Protocolo de Extração DNA de Saliva Em Swab

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  • 8/15/2019 Protocolo de Extração DNA de Saliva Em Swab

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    EXTRAÇÃO DNA DE SALIVA EM SWAB (MÉTODO COM CHELEX 100)

    DIANA RIBEIRO DIAS - 201211150016

    INTRODUÇÃO

    A saliva pode ser utilizada como fonte eficiente de DNA para técnicas de

    identificação umana! as "uais são aceitas como prova le#al! sendo o parecer do

     profissional superlativo para a formulação da sentença$ %sse material pode ser coletado

    de maneira indolor e não invasiva e utilizado mesmo "uando armazenado em diferentes

    condiç&es$

    O'(%TI)O

    O o*+etivo da aula pr,tica foi aprender a técnica de e-tração DNA de salina em

    ./A' pelo método com 01%2%3 455$

    6AT%RIAI.

    • 0ele- 455• 7#ua estéril• 8roteinase 9 :45m#;ml

    • 0ele- p?v@ em ,#ua estéril

    8RO0%DI6%NTO

    oram analisado B amostras de saliva dos alunos? onde utilizaram o sCa* na

     *oca de cada um? fazendo movimentos onde a saliva pudesse se fi-ar no sCa*$

    8osteriormente transferiram o sCa* para um tu*o de ?5ml e foi adicionado 4 ml de

    ,#ua estéril$

    2o#o a Temperatura;Tempo de incu*açãoE TA por B5 minutos para soltar asfi*ras do sCa* dentro do tu*o? misturando por dois minutos para soltar as células? para

    remover o sCa* do tu*o$ oi levado para centrifu#ar por B minutos a 4555 rpm e

    descartar FG< Hl da solução$

    oi Ressuspendido o  pellet  com a pipeta nestes < Hl de solução e adicionaram

    55 Hl de 0ele-

  • 8/15/2019 Protocolo de Extração DNA de Saliva Em Swab

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    Lminutos >e-atos@ e levaram para o vKrte- por < a 45 se#undos e foi para centrifu#ar por 

    B minutos a 4555rpm$ 8or fim o DNA e-traMdo$

    O*servaç&esE O DNA pode ser armazenado por 4 dia no refri#erador ou

    con#elado >:4