Processamento de Hemocomponentes Validação de Processos · 2018-06-12 · Processamento e Validação Inspeção de hemocomponentes Concentrados de Hemácias (CH) • Hemólise

Processamento de Hemocomponentes

Validação de Processos

Thábyta Silva Franco de SouzaJunho 2018

PARTE I:PROCESSAMENTO

Processamento e Validação

Legislação e normas

NR 32 - Segurança e Saúde no Trabalho em Serviços de SaúdePortaria GM n.º 485, de 11 de novembro de 2005

Anexo IV da Portaria de Consolidação nº 5, de 28 de setembro de 2017Consolidação das normas sobre as ações e os serviços de saúde do Sistema Único de Saúde.

ANVISA. RDC n° 34, de 11 de junho de 2014

Dispõe sobre as Boas Práticas no Ciclo do Sangue.

Normas institucionais

Procedimentos Operacionais Padrão


Hemocomponentes

Hemocomponentes

Hemoderivados


Hemocomponentes

Concentrado de Hemácias (CH)

• Obtido a partir de sangue total ou hemaférese• Centrifugação

• Conservado em estoque entre 2°C e 6°C

• CPDA-1 Validade de 35 diasHematócrito entre 65% e 80%

• S Aditiva Validade de 42 diasHematócrito entre 50% e 70%

• Modificações: desleucocitação, irradiação, lavagem

Rh negativo

Fenótipos raros


Hemocomponentes

Concentrado de Plaquetas (CP)

• Obtido a partir de • Sangue total (CP randômicas)• Plaquetaférese (CP de aférese)

• Métodos de preparação (ST)• PRP (centrifugação em duas etapas, mais comum)• Buffy-coat (camada leucoplaquetária, bolsas top and bottom)

• Conservado em estoque entre 20°C e 24°C sob agitação constante• Validade conforme o plastificante; em geral de 5 dias

• Modificações: desleucocitação, irradiação, lavagem, redução de volume• CP randômicas são transfundidas em pool


Hemocomponentes

Plasma Fresco Congelado (PFC)

• Obtido a partir de sangue total ou plasmaférese• Centrifugação

• Conservado a <-20°C• O congelamento permite a conservação dos fatores de coagulação,

fibrinólise e complemento, albumina, imunoglobulinas, proteínas e sais minerais

• Validade de 1 ano

• A bolsa deve estar totalmente congelada em no máximo 1h após o término do processo produtivo

Doadores AB/ B

Transfusões pediátricas


Hemocomponentes

Crioprecipitado (CRIO)

• Obtido a partir do descongelamento a frio (1°C - 6°C, 12h - 14h) do PFC e centrifugação e recongelado em até 1h após o fim do processo produtivo

• Conservado a <-20°C• Validade de 1 ano a partir da data de coleta

• Contém proteínas plasmáticas insolúveis em frio• Fibrinogênio, fator VIII, Fator de Von Willebrand e Fator XIII

• São transfundidos em pool

• PIC: Plasma Isento de Crioprecipitado• Uma única indicação transfusional: Púrpura Trombocitopênica Trombótica

(PTT)


Hemocomponentes

Outros hemocomponentes

• Hemocomponentes menos comumente produzidos:

• Concentrado de hemácias congeladas

• Hemácias rejuvenescidas

• Concentrado de granulócitos obtido por aférese

• Plasma comum, não fresco, normal ou simples

• Plasma fresco congelado dentro de 24 horas


Processamento: macro

Triplas

Quádruplas Top and bottom

Com filtro in linePediátricas

Aférese

Conjuntos de bolsasPrimária/ satélites

Processamento

Doação Aférese



Processamento



Sorologia Unidade de Terapia

Transfusional (doador)

Doação/ Aférese

Processamento





Doação/ Aférese

Estoque bloqueado

ABO/Rh

PAI

Segregação de hemocomponentes para prevenirsua utilização indevida

Processamento





Doação/ Aférese

Estoque liberado

Unidade de

Terapia

Transfusional

(receptor)

Controle de

Qualidade de

Hemocomponentes


Processamento: micro

Recebimento das bolsas

• Conferência dos dados ficha x bolsa x amostras

• Pesagem do ST e cálculo do volume

Volume ST = Peso líquido ST = (Peso do kit bolsa + ST) – (peso do kit vazio)Densidade ST 1,053

