1
RESULTADOS ESTUDO, IN VITRO, DA INTERAÇÃO DE PROTEÍNAS SALIVARES E LEITE DE SOJA POR MÉTODO DE CROSS-LINKING MATERIAIS e MÉTODOS Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Setor de Ciências de Saúde da UFPR (0070.0.091.000-08). Amostras de saliva em repouso e de bebida a base de soja (ADES Original) foram coletadas. A concentração de proteínas das amostras foi determinada e as reações de cross-linking, in vitro, foram realizadas misturando a saliva à bebida a base de soja e adicionando à esta mistura: Tampão Fosfato 50mM (pH 8,0) + Glutaraldeído (0,05% - 0,2%), durante 10, 20, 40 ou 60 segundos (a 37 o C); as reações foram interrompidas pela adição de Tris HCl 0,1M (pH 8,0). A análise da interação das proteínas da saliva e leite de soja foi realizada através de gel de eletroforese SDS-PAGE 10%. CONCLUSÕES Os resultados sugerem que nas condições testadas as proteínas presentes nas bebidas a base de soja não interagem com as proteínas da saliva. Outros experimentos serão conduzidos para avaliar os resultados obtidos com 0,2% de glutaraldeído. OBJETIVOS O objetivo deste trabalho foi verificar se as proteínas da saliva interagem com proteínas de bebidas a base de soja (leite de soja) através de reação de cross-linking, in vitro. INTRODUÇÃO As proteínas salivares adsorvem a superfície dental formando um filme chamado de película dental adquirida. Alguns estudos mostram que a dieta interfere na composição desta película podendo modificar o seu papel fisiológico. [email protected] 97.0 66.0 45.0 30.0 20.1 14.4 97.0 66.0 45.0 30.0 20.1 14.4 Este trabalho pode também ser visualizado através do endereço www.pgodonto.ufpr.br FIG. 01Cross-linking Saliva + ADES Original, (10μg totais de proteínas). Gel SDS-PAGE 10%. Coloração com Prata. Linha 1 Saliva; Linha 2 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,05% _ 10 segundos; Linha 3 Reação de cross-linking Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído 0,1% _ 10 segundos; Linha 4 Reação de cross-linking Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído 0,2% _ 10 segundos; Linha 5 Saliva + ADES Originalsem cross-linking; Linha 6 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,05% _ 20 segundos; Linha 7 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,1% _ 20 segundos; Linha 8 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,2% _ 20 segundos; Linha 9 Ades Original. Linha 10 - Marcador LMW-SDS (GE Healthcare) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 FIG. 02Cross-linking Saliva + ADES Original (10μg totais de proteínas). Gel SDS-PAGE 10%. Coloração com Prata. Linha 1 Saliva; Linha 2 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,05% _ 40 segundos; Linha 3 Reação de cross-linking Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído 0,1% _ 40 segundos; Linha 4 Reação de cross-linking Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído 0,2% _ 40 segundos; Linha 5 Saliva + ADES Originalsem cross-linking; Linha 6 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,05% _ 60 segundos; Linha 7 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,1% _ 60 segundos; Linha 8 Reação de cross-linking: Saliva + ADES OriginalGlutaraldeído0,2% _ 60 segundos; Linha 9 Ades Original. Linha 10 - Marcador LMW-SDS (GE Healthcare) Otto WB 1 , Fraiz FC 2 , Benelli EM 2 1 Aluna do PPG em Odontologia; 2 Professor UFPR Programa de Pós-Graduação em Odontologia - Universidade Federal do Paraná 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

ESTUDO, IN VITRO, DA INTERAÇÃO DE PROTEÍNAS … · Linha 4 –Reação de cross-linking Saliva + ADES Original–Glutaraldeído 0,2% _ 40 segundos; Linha 5 –Saliva + ADES Original

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: ESTUDO, IN VITRO, DA INTERAÇÃO DE PROTEÍNAS … · Linha 4 –Reação de cross-linking Saliva + ADES Original–Glutaraldeído 0,2% _ 40 segundos; Linha 5 –Saliva + ADES Original

RESULTADOS

ESTUDO, IN VITRO, DA INTERAÇÃO DE PROTEÍNAS SALIVARES E LEITE DE SOJA POR MÉTODO DE CROSS-LINKING

MATERIAIS e MÉTODOS

Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa do Setor de Ciências de Saúde da UFPR (0070.0.091.000-08).

