Faculdade de Medicina de São José do

Rio Preto

Departamento de Especialidades Cirúrgicas

Disciplina de Urologia

Clube de Revista

Coordenador: Prof. Dr. Carlos Abib CuryOrientador: Dr. Vinícius Eiji Nakae

Aluno: Gustavo Almeida de Oliveira - nº33 4ª Série Médica

PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO E FATOR DE EXPRESSÃO DE CHOQUE TÉRMICO EM ESPERMA: RELAÇÃO PARA OLIGOZOOSPERMIA E VARICOCELE.

Alberto Ferlin, Elena Speltra, Cristina Patassini, Mauro A. Pati, Andrea Garolla, Nicola Caretta and Carlo

Foresta.

Da Secção de Patologia Clínica e Centro de Criopreservação de Gameta Masculino do Departamento de Histologia, Microbiologia e Medicina

Biotecnologias, da Universidade de Padova, Padova, Itália

THE JOURNAL OF UROLOGY® . Vol. 183, 1248-1252, Março de 2010

VARICOCELE

Testículo:

• Gônoda sexual masculina, que produz os espermatozóides

• Protegida pelo escroto

• Suspenso pelo FunículoEspermático

VARICOCELE

Formação de varizes na região do escroto

Causa + comum de infertilidade masculina

Adolescência = 15%

Casais: 1ª. Incidência 35% 2ª. Incidência 81%

Homens com infertilidade = 20 a 40%

VARICOCELE

O surgimento da varicocele pode ter uma predisposição individual.

> incidência do lado esquerdo (90%).

Por quê?

VARICOCELE

. Anatomia: Ângulo 90º + longa ( > Pressão Hidrostática)

. Pressão pela V.

renal esquerda.

VARICOCELE

VARICOCELE

Esses fatores ajudam a danificar as válvulas da veia testicular.

Dessa forma leva ao

refluxo. PROBLEMAS?

VARICOCELE

Problemas do refluxo:

prejudica o fluxo sanguíneo local prejudica troca de nutrientes acúmulo de substâncias tóxicas ↑ de temperatura

Podem provocar: alterações na quantidade e qualidade dos espermatozóides.

VARICOCELE Espermograma – fundamental para um boa

avaliação.

Alterações no Espermo

grama: - ↓ nº de

espermatoz. - ↓ motilidade - Alteração da

morfolog.

VARICOCELE - SINTOMAS

Dor no testículo Sensação de peso no(s) testículo(s) Infertilidade Diminuição (atrofia) do(s) testículo(s) Veia aumentada visível ou palpável

(capaz de ser sentida)

VARICOCELE

Varicocele em homem idoso – Pode ser sinal tardio de tumor renal.

Cél. Tumorais Ocluem a invadem a veia Veia

Testicular Renal

VARICOCELE - DIAGNÓSTICO

Exame Físico :

- Manobra de Valsalva

VARICOCELE - CLASSIFICAÇÃO

Grau I (pequenas) – palpáveis apenas com a manobra de Valsalva.

Grau II (moderadas) – palpáveis sem a manobra

Grau III (grandes) – detectadas visualmente a palpadas com facilidade

VARICOCELE – EXAME COMPLEMENTAR

U.S. com Doppler

Fluxo sanguíneo Som característico Diâmetro

VARICOCELE - TRATAMENTO

- Conservador(Assintomáticos) – uso de suspensório escrotal durante exercícios. Cirúrgico - Em 3 casos: ↓ do tamanho do testículo e/ou espermograma alterado e/ou dor testicular

BIBLIOGRAFIA

Smith, Urologia Geral, 13ª edição, Rio de Janeiro, Editora Guanabara Koogan S.A., 1994, pag. 474, 525.

Walsh, Patrick C., Campbell´s urology, 7ª edição, volume 1, W.B. Saunders Company, 1998, pag. 212 – 217.

Sobota, 22ª Edição, Volume 2, Rio de Janeiro, Editora Guanabara Koogan S.A., 2006, pag. 193 – 199.

website: www.varicocele.com.br/

website: www.embolution.com.br/tra tamento/varicocele.html

PROTEÍNA DE CHOQUE TÉRMICO E FATOR DE EXPRESSÃO DE CHOQUE

TÉRMICO EM ESPERMA: RELAÇÃO PARA OLIGOZOOSPERMIA E VARICOCELE.

Alberto Ferlin, Elena Speltra, Cristina Patassini, Mauro A. Pati, Andrea Garolla, Nicola Caretta and

Carlo Foresta.

Da Secção de Patologia Clínica e Centro de Criopreservação de Gameta Masculino do Departamento de Histologia,

Microbiologia e Medicina Biotecnologias, da Universidade de Padova, Padova, Itália

THE JOURNAL OF UROLOGY® . Vol. 183, 1248-1252, Março de 2010

PROPÓSITO

Varicocele pode ser associada com normozoospermia ou oligozoospermia

Temperatura ↑ (varicocele) : podem ativar HSP e HSF ► Proteger a célula.

Ou seja, HSP tem uma

função protetora.

PROPÓSITO

Analisaram a expressão de 5 HSPs e HSFs : HSP90, HSPA4, HSF1, HSF2 e HSFY .

Fatores escolhidos devido serem os que mais bem caracterizam os fatores que envolvem a resposta ao stress (papel importante na espermatogênese).

PROPÓSITO

- HSP90 e HSPA4 – Corrigem proteínas misfolded.- HSF1 e HSF2 estimulam a transcrição.