UBV

Plaquetas: 1,058Hemácias: 1,100



Recebimento das bolsas

• Informações adicionais• UBV• Não plaquetas• SD• Doadoras G0 x ≥G1• Doador fenotipado, funcionário, clube• Doação dirigida ou autóloga

• Repouso do ST entre 1h e 2h

• Para a produção de CP a temperatura ambiente deve estar entre 20°C e 22°C



HomogeneizaçãoMontagem Balanceamento CentrifugaçãoRegistros



• Centrifugação LEVE (1ª fase)– Separa as hemácias e leucócitos do PRP– Sedimenta células de maior densidade

• Centrifugação PESADA (2ª fase)– Separa as plaquetas do plasma– Sedimenta as células mais leves

Hemácias

LeucócitosPlaquetas

PlasmaPRP

Plaquetas

Plasma

Centrifugação



• Centrifugação LEVE (1ª fase)– Separa as hemácias e leucócitos do PRP– Sedimenta células de maior densidade

• Centrifugação PESADA (2ª fase)– Separa as plaquetas do plasma– Sedimenta as células mais leves

Centrifugação

Hemácias

Leucócitos

Plaquetas

Plasma



Extração automática Extração manual



Sequência de produção

Crioprecipitado



Armazenamento no estoque bloqueado



Sistema fechado

• É o sistema que permite a preparação e separação de componentes sanguíneos sem a exposição de seu conteúdo ao ar ou a elementos externos

• A manipulação do componente sanguíneo que exija a abertura do circuito será realizada em cabine de segurança biológica

• Se o sistema for aberto durante o processamento:

• Componentes eritrocitários (armazenados entre 2°C e 6°C) terão validade de até 24 horas após a produção

• Concentrado de plaquetas (CP) terão validade de até 4 horas

INSPEÇÃO DE HEMOCOMPONENTES


Inspeção de hemocomponentes

• É diferente do Controle de Qualidade de Hemocomponentes

• Durante e após o processamento, os hemocomponentes produzidos devem ser inspecionados quanto a:

• Volume– CH n/c– CP 40-70mL– PFC >150mL– CRIO 10-40mL

• Aspectos visuais da bolsa– Integridade– Validade– Rótulo



• É diferente do Controle de Qualidade de Hemocomponentes

• Durante e após o processamento, os hemocomponentes produzidos devem ser inspecionados quanto a:

• Aspectos visuais do hemocomponente– Hemólise– Contaminação bacteriana– Lipemia– Material particulado– Contaminação por hemácias– Icterícia– Coloração



Concentrados de Hemácias (CH)

• Hemólise

– Ruptura do eritrócito com liberação da hemoglobina (Hb)– A Hb livre é tóxica, especialmente para os rins– Algum grau de hemólise é normal e esperado durante o armazenamento

• Proporcional ao tempo de armazenamento (<0,8% no último dia)• Depende do volume de plasma, Ht e Hb iniciais da unidade

– Unidades com hemólise visual não devem ser transfundidas

• Causas

– Mecânicas• Centrifugação excessiva• Manuseio inadequado (quedas, pressão)• No tubo: ordenha, selagem, dobras

– Físicas• Temperatura inadequada de produção ou armazenamento

– Biológicas• Contaminação bacteriana




• Hemólise: avaliação

– Através do sobrenadante • Unidade deve estar em repouso

– Unidades coletadas de doadores com Ht mais alto são mais escuras

– A coloração do sobrenadante pode variar entre um tom rosa claro (menor grau de hemólise) e um tom arroxeado (maior grau)

– Colorações muito escuras são geralmente causadas por contaminação bacteriana

As análises devem ser realizadas NA BOLSA, nunca no segmento




• Contaminação bacteriana

– É a presença de bactérias na unidade coletada– Unidades com contaminação bacteriana não devem ser transfundidas– A detecção, a qualquer tempo, de contaminação bacteriana em um hemocomponente

deve gerar a busca pelos demais hemocomponentes oriundos da mesma doação e seu descarte

• Causas

– Doador• Infecção subclínica• Antissepsia inadequada na punção

– Processo• Sistema aberto




• Contaminação bacteriana: avaliação

– Geralmente há pouca ou nenhuma alteração visual

– Quando a bacteremia é muito alta:• Coloração muito escura (roxo/ preto) devido ao consumo de O2

