Amostras utilizadas em Imunoensaios

Profa. Alessandra PardiniDisciplina: Imunologia Clínica

INTRODUÇÃO

- A validação dos imunoensaios é feita com base nos parâmetros de sensibilidade, especificidade, repetitividade, reprodutibilidade e estabilidade

- Problemas no imunoensaio = nova amostra = problema desaparece

- Os imunoensaios são objeto de padronização e normatização- Controle de Qualidade – pré analítico

PREPARO E INSTRUÇÕES AO PACIENTE

FATORES INERENTES AO PACIENTE:

Idade

Sexo

Etnia

Gravidez

Período de Ciclo Menstrual

Uso de medicamentos (anticoncepcional,

vitaminas, etc)

JEJUM

Não tem muita importância para Imunoensaios.

No entanto, concentração excessiva de lipídios pode interferir

em teste de imunoprecipitação e aglutinação.

Evitar coletar amostras até 2h após refeição (almoço, janta) –

pós-prandial.

Recomendável jejum padrão de 8h se for realizar também

outros exames.

Jejum de 4h, se somente for realizar exames de imunoensaios.

Beber água não invalida o jejum.

Evitar álcool, fumo (afeta os hormônios)

GRAVIDEZ

Geralmente ocorre resultados

falso-positivos devido mudanças hormonais e protéicos como

aumento de hCG, lactogênio, cortisol e hormônios tireoidianos.

Perguntar a data da última menstruação e a semana

gestacional, principalmente na determinação de hormônios.

EXERCÍCIO

Exercícios com perda de água e suor

alteram a concentração de parâmetros

bioquímicos e hormônios.

Fazer 30 minutos de repouso no

laboratório antes da coleta.

IDADE

Importante na determinação de hormônios, proteínas e

substâncias do metabolismo bioquímico.

CICLO MENSTRUAL E RITMO CIRCADIANO

Deve conter no laudo o dia do ciclo

menstrual.

Cortisol é o parâmetro mais afetado ao

longo do dia. Preconiza-se coletar entre 7:00 e

9:00h da manhã.

Laboratório de Análises Clínicas

Finalidades:Verificar estágios da condição biológica humanaVerificar ausência de patologias, como parte de algoritmos

médicosex.: Diabetes Mellitus (adulto)Estabelecer diagnósticosFornecer informações para diagnóstico e acompanhamento

de patologias agudas e crônicas

COLETA DE SANGUE

O tipo de amostra para cada analito é definido por protocolos

internacionais.

Evitar hemoconcetração: não deixar o torniquete por mais de

1minuto.

Evitar hemólise: ruptura de hemácias.

Coleta em tubo seco ou gel, e anticoagulantes (citrato,

heparina, EDTA e inibidor de glicose).

AMOSTRAS

COLETA -É o primeiro passo para TODAS as análises efetuadas no Laboratório Clínico

-Todas as etapas seguintes dependem da coleta do material

- É importante que o procedimento apropriado (indicado) seja seguido = para obtenção de resultados exatos

- Utilizar material completamente limpo para evitar falsos resultados

OBTENÇÃO DE SORO OU PLASMA

É necessário certo tempo para formação do coágulo e

retração ideal.

Não é aconselhável refrigerar a amostra.

Após centrifugação, obtêm o soro ou plasma.

OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS

URINA Determinação hormonal ou de drogas

Líquido Cefalorraquidiano (LCR) Pesquisa de antígenos bacterianos, virais e parasitários Pesquisa de Ac

LÍQUIDO AMNIÓTICO Amniocentese procedimento para obtenção de líquido após 16ª. Semana de gestação. Não deve conter sangue. Pesquisar presença de patógenos.

OUTROS ESPÉCIMES BIOLÓGICOS USADOS NOS IMUNOENSAIOS

FEZES Pesquisar a presença de antígenos

SALIVA Determinação de hormônios livres: cortisol, progesterona, estradiol e testosterona; e as drogas teofilina, digoxina e diazepam.

SÉMEN Pesquisa de anticorpos antiespermatozóides. Manter 3 dias de abstinência sexual. Após ejaculação aguardar 30 min, e usar o material em até 2h

Agradecimento:Profa. Adriana Di Brito, pelo material gentilmente cedido

Bibliografia:VAZ et al., Imunoensaios – Fundamentos e Aplicações, Guanabara Koogan,

2007.

Internet:Pesquisa na internet agosto de 2011Cruz, CF, LACEN/PR