada.

    Lminas.Jarra para tensode CO2 .Mscara.culos de segurana.

    Luvas de procedimento.Swab.Placa.Lamnulas.

    REAGENTES

    Placa de gar Sangue (AS)pronto para uso.Placa de Mac Conkey-pronto para uso.-Caldo Tioglicolado

    preparado.Soluo fisiolgica estril

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    Bacterioscopia:

    Exame direto colocar uma gota da amostra diluda em 2 mL desoluo fisiolgica sobre a lmina, cobrir com lamnula e observar nomicroscpio com objetiva de 40X.

    Gram deve ser realizado para toda as amostra um exame

    extremamente importante para o diagnstico de diversas infeces.( realizado caso o mdico solicite).

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    Semeadura e Isolamento:

    Semeadura:Semeadura das amostras colhidas em swab- Rolar o swabem uma pequenarea das placas AS e MC e colocar no Tioglicolato (opcional);Semeadura das amostras colhidas por puno;- Colocar primeiro uma gota da amostra em meio lquido (Tioglicolato) e, aseguir, uma gota nas placas de AS e MC, por ltimo, confeccionar um esfregao

    para o exame microscpico.-Iniciar a semeadura a partir do meio no-seletivo em trs direes diferentesretao:

    Ala de 1/100 1 colnia = 100 ou 1000 UFC/mL

    Temperatura e tempo de incubao

    -Aps a semeadura, incubar as placas AS e MC e o meio lquido, em estufaaerbia a 35 + 1C por at 48 horas, com leitura diria.

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    Microorganismo a serem sempre considerados na triagem deinfeces do trato genital feminino e masculino.

    Microorganismo Material Clnico

    Anaerbios Esperma, lquido

    Enterobactrias Aspirado de glndula de Bartholin, urina de 1jato, esperma, secreo prosttica

    Gardnerella vaginalis Secreo uretral, secreo vaginal

    Haemophilus ducreyi Leso genital

    Neisseria gonorrhoeae Qualquer material clnico genital

    Streptococcus agalactiae secreo vaginal, secreo uretral.

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    Resultado Negativo: no houve crescimento demicroorganismos.

    Resultado Positivo: reportar cada microorganismo isolado erealizar antibiograma.

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    OBRIGADO!!!