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8/15/2019 Protocolo de Extração DNA de Saliva Em Swab
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EXTRAÇÃO DNA DE SALIVA EM SWAB (MÉTODO COM CHELEX 100)
DIANA RIBEIRO DIAS - 201211150016
INTRODUÇÃO
A saliva pode ser utilizada como fonte eficiente de DNA para técnicas de
identificação umana! as "uais são aceitas como prova le#al! sendo o parecer do
profissional superlativo para a formulação da sentença$ %sse material pode ser coletado
de maneira indolor e não invasiva e utilizado mesmo "uando armazenado em diferentes
condiç&es$
O'(%TI)O
O o*+etivo da aula pr,tica foi aprender a técnica de e-tração DNA de salina em
./A' pelo método com 01%2%3 455$
6AT%RIAI.
• 0ele- 455• 7#ua estéril• 8roteinase 9 :45m#;ml
• 0ele- p?v@ em ,#ua estéril
8RO0%DI6%NTO
oram analisado B amostras de saliva dos alunos? onde utilizaram o sCa* na
*oca de cada um? fazendo movimentos onde a saliva pudesse se fi-ar no sCa*$
8osteriormente transferiram o sCa* para um tu*o de ?5ml e foi adicionado 4 ml de
,#ua estéril$
2o#o a Temperatura;Tempo de incu*açãoE TA por B5 minutos para soltar asfi*ras do sCa* dentro do tu*o? misturando por dois minutos para soltar as células? para
remover o sCa* do tu*o$ oi levado para centrifu#ar por B minutos a 4555 rpm e
descartar FG< Hl da solução$
oi Ressuspendido o pellet com a pipeta nestes < Hl de solução e adicionaram
55 Hl de 0ele-
8/15/2019 Protocolo de Extração DNA de Saliva Em Swab
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Lminutos >e-atos@ e levaram para o vKrte- por < a 45 se#undos e foi para centrifu#ar por
B minutos a 4555rpm$ 8or fim o DNA e-traMdo$
O*servaç&esE O DNA pode ser armazenado por 4 dia no refri#erador ou
con#elado >:4