Amostras de saliva em repouso e de bebida a base de soja (ADES Original) foram coletadas.

A concentração de proteínas das amostras foi determinada e as reações de cross-linking, in vitro, foram realizadas misturando a

saliva à bebida a base de soja e adicionando à esta mistura: Tampão Fosfato 50mM (pH 8,0) + Glutaraldeído (0,05% - 0,2%), durante

10, 20, 40 ou 60 segundos (a 37oC); as reações foram interrompidas pela adição de Tris HCl 0,1M (pH 8,0).

A análise da interação das proteínas da saliva e leite de soja foi realizada através de gel de eletroforese SDS-PAGE 10%.

CONCLUSÕES

Os resultados sugerem que nas condições testadas as proteínas presentes nas bebidas a base de soja não interagem com as proteínas

da saliva.

Outros experimentos serão conduzidos para avaliar os resultados obtidos com 0,2% de glutaraldeído.

OBJETIVOS

O objetivo deste trabalho foi verificar se as proteínas da

saliva interagem com proteínas de bebidas a base de soja (leite

de soja) através de reação de cross-linking, in vitro.

INTRODUÇÃO

As proteínas salivares adsorvem a superfície dental formando

um filme chamado de película dental adquirida. Alguns estudos

mostram que a dieta interfere na composição desta película

podendo modificar o seu papel fisiológico.

[email protected]

97.0

66.0

45.0

30.0

20.1

14.4

97.0

66.0

45.0

30.0

20.1

14.4

Este trabalho pode também ser visualizado através do endereço www.pgodonto.ufpr.br

FIG. 01– Cross-linking Saliva + ADES Original, (10µg totais de proteínas). Gel SDS-PAGE 10%.

Coloração com Prata.

Linha 1 – Saliva;

Linha 2 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,05% _ 10 segundos;

Linha 3 – Reação de cross-linking Saliva + ADES Original– Glutaraldeído 0,1% _ 10 segundos;

Linha 4 – Reação de cross-linking Saliva + ADES Original– Glutaraldeído 0,2% _ 10 segundos;

Linha 5 – Saliva + ADES Original– sem cross-linking;

Linha 6 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,05% _ 20 segundos;

Linha 7 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,1% _ 20 segundos;

Linha 8 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,2% _ 20 segundos;

Linha 9 – Ades Original.

Linha 10 - Marcador LMW-SDS (GE Healthcare)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

FIG. 02– Cross-linking Saliva + ADES Original (10µg totais de proteínas). Gel SDS-PAGE 10%.

Coloração com Prata.

Linha 1 – Saliva;

Linha 2 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,05% _ 40 segundos;

Linha 3 – Reação de cross-linking Saliva + ADES Original– Glutaraldeído 0,1% _ 40 segundos;

Linha 4 – Reação de cross-linking Saliva + ADES Original– Glutaraldeído 0,2% _ 40 segundos;

Linha 5 – Saliva + ADES Original– sem cross-linking;

Linha 6 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,05% _ 60 segundos;

Linha 7 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,1% _ 60 segundos;

Linha 8 – Reação de cross-linking: Saliva + ADES Original– Glutaraldeído0,2% _ 60 segundos;

Linha 9 – Ades Original.

Linha 10 - Marcador LMW-SDS (GE Healthcare)

Otto WB 1 , Fraiz FC 2, Benelli EM2

1 Aluna do PPG em Odontologia; 2 Professor UFPRPrograma de Pós-Graduação em Odontologia - Universidade Federal do Paraná

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10