PROPÓSITO

HSFY - localizado na região de AZFb do cromossomo Y.

Deleção = causa uma alteração severa na espermatogênese.

MATERIAL E MÉTODOS - ASSUNTO

117 pacientes com grau II ou III de varicocele, 68 pacientes sem varicocele

Período de junho de 2008 a fevereiro de 2009.

Assuntos: história, exame físico, ultra-som de Doppler do escroto, análise de sêmen e análise dos hormônios sexuais (inclusive FSH, hormônio luteinizante e testosterona)

MATERIAL E MÉTODOS - ASSUNTO Excluíram varicocele grau I, azoospermia,

medicamento, febre no mês prévio, infecção seminal, doença sistêmica.

Varicocele foi classificada de acordo com diretrizes de classificação clínicas internacionais.

4 grupos: Varicocele e Oligozoospermia (VO) – 51 homens

Varicocele e Normozoospermia (VN) – 66 homens

Controle e Oligozoospermia (CO) – 26 homens

Controle e Normozoospermia (CN) – 42 homens

MATERIAL E MÉTODOS – ANÁLISE DE SÊMEN

Colhidas 2 amostras de sêmen, através de masturbação (2 a 4 dias de abstinência sexual).

1ª amostra 2ª amostra- Concentração de espermatozóides- motilidade- morfologia- vitalidade

Amostra para

extração de RNA

EXTRAÇÃO DE RNA, SÍNTESE DE CDNA, E RT-PCR

RNA extraído da 2ª amostra

Reação da transcriptase

reversacDNA

PCR (ampliado usando primers

específicos para cada

gene)

eletroforese

HSP90 – 290 pbHSPA4 – 116 pbHSF1 – 96 pbHSF2 – 120 pbHSFY – 150 pb

RESULTADOS

CN CO VN VO

Vol Test (ml)Esq.

18,45 ± 4,5 13,8 ± 6,3 16,1 ± 4,9 12,5 ± 4,1

FSH 3,8 ± 1,9 7,7 ± 1,6 4,8 ± 3,7 7,8 ± 6,2

Contagem de esperm. (milhões)

165,8 ± 57,4 18,8 ± 9,4 163,5 ± 38,5 17,7 ± 8,7

Motilidade (%)

47,8 ± 18,4 31,2 ± 22,1 45,5 ± 16,7 33,5 ± 16,4

Grau de Var.IIIII

____

____

39%61%

35%65%

Valor p < 0.002 considerado estatisticamente significante

RESULTADOS

- CO vs CN / VO vs VN

- Oligozoospermia deveu-se a dano testicular primário

RESULTADOS

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

- HSPA4, HSF1 e HSF2 – Comportam. semelhante - HSP90 (independe da varicocele)- HSFY (depende da varicocele, pp VN)

DISCUSSÃO

Foram encontrados 3 padrões de expressão em relação a oligozoospermia e / ou varicocele

Um padrão comum foi observado para HSPA4, HSF1 e HSF2

DISCUSSÃO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

- HSPA4, HSF1 e HSF2 – Comportam. semelhante

- ↑ da expressão desses HSP e HSFs na oligozoospermia : tendência dos testículos em reparar os danos na espermatogênese ou que a alta expressão destas proteínas pode danificá-la.

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

- ↑ HSP90 em casos de oligozoospermia independente de varicocele.

- 2 possibilidades : 1- espermatogênese prejudicada devido a qualquer causa (que levou o ↑ HSP90) 2- expressão de HSP90 alta é perigoso p/ a espermatogênese.

DISCUSSÃO

Uma outra hipótese é que uma capacidade individual de manter HSP90 baixo, explicando pelo menos em parte porque varicocele causa danos espermatogênicos em alguns indivíduos e não em outros.

No entanto, não há dados para apoiar qualquer uma dessas hipóteses.

DISCUSSÃO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

CN CO VN VO

- HSFY – Relacionado apenas com varicocele, pp em Normozoospermia.

- HSFY poderia representar um fator, cuja expressão pode ser importante para determinar se um homem com varicocele teria ou não dano na espermatogên.

CONCLUSÃO

HSPs e HSFS são expressadas em diferentes níveis no esperma ejaculado de homens com normozoospermia ou oligozoospermia que está ou não está associada com varicocele.

CONCLUSÃO

Embora algumas dessas proteínas são up-reguladoras nos casos de oligozoospermia e varicocele, HSFY é up-regulador apenas na presença de varicocele.

Maior expressão - varicocele e normozoos-permia, sugerindo que ela pode representar um marcador molecular de uma resposta adequada ou inadequada.

REFERÊNCIAS1. Jarow JP: Efeitos da varicocele na

fertilidade mascul. Reprodução masculina

2001; 7: 59.

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Caracterização de HSFY, um romance AZFb

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16. Sato Y, Yoshida K, Shinka T et al: padrão

Expressão alterado de calor fator de

transcrição de choque, o cromossomo Y

(HSFY) pode estar relacionada à

diferenciação das células alteradas

espermatogênico em testes com a

espermatogênese se deteriorou. Fertil Steril

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17. WHO Laboratory Manual for the

Examination of Human Semen and Sperm

Cervical Mucus Interaction. World Health

Organization. Cambridge, United Kingdom:

Cambridge University Press 1999.

“ A SABEDORIA DA VIDA NÃO

CONSISTE EM FAZER AQUILO QUE SE GOSTA, MAS

EM GOSTAR

DAQUILO QUE SE

FAZ”.

Leonardo da Vinci