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Biotecnologia da Reprodução
Prof. Msc. Marcelo Arne Feckinghaus
Bases Fisiológicas
• Fases do ciclo estral Proestro, estro, metaestro e diestro Interações entre SNC e órgãos genitais
• Hipotálamo controla hipófise Hormônios liberação pulsátil GnRH Receptores específicos (adeno-hipófise)
Bases Fisiológicas
• PGA modula resposta GnRH ↓ freqüência do pulso de GnRH
• Estrógeno Ação depende da PGA Fase Luteínica: ↓ freqüência GnRH Fase Folicular (pré-ovulatória): ↑ freqüência GnRH
Bases Fisiológicas
• Interferências Ambiente (temperatura, fotoperíodo) Estado nutricional Manejo do rebanho Estresse Amamentação Opióides endógenos inibem GnRH
Feromônios masculinos
Bases Fisiológicas
• Inibição hormonal Inibina Supressão de FSH
• LH regulado pelo GnRH PGA influencia Balanço energético Amamentação
FSH X LH
Superovulação
• Mecanismo exato de recrutamento desconhecido
• Dominância e atresia
• Relação com FSH
• Ondas foliculares 2 até 3 depende da fase luteínica
Superovulação
• Definição:
Método de estimulação folicular para desenvolvimento de DIVERSOS folículos terciários até a ovulação
Superovulação
• Simplificando:Suprir deficiência de FSH antes que o folículo dominante cause a diminuição endógena do mesmo!
Neutralização da dominância
Superovulação
• Inibição: Ativa X Passiva Passiva = ↓ [] de FSH até a incombatibilidade Ativa = Substâncias ↓ sensibilidade a GnRH
• Alternativas Gonadotrofinas (eCG, hCG e FSH) Resposta variada
Superovulação
• Variações: Imprecisão na sincronia ovariana Atividade biológica Dose Idade e raça da doadora Fatores individuais
Superovulação
• Emergência (início) da onda folicular
• Melhor resposta ao FSH
• Antes da dominância
Fecundação e Desenvolvimento
• Tempo de capacitação Mudanças bioquímicas e estruturais Remoção de substâncias (plasma seminal) Entrada de cálcio = Atividade flagelar Reação acrossômica = poder de penetração
• Maior durabilidade do espermatozóide Oócito = 20 -24 horas Espermatozóide (sptz) = 24 – 48 horas
Fecundação e Desenvolvimento
• Fecundação 6 horas após a ovulação
• Inseminação antes da ovulação
• Primeiro contato corona radiata e zona pelúcida
• Pressão estimula a fusão das membranas (acrossomal e plasmática)
Fecundação e Desenvolvimento
• Pontos de fusão liberação de enzimas = Penetração
• Ruptura + Penetração = Restabelecimento da ZP
• Reinício da meiose (pronúcleos)
• Formação do zigoto
Fecundação e Desenvolvimento
• Aproximação e junção dos pronúcleos = singamia
• Divisões mitóticas = clivagem
• Blastômeros = ↓ tamanho e ↑ número
• ↑ força de coesão celular = compactação celular = mórula
Fecundação e Desenvolvimento
• 13 a 32 blastômeros = 4 a 5 dias
• Divisão e especialização celular = blastocisto inicial
• Embrioblastos e trofoblastos Feto e placenta
Fecundação e Desenvolvimento
• Blastocele = cavidade
• Pressão = Rompimento da zona pelúcida
• Blastocisto eclodido
• Melhores resultados antes da eclosão
Dia 2 = 4 células
Dia 3 = 8 células
Dia 4 = 16 células
Dia 5 ou 6 = Mórula
Dia 6 -7 = Blastocisto
Dia 7 – 8 = Blastocisto Expandido
Dia 8 – 9 = Blastocisto Eclodido