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Sónia Mendo
Conceitos/conhecimentos chave a apreender
� Mecanismo de actuação de antimicrobianos (antibacterianos, antifungicos e antivíricos)
� Metodologias de determinação da actividade dos antimicrobianos (determinação de MIC e MLC; kirby Bauer)
� Mecanismos de resistência a antimicrobianos naturais e adquiridos(elementos genéticos móveis: plasmídeos, transposões e integrões)
� Interferões
Sónia Mendo
CONTROLO DO CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS
• Antibacterianos
• Antifúngicos
• Antivíricos
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AGENTES ANTIMICROBIANOS UTILIZADOS IN VIVO
. Sintéticos
. Semisintéticos
. Antibióticos (naturalmente produzidos)
Agentes quimioterapêuticos:
. Estrutura
. Mecanismo de acção
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CARACTERÍSTICAS GERAIS DOS COMPOSTOS ANTIMICROBIANOS
� Toxicidade selectiva (dose terapêutica, toxicidade)� Índice terapêutico (ex: sulfonamidas, penicilinas)� Espectro de acção (alargado ou restrito)� A maioria são sintetizados por microrganismos (bactérias e fungos), alguns são sintéticos e outros são semi- sintéticos� Causam a morte dos MO ou inibem o seu crescimento� A sua eficácia é determinada pela MIC e pela MLC
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Vibrio cholerae
ANTIBACTERIANOS
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DNA girase
Subunidades
30S* e 50S**
**
**
SULFONAMIDAInibidor da síntese
do ácido fólico
Outros: Análogos de factores de crescimento (Fluorouracil, bromouracil)
Síntese do petidoglucano
ALVOS DOS ANTIBIÓTICOS
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MECANISMO DE ACÇÃO DOS AGENTES ANTIMICROBIANOS
� Inibição da síntese proteica
� Inibição de ácidos nucleícos
� Inibição da síntese da parede celular
� Disrupção da membrana celular
� Antagonismo metabólico (inibição competitiva do uso de metabolitos por enzimas- enzimas têm uma maior
afinidade para o antibiótico )
Sónia Mendo
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Sónia Mendo
� Inibição da síntese proteica
- iniciação da cadeia (estreptomicina)- elongação (cloramfenicol; ciclohexamida; puromicina)
Eficaz em Eukarya
Eficaz em Bacterias
Actua também na síntese proteica de mitocondrias e cloroplastos
Liga-se ao local A do ribossoma. Ocorre libertaçãodo péptido
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� Inibição da síntese de RNA
Actinomicina: combina-se com o DNA bloqueando a elongação do RNA
� Inibição da síntese da parede celular: penicilinas e cefalosporinas
Anel dihidrotiazina
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� Mecanismo de Inibição da síntese da parede celular pela Penicilina
� Penicilina liga-se às PBP´s ( transpeptidases); actividade das
autolisinas exacerbada
� Ausência de síntese de nova parede
� Actividade das autolisinas exacerbada
� Ocorre lise da célula
Sónia Mendo
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Sónia Mendo
� Penicilinas semisintéticas (resistentes às β-lactamases)
ampicilina
oxacilina
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� Antibióticos sintetizados por procariotas (actuam a nível da síntese proteica)
Aminoglicosídicos: açucares aminados; e.g. Estreptomicina; activo emGram negativas; no passado usada para tratar tuberculose
Macrólidos: grandes anéis de lactonas ligados a açucares; e.g. eritromicina Usado como alternativa a β-lactâmicos
Tetraciclinas: anéis de naftaceno que podem ser substituídos em várias posições para formar novas tetraciclinas (Cl;OH); 1ºs ant. de largo espectro
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DETERMINAÇÃO DA ACTIVIDADE DE UM COMPOSTO ANTIMICROBIANO
� Método da diluição(em tubo ou em microplacas)
� Método dos discos
� Método de Kirby- Bauer
Influência de diversos factores:
. Concentração do MO
. Altura e concentração de agar
.Tempo de difusão
.Temperatura de incubação
Sónia Mendo
Sónia Mendo
Método dos discos
E-teste
Sónia Mendo
Método de Kirby- Bauer
Sónia Mendo
Método de Kirby- Bauer
Diâmetro da zona de inibição (mm)
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sensível
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7
12 17
Quanto > a sensibilidade do MO ao antibiótico, < a MIC e >a zona de inibição
Sónia Mendo
FACTORES QUE AFECTAM A EFICÁCIA DE UM AGENTE ANTIMICROBIANO
� O composto deve atingir o local alvo
� Susceptibilidade do MO ao composto
� Administração do composto a uma concentração superior à MIC
� Resistência por parte do MO
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. Resistência natural por parte do microrganismo(e.g. Gram –; vanR)
. MO podem tornar-se resistentes a um determinado composto por mutações espontâneas que posteriormente são seleccionadas.
. MO pode aquirir determinantes genéticos de resistência
MECANISMOS DE RESISTÊNCIA A ANTIMICROBIANOS
RESISTÊNCIANATURALIntrínseca
ADQUIRIDA
Sónia Mendo
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Sónia Mendo
MECANISMOS DE RESISTÊNCIA BACTERIANA
� Bloqueio da entrada do composto- PBP
� Composto bombeado para fora da célula- Bombas de efluxo
� Inactivação do composto por modificação química(ex: quebra do anel �-lactâmico por penicilases)
� Modificação do alvo do composto seja ele uma enzima ou um organelo
� Uso de vias alternativas
Sónia Mendo
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• BLOQUEIO DA ENTRADA DO COMPOSTO- acilação das PBPque se tornam não funcionais;
Sónia Mendo
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