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Adriano Barbosa da Silva Licenciado em Ciências Biológicas Mestrando em Ciência Animal Tropical Contatos: 88105041 E-mail: [email protected] / [email protected] Análise Bacteriológica de Água Uninassau – PRONATEC – Técnico em Serviços de Restaurante e Bar

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Adriano Barbosa da Silva Licenciado em Ciências Biológicas

Mestrando em Ciência Animal Tropical Contatos: 88105041

E-mail: [email protected] / [email protected]

Análise Bacteriológica de Água Uninassau – PRONATEC – Técnico em Serviços de Restaurante e Bar

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Água Potável

Água para consumo humano

• Livre de microrganismos patogênicos

• Livre de bactérias indicadores de

contaminação fecal

• Coliformes fecais

• Escherichia coli

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Coliformes - características

• Bacilos

• Gram-negativos

• Aeróbios ou anaeróbios facultativos

• Fermentadores de lactose a 35-37°C

• Produzem ácido, gás e aldeído entre 24-48h

• Oxidase-negativos

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Coliformes – grupo de escolha para indicação de água

• Estão presentes nas fezes de animais de sangue quente, inclusive os seres

humanos;

• Sua presença na água possui uma relação direta com o grau de contaminação

fecal;

• São facilmente detectáveis e quantificáveis por técnicas simples e

economicamente viáveis, em qualquer tipo de água;

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Coliformes – grupo de escolha para indicação de água

• Possuem maior tempo de vida na água que as bactérias patogênicas

intestinais, por serem menos exigentes em termos nutricionais, além de ser

incapazes de se multiplicarem no ambiente aquático;

• São mais resistentes à ação dos agentes desinfetantes do que os germes

patogênicos

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Etapas da coleta de água para análise microbiológica

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Parâmetros de Avaliação Microbiológica da Água

A Portaria nº 518/2004 do Ministério da Saúde estabelece que

sejam determinados, na água, para aferição de sua potabilidade, a

presença de coliformes totais e termotolerantes de preferência

Escherichia coli e a contagem de bactérias heterotróficas.

A mesma portaria recomenda que a contagem padrão de bactérias

não deve exceder a 500 Unidades Formadoras de Colônias por 1

mililitro de amostra (500/UFC/ml).

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Método dos Tubos Múltiplos

A técnica dos tubos múltiplos é um método

probabilístico. A partir dela é possível determinar o

Número Mais Provável de bactérias do grupo coliforme

em 100 ml de água (NMP/100 ml).

O NMP visa estimar a densidade de microrganismos

presente na amostra de água ou alimentos baseado na

frequência de resultados positivos.

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Termos Utilizados

• Enterobactérias - bacilos Gram-negativos isolados no

trato gastrointestinal de humanos e animais, solo,

águas e plantas. São oxidase negativa, não esporuladas

e reduzem nitrato a nitrito. Fermentam lactose e

produzem gás;

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Termos Utilizados

• Coliformes totais - indicadores de contaminação

pertencentes a família Enterobacteriaceae. Os gêneros

são: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter e Citrobacter. Estas

últimas são normalmente de origem ambiental.

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Termos Utilizados

• Coliformes totais - indicadores de contaminação

pertencentes a família Enterobacteriaceae. Os gêneros

são: Escherichia, Klebsiella, Enterobacter e Citrobacter. Estas

últimas são normalmente de origem ambiental;

• Coliformes termotolerantes ou fecais - indicadores de

contaminação fecal. Toleram altas temperaturas (até

44,5°C);

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Materiais

Meios de cultura - para o cultivo artificial dos microrganismos.

• Para a primeira fase (presuntiva) utilizamos o caldo

lactosado, que é um meio de enriquecimento. O caldo

lactosado, como seu próprio nome diz, oferece lactose à

bactéria. Como sabemos, os coliformes pertencem

às enterobactérias, microrganismos fermentadores de

lactose.

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Materiais

Meios de cultura - para o cultivo artificial dos microrganismos.

• Para a primeira fase (presuntiva) utilizamos o caldo

lactosado, que é um meio de enriquecimento. O caldo

lactosado, como seu próprio nome diz, oferece lactose à

bactéria. Como sabemos, os coliformes pertencem

às enterobactérias, microrganismos fermentadores de

lactose;

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Caldo Lactosado

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Materiais

Meios de cultura - para o cultivo artificial dos microrganismos.

• Na etapa confirmatória o meio utilizado é o caldo

lactosado verde brilhante bile de boi 2%. O objetivo

deste caldo é mimetizar as condições intestinais,

fornecendo determinada concentração de sais biliares.

Estes sais provocam certa pressão osmótica, "matando"

qualquer bactéria que não esteja habilitada a viver no

intestino - em outras palavras, somente os coliformes

totais sobrevivem;

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Caldo Lactosado Verde Brilhante Bile de Boi 2%

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Materiais

Meios de cultura - para o cultivo artificial dos microrganismos.

• Para a pesquisa de termotolerantes é necessário o

caldo EC, que também é um meio seletivo, somente

permitindo o crescimento das bactérias de origem fecal

que sobrevivem a 44,5°C;

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