• Excesso de bolhas, formadas pela produção de gás• Opacidade excessiva• Formação de coágulos• Hemólise




• Lipemia– Presença excessiva de lipídios no sangue– Em excesso pode interferir nos testes sorológicos/ imunohematológicos

• Causas– Doador

• Refeições ricas em lipídios antes da doação (triagem)• Dislipidemias

• Avaliação– Opacidade– Coloração com tom róseo– Identificação é mais fácil no PFC– Quando identificados, separar também o CH




• Material particulado

• Coágulos e fibrina

– São massas avermelhadas que não desmancham com a manipulação

– Não devem ser utilizadas para transfusão

• Causas

• Anticoagulante insuficiente• Homogeneização inadequada• Contaminação bacteriana




• Contaminação por hemácias– É uma falha no processo de produção

• Separação ineficaz das hemácias– Pode causar sensibilização do paciente

contra antígenos eritrocitários

• Lipemia– Opacidade– Aparência “leitosa”




• Icterícia– Causada pela deposição de bilirrubinas nos

fluidos corporais devido a desordens hepáticas ou colelitíase

– Aparência amarelo-brilhante

• Plasma esverdeado– Encontrado majoritariamente em doadoras

que utilizam contraceptivos orais– Outras causas: contaminação por

Pseudomonas spp., artrite reumatóide e presença de sulfonamidas




• Contaminação por hemácias– É uma falha no processo de produção

• Separação ineficaz das hemácias– Pode causar sensibilização do paciente contra antígenos eritrocitários

• Contaminação bacteriana– Causas semelhantes às do CH– Maior propensão em relação ao CH devido à temperatura de

armazenamento– Quando detectada visualmente:

• Opacidade excessiva• Bolhas de ar em excesso• Coloração acinzentada




• Presença de grumos– Centrifugação pesada do PRP com tempo e/ou velocidade excessivos– Agitadores de plaquetas descalibrados– Tempo de repouso após processo insuficiente– Temperatura inadequada de processamento

ou da sala de processamento

• Ausência de swirling– A presença de swirling indica boa viabilidade e função plaquetária na

bolsa– Ausência de swirling pode indicar:

• Baixo número de plaquetas• Temperatura de armazenamento inadequada• Agitadores de plaquetas descalibrados



Liberação e rotulagem

• Rótulos com códigos de barras e impressão um-a-um devem ser utilizados sempre que possível

• As etiquetas devem ter qualidade satisfatória para o uso** PFC

• Dupla checagem

• Doações dirigidas, auto-doações e unidades HbS+ serão identificadas como tal e armazenadas em locais específicos

ARMAZENAMENTO DE HEMOCOMPONENTES


Armazenamento de hemocomponentes

Armazenamento no estoque liberado

• Objetivo: Manter a eficácia terapêutica e a durabilidade dos componentes

• Regido pela Seção VIII do Anexo IV da Portaria de Consolidação nº 5

• É permitida a utilização de uma mesma câmara de conservação para armazenamento dos componentes sanguíneos, reagentes e amostras, desde que a localização e a identificação dos compartimentos sejam evidentes e distintas dentro da câmara.




• Em situações em que não esteja disponível registrador gráfico contínuo de temperatura, a verificação e o registro da temperatura serão realizados a cada 4 (quatro) horas, se os equipamentos estiverem em uso rotineiro, isto é, com abertura constante das portas.

• As câmaras de conservação de CH e CP necessitam alarmes de alta e de baixa temperatura.

• As câmaras de conservação de PFC não precisam de alarmes de baixa temperatura.




• Recomenda-se uma organização que permita “First in first out” para evitar expiração de hemocomponentes

• O dia da coleta é considerado D0, para fins de validade

• A validade dos hemocomponentes que receberam modificações que alterem sua data de validade será a que ocorrer primeiro.






