Aula 04 - OPG e coprocultura.pdf

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  • 7/26/2019 Aula 04 - OPG e coprocultura.pdf

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    UNIVERSIDADE COMUNITRIA DA REGIO DE CHAPEC - UNOCHAPEC

    rea de Cincias Exatas e AmbientaisACEACurso de Medicina VeterinriaDisciplina de Parasitologia3 perodoProfessora: Natascha Trevisani

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    ROTEIRO DE AULAS PRTICASPARASITOLOGIA VETERINRIA

    AULA 4

    PARTE ITCNICA DE GORDON E WHITLOCK (OPG)

    Objetivos: Identificao e contagem de ovos de helmintos e de oocistos de coccdeos.Uso: ruminantes e equinos, pode sunos

    Princpio: Mtodo de flutuao associado a contagem em Cmara de McMaster

    Material:- fezes (2 ou 4 gramas)- 2 potes plsticos ou bquer

    - 1 peneira- balana semi analtica

    - 1 pipeta de Pasteur- soluo saturada de NaCl- 2 Cmaras de McMaster- 1 proveta graduada

    - 1 basto de vidro

    - microscpio

    Metodologia:Colher amostra de 3 a 5% do rebanho por idade, diretamente do reto do animalMontagem da Cmara de McMaster com as ranhuras para baixoPesar as fezes (4g para grandes animais e 2g para pequenos)

    Em uma proveta, medir 56mL (4g de fezes) ou 28mL (2g de fezes) de soluo salina hipersaturada.Colocar uma pequena quantidade da soluo saturada no copo com fezes e homogeneizar com o basto de

    vidro. Aps, acrescentar o restante da soluo, homogeneizar bem e peneirar para outro pote plstico.Remover a peneira, agitar a mistura e com a pipeta retirar uma pequena quantidade e preencher as clulasda Cmara de McMaster.Colocar a cmara no microscpio, identificar e contar os ovos na objetiva de 5 ou 10x.

    Interpretao: o resultado ser em ovos por grama de fezes (OPG)Clculo:

    Utilizando 4g - 4 gramas fezes - 56mL sol. Saturada - Total = 60mLVolume da cmara = 0,30mL

    ContagemOs diferentes ovos encontrados nas duas clulas da cmara devem ser identificados e contadosseparadamente e o nmero total multiplicado por 50.

    >500 OPG = infeco moderada>1000 OPG = infeco altaOocistos de coccdeos e ovos deMoniezia spp. so apenas registrados e no quantificados.

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    UNIVERSIDADE COMUNITRIA DA REGIO DE CHAPEC - UNOCHAPEC

    rea de Cincias Exatas e AmbientaisACEACurso de Medicina VeterinriaDisciplina de Parasitologia3 perodoProfessora: Natascha Trevisani

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    Parasitos encontrados nas fezes de ruminantes:- Ordem Strongylida

    - Ascardeo- Strongyloides- Trichuris-Moniezia- Eimeria

    Parasitos encontrados nas fezes de equinos:-Parascaris

    - Ovo de estrongildeo (grandes e pequenos)- Strongyloides- Anoplocephala

    PARTE II

    COPROCULTURA

    Objetivo: realizar o cultivo das fezes de ruminantes ou equinos com ovos da Ordem Strongylida paraidentificao dos gneros de helmintos por meio da morfologia das larvas infectantes (L3). Conhecer osnematides presentes no rebanho para instituir tratamento antihelmntico adequado.

    Material para o cultivo:- fezes (+)-serragem depinus- luva

    - gua- 1pipeta de Pasteur

    - 1 esptula- frasco de vidro grande- basto de vidro- estufa 27C/URA70%

    Material para coleta e identificao das larvas:- placa de petri- pipeta de Pasteur

    - lmina e lamnula- lugol

    - microscpio

    Procedimento:Misturar as fezes com serragem (1:2) permitindo boa aerao. Transferir a mistura para o frasco de vidro

    preenchendo do seu volume total. Umedecer. Deixar um espao no centro fazendo um buraco com obasto de vidro. Levar a estufa 27C/URA70% por 7 dias. Observar diariamente caso ressecar pode

    umedecer.Para coleta das larvas, encher o frasco com gua at a borda, tampar com uma placa de Petri e inverter

    rapidamente. Com uma pipeta de Pasteur preencher a placa de Petri at a metade e deixar em repouso por 2horas. As larvas iro migrar, pois apresentam hidrotropismo. Aps, recolher as larvas com pipeta de Pasteure acondiciona-las em frascos de vidro com tampa na geladeira ou fazer a leitura em lminas, colocar umagota do material e uma gota de lugol, cobrir com lamnula e observar no microscpico objetiva de 10x.

    Interpretao: contar 100 larvas e expressar o resultado em porcentagem por gnero identificado.