IntroduçãoEscherichia coli

• Bacilo Gram-negativo

• Família Enterobacteriaceae

• Uma das mais antigas bactérias simbiontes do homem e dos animais– Microbiota intestinal

• Inofensiva...?

Introdução E. coli e saúde pública

• Patogenicidade– Oportunistas– Estirpes diferentes*

• Índice de coliformes

termotolerantes na

água

• Diarréia do turista

Introdução E. coli – principais grupos patogênicos

• EPEC (E.coli enteropatogênica)*– Causam diarréias não sanguinolentas – Primeiros estudos epidemiológicos 1920 e 1930

• ETEC ( E.coli enterotoxigênica):– Diarréia do turista,

• EIEC (E.coli enteroinvasiva):– Úlceras e inflamação da mucosa intestinal

• EAEC (E.coli enteroagregativa):– semelhantes às da ETEC".

• STEC (E. coli produtora de toxina Shiga)* – Sindrome Hemolítica urêmica

Introdução Caracteristicas Clínicas e Epidemiológicas

• Reservatório – Animais de sangue quente

• Período de incubação – Nove a dez horas (adultos)

• Modo de transmissão – fecal-oral;

• mãos, • objetos e alimentos (carne crua) contaminados com fezes.

• Susceptibilidade e resistência – afeta crianças em período de desmame,

• Diagnóstico – Sorologia

• Tratamento – Terapia de hidratação – Nos casos severos podem ser administrados antibióticos– Não usar antibiótico para o tratamento das STEC.

Introdução Uso de Antibióticos

• Antibióticos mais utilizados no tratamento das diarréias causadas por E. coli – Penicilina– Cefalosporinas– Quinolonas– Estreptomicina– Ácido nalidixico– Ampicilina– Cefalotina– Ciprofloxacina– Gentamicina– Levofloxacina– Nitrofurantoina – Sulfazotrim*

Objetivos

• Patógeno emergente

• Difícil tratamento

• Perfil dos antibióticos

• Antibióticos na produção animal– Benefícios?

Metodologia

• Coleta das amostras no frigorífico– Antes da oclusão do reto

– Swabs estéreis– Aleatória

• Tocantins

• Pará

Metodologia• Semeadura em ágar McConkey

– Foram avaliadas 20 amostras*– Semeadura por estrias– Escolha de 5 colônias isoladas

• Testes bioquímicos:- “Triple Sugar Iron” (TSI)- Teste do Citrato de Simons

Metodologia

• Ágar sangue base

Metodologia

• Sorologia– Soros polivalentes Probac®

• Polivalente A

• Polivalente B

• Polivalente C• Monovalente O157

Metodologia

• Antibiograma– Inoculação em caldo BHI

– Semeadura em ágar Mueller Hinton– Técnica de difusão de discos

Metodologia

• Antibióticos testados:– Amoxiciclina +

ácido clavulânico – Amicacina – Ampicilina– Aztreonam– Cefaclor – Cefalotina– Cefalexina– Cefazolina– Ciprofloxacina– Clorafenicol– Eritromicina– Estreptomicina

‾ Gentamicina‾ Imipenem‾ Lomefloxacina‾ Levofloxacina‾ Meropenem‾ Ácido nalidíxico‾ Nitrofurantoína‾ Norfloxacina‾ Penicilina‾ Ácido pipemídico‾ Sulfazotrim ‾ Tetraciclina

Resultados e Discussão

– Escolha de 5 colônias isoladas no MacConkey– Lactose positivas– Morfologia das colônias:

• róseo-avermelhada• pequenas a médias• arredondadas e opacas

• Testes bioquímicos– Citrato

• Negativas

– “Triple-Sugar-Iron” (TSI)• Ácido• Formação de gás

• Sem produção de

ácido sulfídrico

Resultados e Discussão

Resultados e Discussão

Resultados e Discussão

• Das 71 amostras testadas (235 cepas)

– 42 cepas positivas para EPEC

– Nenhuma positiva para O157:H7

Resultados e Discussão• Dos 24 antibióticos

testados...– 100% de resistência:

• Eritromicina• Penicilina• Ácido pipemídico

– Apresentaram maior resistência:

• Gentamicina (75%)• Cefalotina (65%)• Estreptomicina (51%)• Amicacina (47,5%)• Lomefloxacina (43%)• Cefaclor (31%)

Resultados e Discussão – Perfil de resistência

x

Gentamicina (75%)

Cefalotina (65%)

Estreptomicina (51%)

Amicacina (47,5%)

• 72% de Cepas multirresistentes (RANGEL & MARIN, 2009)

• 22% de Cepas sensíveis a todos os ATBs (RANGEL & MARIN, 2009)

Resultados e Discussão – Perfil de resistência

Resultados

• Colônias resistentes• Presentes em 32 cepas

– Cefaclor

– Cefazolina

– Amicacina

– Ampicilina

– Aztreonam

– Cefalexina

– Clorafenicol

– Nitrofurantoína

– Norfloxacin

– Ácido Pipemídico

– Sulfazotrim

Resultados

• Maior sensibilidade– Imipenem

– Meropenem – Levofloxacina

Resultados e Discussão – Perfil de sensibilidade

Resultados e Discussão

• 100% das amostras EPEC são multirresistentes• Nenhum dos fármacos testados obteve 100% de

sensibilidade

Resultados e Discussão

Por quê?!

Discussão

• Larga utilização de antibióticos na produção animal– Combate à doenças

– Controle

– Prevenção

– Crescimento

– Prescrição indiscriminada

Causam...Causam...

Discussão

• Produção de enzimas que destroem o fármaco ativo

• Alvo estrutural alterado para o fármaco

• Via metabólica alternativa, – Se desvia da reação inibida

• Elaboração de uma enzima modificada

– Desempenha sua função metabólica

– Menos afetada pelo fármaco

Conclusão

Existem alternativas de tratamento para E. coli enteropatogênica

A resistência vem aumentando com o passar do tempo

Necessário o uso consciente dos antibióticos.

Obrigada ^_^