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17/10/2016 1 Laboratório de Anaeróbios Bactérias anaeróbias na cavidade bucal Profa. Dra. Viviane Arenas Ausência de O 2 Toxidade ao O 2 Anaeróbios obrigatórios Anaeróbios tolerantes Tolerância O 2 Potencial de Eh Habitats Morfologia/ Gram Microbiota residente Infecções humanas Bactérias anaeróbias Laboratório de Anaeróbios Infecções humanas Laboratório de Anaeróbios Complexidade anatômica Ecossistemas Diversidade 700 espécies Comunidade complexa Sinalização molecular Virulência Colonização Destruição tecidual Evasão Microbiota bucal Feng et al. (2006); Starke et al. (2006) Laboratório de Anaeróbios Físico-químico Sistema imunológico Metabolismo do microrganismo Dieta Higiene bucal Antimicrobianos Importância do estudo Biofilme Gengivite Periodontite Periimplantite Infecções endodônticas Fatores que regulam a microbiota bucal Laboratório de Anaeróbios Kolenbrander et al. (2010) Biofilme Laboratório de Anaeróbios

Infecções humanas Microbiota bucal - USP · Morfologia/ Gram Microbiota residente Infecções humanas ... Anatomia Microrganismo Genética Sistema Imune Sulco gengival Bolsa periodontal

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17/10/2016

1

Laboratório de Anaeróbios

Bactérias anaeróbias na cavidade bucal

Profa. Dra. Viviane Arenas

Ausência de O2

Toxidade ao O2

Anaeróbios obrigatórios

Anaeróbios tolerantes

Tolerância O2

Potencial de Eh Habitats

Morfologia/ Gram

Microbiota residente

Infecções humanas

Bactérias anaeróbias

Laboratório de Anaeróbios

Infecções humanas

Laboratório de Anaeróbios

Complexidade anatômica

Ecossistemas

Diversidade 700 espécies

Comunidade complexa

Sinalização molecular

Virulência

Colonização

Destruição tecidual

Evasão

Microbiota bucal

Feng et al. (2006); Starke et al. (2006)Laboratório de Anaeróbios

Físico-químico

Sistema imunológico

Metabolismo do microrganismo

Dieta

Higiene bucal

AntimicrobianosImportância do

estudo

Biofilme

Gengivite

Periodontite

Periimplantite

Infecções endodônticas

Fatores que regulam a microbiota bucal

Laboratório de AnaeróbiosKolenbrander et al. (2010)

Biofilme

Laboratório de Anaeróbios

17/10/2016

2

Gemella spp.

Anaeróbios bucais

Peptostreptococcus spp.

Prevotella spp.

Fusobacterium spp.

Porphyromonas spp.

Tannerella forsythia

Eubacterium spp.

Veillonella spp.

Propionibacterium spp.

Peptococcus spp.

Treponema denticola

Laboratório de Anaeróbios

Cápsula/LPS

Hialuronidase

Elastase

β-lactamase

IL-1/IL-6/IL-8

IgG/IgA/IgM

Hemaglutinação

Bolstad et al. (1996); Han et al. (2005)

Fusobacterium nucleatum

Adesina e Bactericionas

Fada

Coagregação

Laboratório de Anaeróbios

Fusobacterium nucleatum

Ágar sangue Ágar Omata Disraely

Laboratório de Anaeróbios

Fusobacterium nucleatum

Coloração de Gram

Laboratório de Anaeróbios

Cápsula

Protease

LPS

Colagenase

IL-6/IL-12

gene Kpg

Assacarolíticos

Porphyromonas gingivalis

Adesina

gene rgpA

Fímbrias

Díaz et al. (2012)Laboratório de Anaeróbios

Cápsula/ LPS

Protease

Hialuronidase

IL-8/ TNF

Estradiol/Progesterona

Heparinase

Prevotella intermedia

Sulfatase

β-lactamase

Münchow et al. (2015)Laboratório de Anaeróbios

17/10/2016

3

Porphyromonas spp. e Prevotella spp.

Ágar sangue

Fluorescência em luz ultravioleta

Ágar sangueLaboratório de Anaeróbios

Porphyromonas spp. e Prevotella spp.

