Profa Alessandra Pardini

ANTICORPOS (Ac) ou IMUNOGLOBULINAS (Ig)

Linfócitos B- maturação na medula – fibronectina- produzem e secretam Ig em grandes

concentrações- receptor de membrana - IgD

Anticorpos (Ac) ou Imunoglobulinas (Ig)

- São moléculas com receptores específicos para o mesmo antígeno que estimulou a sua síntese, e apresentam a mesma estrutura básica:

- Porção Fab (fragment antigen binding): liga-se ao antígeno e varia segundo a especificidade de cada ly B.

- Porção Fc (fragment crystalizable): interage comcélulas, principalmente fagócitos, através de receptores Fc ou ativa o complemento.

Constituição básica IgG:- duas cadeias polipeptídicas leves (L) e duas pesadas (H) idênticas - cadeias H (pesadas): existem 5 tipos, cada uma dando origem a uma classe de imunoglobulina (IgG, A, M, D,

E)- Cadeia Leve (L light)- Porção amino terminal- Porção carboxi terminal

- porção amino terminal: variabilidade de aminoácidos região variável (VH e VL) / região hipervariável, onde se encontra

o sítio combinatório - restante da cadeia é constante região constante (CH e CL) H e L ligadas através de pontes dissulfídicas, na região V e C aproximam os aminoácidos formando dobramentos chamados de domínios (ligações dissulfídicas – ligação SS

intracadeia) onde: C=constante e V=variável

Digestão pela papaína:Dois fragmentos idênticos Fab (fragmento que se combina com o antígeno – (fragment antigen binding) e um fragmento que não se liga ao antígeno Fc (fragmento cristalizável)

Digestão pela pepsina: Fragmento (Fab’)2 interage com células, principalmente fagócitos, através de receptores Fc ou ativa o complemento

Figura 2: Caracterização (A) Digestão pela Papaína / (B) Digestão pela Pepsina

(A)

(B)

Polimorfismo• Classes ou isótipos

- diferentes estruturas dentro de uma espécie- 5 classes de cadeia H: , , , e - sub classes (variação da cadeia H)

• Alotipia ou Alótipos:- pequenas variações - regiões constantes -

diferenças genéticas entre indivíduos • Idiótipos

- definem os determinantes individuais e característicos dos Acs - regiões hiper-variáveis

Funções

- inativação de toxinas e outros agentes químicos- inativação de vírus- lise de bactérias- citotoxicidade- transferência de imunidade para fetos (IgG)- transferência de imunidade a lactantes (IgA>IgG)- fixação do complemento- regulação da resposta imune- participam de reações auto-imunes e alérgicas

FUNÇÕESDegranulação

– Membrana de linfócitos B– Superfície de Fagócitos, Mastócitos e NK – Soro, plasma e líquido intersticial– Secreções como leite e o muco

DISTRIBUIÇÃO NATURAL

Resposta primária e secundáriaPrimeiro contato com Ag- inicialmente: resposta imune, estimulo a linfócito B que se diferencia em plasmócito e libera Ac- acelerado e progressivo da [Ac]- Ac- permanência de concentração basal = indica contato com o antígeno em algum momento

Segundo contato (mesmo Ag)- células receptoras = células de memória- desencadeamento de uma resposta imunológica mais rápida- produção de Ac

MUNIDADE PASSIVA NATURAL (MATERNA) E IMUNIDADE ADQUIRIDA ATIVA (INFECÇÃO)

Imunidade Ativa- Ocorre quando o hospedeiro apresenta uma resposta a

um microrganismo ou a um antígeno microbiano.

Imunidade Passiva- Ocorre mediante a transferência de anticorpos ou

linfócitos T específicos para o microrganismo.