Coloração de Gram

Laboratório de Anaeróbios

Saudável Gengivite Periodontite

Infecção por anaeróbios bucais

CrônicaAgressiva

LocalizadaGeneralizada

Laboratório de Anaeróbios

Sucessão da microbiota subgengival

Socransky et al. (1998)Laboratório de Anaeróbios

Fatores locais que interferem no periodonto

Laboratório de Anaeróbios

Biofilme

Diversidade

700 espécies Comunidade complexa

Destruição periodonto

Higiene

Dente

Prótese

Restauração

Anatomia

Microrganismo

Genética

Sistema Imune

Sulco gengival

Bolsa periodontal

Ecologia

Fumo

Cálculo

Destruição periodonto

Socransky e Haffajee (1992)

Laboratório de Anaeróbios

17/10/2016

4

Laboratório de AnaeróbiosPeriodontal Inflammation: Simplified /oralhealth / www.oralhealthgroup.com / Fay Goldstep (2013)

Laboratório de AnaeróbiosPeriodontal Inflammation: Simplified /oralhealth / www.oralhealthgroup.com / Fay Goldstep (2013)

Laboratório de AnaeróbiosPeriodontal Inflammation: Simplified /oralhealth / www.oralhealthgroup.com / Fay Goldstep (2013)

Laboratório de AnaeróbiosPeriodontal Inflammation: Simplified /oralhealth / www.oralhealthgroup.com / Fay Goldstep (2013)

Laboratório de AnaeróbiosPeriodontal Inflammation: Simplified /oralhealth / www.oralhealthgroup.com / Fay Goldstep (2013)

Laboratório de Anaeróbios

Periodontal Inflammation: Simplified /oralhealth / www.oralhealthgroup.com / Fay Goldstep (2013)

17/10/2016

5

Ápice dentes desvitalizados

Tecido necrosado

Tecido granulação

Ausência de sintomasEscurecimento do

dente

Radiolúcida

Perda lâmina dura

Infecções endodônticas

Laboratório de Anaeróbios

Cisto inflamatório

20-50 anos

Ápice dente não vital

Radiolúcido

1,5 a 3,0 cm

Forma:

circular/pera invertida

Contorno:

Regular definido

Dentes adjacentes raramente

reabsorvidos

Deslocamento de seio maxilar/ dentes

Cisto radicular

Laboratório de Anaeróbios

Biofilme

Relação ecológica

Microbiota periodontal

Adesão Virulência

Superfície do implante

Porphyromonas

gingivalis

Prevotella

intermedia

Tannerella

forsythia

Treponema

denticola

Periimplantite

Laboratório de Anaeróbios

Periimplantite

Laboratório de Anaeróbios

Abscesso dentário

Laboratório de Anaeróbios

Celulite facial

Laboratório de Anaeróbios

17/10/2016

6

Drenagem de celulite facialLaboratório de Anaeróbios

Mucosite

Laboratório de Anaeróbios

Infecção cruzada

Laboratório de Anaeróbios

Como isolar anaeróbios bucais?

Diluições seriadas – meio seletivo Anaerobiose

Extração DNA

Material clínico/Colônia cultura pura

Catalase

Colônia (Gram)

Teste respiratório

Fermentação de carboidratos

Gram

Laboratório de Anaeróbios

Anaerobiose

Câmara de anaerobiose

Sistema Gás PackMistura de gasesLaboratório de Anaeróbios

Realizando a identificação presuntiva

Catalase

Hidrólise esculina

Motilidade Produção de H2S

Indol

Fluorescência Hidrólise de gelatina

Laboratório de Anaeróbios

17/10/2016

7

Testes Definitivos – API- 20 A BioMerirux

Negativo

Positivo

Laboratório de Anaeróbios

Biologia Molecular

Sondas Genéticas

PCR qualitativo ou convencional

PCR quantitativo (Real Time)

Sequenciamento

Laboratório de Anaeróbios

Considerações finais

� Trabalho especializado requer treinamento

� Rotina laboratorial para anaeróbios é de alto custo

� Microrganismos anaeróbios são exigentes

� Integrantes da microbiota residente

� Capacidade de agressão endógena

Laboratório de Anaeróbios

Questões para estudo:

� Explique como os fatores locais presentes na cavidade bucal

interferem no periodonto.

� Qual a real participação das bactérias anaeróbias nos processos

infecciosos? Cite as principais patologias e seus respectivos

agentes.

� Determine a importância do estudo dos anaeróbios bucais.

� Quais os cuidados e como é realizado o isolamento de bactérias

anaeróbias na cavidade bucal?

Laboratório de Anaeróbios

Referências Bibliográficas

� DE LORENZO. Microbiologia, ecologia e imunologia aplicadas à clínica odontológica.

Ed. Atheneu. 1a. Edição, 2010.

� FAY GOLDSTEP. Periodontal Inflammation: Simplified, Oral Health,

www.oralhealthgroup.com, 2013.

� FAY GOLDSTEP. Oral Rinses for a Proactive Intervention Approach to Periodontal

Health. Compendium of Continuing Education in Dentistry, 2014.

� JAWETZ. Microbiologia Médica. 26a Ed., 2013.

� NISENGARD; NEWMAN. Microbiologia Oral e Imunologia. Ed. Guanabara Koogan,

1997.

� TORTORA et al. Microbiologia. 10a ed., 2012.

Laboratório de Anaeróbios Laboratório de Anaeróbios