As duas formas de imunidade promovem resistência a infecções (imunidade), mas somente as respostas imunológicas ativas que geram memória

Anticorpo IgG

- atravessa a barreira placentária humana- a sub-classe IgG3 fixa complemento com mais eficiência- possui 4 sub-classes: IgG1, 2, 3 e 4 que constituem 70, 20, 8 e 2%, respectivamente, do total de IgG- peso molecular 160kD- concentração plasmática = 800 - 1600 mg/dl- geralmente forma monomérica- principal imunoglobulina sérica- meia vida de 21 dias- principal Ig sintetizada na resposta secundária, neutraliza toxinas bacterianas e liga-se aos microorganismos para facilitar a fagocitose- é a responsável pela memória imunológica

Anticorpo IgM- encontra-se principalmente sob forma de pentâmero (cinco monômeros)- é a principal imunoglobulina da resposta primária aos antígenos; é a primeira classe ao elevar-se na fase aguda dos processos imunológicos- redução a monômero de peso molecular 180kDa- aglutinante e citolítico- fixa complemento melhor que IgG3- maturação do ly B, atuando como receptor e interagindo com o antígenoquanto ao controle da ativação ou supressão do linfócito

Anticorpo IgA- peso molecular 160kDa (monômero) ou 360kDa (dímero)não atravessa a placenta - concentração plasmática = 150 a 400 mg/dl- representa importante papel impedindo a penetração, no organismo de substâncias alergênicas e de partículas microbianas

IgA secretora- é a mais encontrada nas secreções exócrinas (saliva, lágrima, colostro, leite materno) = confere imunidade localbarreira contra vírus, micróbios, alérgenos

Anticorpo IgE- não deve ser a única Ig responsável pelasreações anafiláticas- peso molecular de 200kDa (quatro domínios de cadeia H)- concentração plasmática = 0,002 -0,05 mg/dl- seu papel defensivo não esta provado e assim a deficiência destas Ig não podem ser interpretadas- associação: aumento de IgE em infecções parasitárias, facilita a fagocitose- encontra-se ligada a mastócitos e basófilos através de sua porção Fc, participa de fenômenos alérgicos e reações anafiláticas (reação de hipersensibilidade tipo I)- encontrada também no cordão umbilical, mucosas, colostro

Anticorpo IgD- constituição básica de duas cadeias leves ( e ) e duas pesadas- forma monomérica- indivíduos com soro normal possuem pouca IgD- peso molecular 160kDa- não é detectada na circulação- altamente sensível a lise (lábil à degradação)- do mesmo modo que a IgM existe como receptor na superfície de todo linfócito B em determinado momento de sua ontogenia

Aplicação de especificidade, memória e auto-limitação

Figura 4: Microscopia eletrônica – configuração de um anticorpo

Figura 5: Representação esquemática de um anticorpo (Fc, Fab, dobradiça, sítio combinatório)

• Soro - grande número de anticorpos capazes de se ligarem a Ag específicos = soro imune

• mensuráveis (diluições)• Produção de Ac específico para um determinado

epítopo = tecnologia dos anticorpos monoclonais• Ac produzidos pelo mesmo clone de linfócito B -

mesma especificidade

Anticorpos Monoclonais

ANTICORPOS MONOCLONAL

OBTENÇÃO - HIBRIDOMA

• Inicialmente linfócitos B expressam IgM (primeiro Ac numa resposta imune)

• durante uma resposta imune, ocorre a liberação de citocinas por células T que induzem a troca de isotipo para IgG, IgA ou IgE;

• recombinação somática na célula B.

Switching ou Troca de classe

Para estudar

1) Defina anticorpo 2) Esquematize um Ig e indique e explique todas as

partes: Fab, Fc, sítio combinatório, região da dobradiça.

3) Explique as principais funções das Ig: IgM, G, A, E e D.

4) Interprete os quadros:Paciente apresenta sorologia para Toxoplasmose:(a) IgG- IgM+(b) IgG+ IgM-(c) IgG- IgM-

Agradecimentos

Profas Paula Knox e Adriana de Brito, pelo material gentilmente cedido

Obrigada, paz, amor e harmonia!Profa. Alessandra