Lesão de estoque

• O armazenamento causa alterações bioquímicas, metabólicas e mecânicas

• PFC– O congelamento rápido é fator crítico para a preservação dos fatores de

coagulação termolábeis



Lesão de estoque

• CP– Temperatura <20°C

• aumento no número de agregados plaquetários• redução do pH pela produção do lactato gerada pela glicólise, com

consequente redução da viabilidade plaquetária

– A falta de agitação diminui as trocas gasosas, com uma rápida queda do pH pelo acúmulo de ácido lático e metabólitos



Lesão de estoque

• ST e CH

– Temperatura <2°C• Hemólise por frio

– Temperatura >6°C• Favorece a proliferação bacteriana• Aumenta a taxa de glicólise

– 2,3-DPG (2,3-difosfoglicerato)• Reduz fortemente a afinidade da Hb pelo O2

• Sua depleção afeta transitoriamente a entrega de O2 aos tecidos• Atraso no resfriamento causa perda rápida do 2,3-DPG



Lesão de estoque

• ST e CH

– Queda gradual do pH devido ao acúmulo de ácido lático

– Disfunção da bomba Na-K da membrana resulta em danos liberação de potássio para os fluidos extracelulares

AABB Technical Manual, 17th edition



Lesão de estoque

• ST e CH

– Queda gradual do pH devido ao acúmulo de ácido lático

– Disfunção da bomba Na-K da membrana resulta em danos liberação de potássio para os fluidos extracelulares



Estorno e reintegração de hemocomponentes

• Regido pelo Art 188 do Anexo IV da Portaria de Consolidação nº 5

• Os componentes liberados para transfusão, mas não utilizados, podem ser reintegrados ao estoque se as condições de transporte e armazenamento forem conhecidas e adequadas

• Deverá ser realizada nova inspeção visual



Estorno e reintegração de hemocomponentes

• São condições indispensáveis para a reintegração:– O sistema de acondicionamento não estar aberto;– O componente ter sido mantido em temperatura apropriada durante todo o tempo

de permanência fora do serviço de hemoterapia;– A trajetória da bolsa estar devidamente documentada;– Existir um segmento ou tubo conectado à bolsa de concentrado de hemácias de

tamanho suficiente para permitir novos testes de compatibilidade

• CH mantém sua validade original• PFC tem validade de 24h após o descongelamento, se armazenado entre 2°C e 6°C• Não é recomendada a reintegração de pool de plaquetas ou de crioprecipitado

PARTE II

VALIDAÇÃO DE PROCESSOS


Legislação e normas

NR 32 - Segurança e Saúde no Trabalho em Serviços de SaúdePortaria GM n.º 485, de 11 de novembro de 2005

Anexo IV da Portaria de Consolidação nº 5, de 28 de setembro de 2017Consolidação das normas sobre as ações e os serviços de saúde do Sistema Único de Saúde.

ANVISA. RDC n° 34, de 11 de junho de 2014

Dispõe sobre as Boas Práticas no Ciclo do Sangue.

Normas institucionais

Procedimentos Operacionais Padrão


Validação de processos

Validação

• RDC 34• Art. 4º, inciso LV - validação: evidência documentada de que um procedimento,

processo, sistema ou método realmente conduz aos resultados esperados;

• Art. 9° Todo serviço de hemoterapia que realize atividades do ciclo do sangue deve ter um sistema de gestão da qualidade que inclua a definição da estrutura organizacional e das responsabilidades, a padronização de todos os processos e procedimentos, o tratamento de não conformidades, a adoção de medidas corretivas e preventivas e a qualificação de insumos, produtos e serviços e seus fornecedores, visando à implementação do gerenciamento da qualidade.

– Parágrafo único. O serviço de hemoterapia deve realizar validação de processos considerados críticos para a garantia da qualidade dos produtos e serviços antes da sua introdução e revalidá-los sempre que forem alterados.



Processos críticos

• Definição: processos críticos são processos que impactam de forma significativa na qualidade do produto e na segurança transfusional

• No âmbito do processamento de hemocomponentes:– produção e armazenamento – desleucocitação– transporte



Validação

• Validação prospectiva– Baseada na execução de um plano de testes previamente definidos, que

demostre que um novo sistema, processo, equipamento ou instrumento, satisfaz as especificações funcionais e expectativas de desempenho.

• Validação concorrente ou simultânea– Realizada durante a produção rotineira

• Validação retrospectiva– Baseada na revisão e análise de registros históricos, atestando que um

sistema, processo, equipamento ou instrumento, já em uso, satisfaz as especificações funcionais e expectativas de desempenho.



Validação



Validação

2. Definir quais etapas serão validadasColeta?Homogeneização?Descanso?Temperatura?Centrifugação?

1. Produzir Concentrado de Plaquetas



Validação

3.1 Identificar equipamentosCríticos: qualificar (QI, QO, QD)

calibrarCentrífugas refrigeradasExtratores automáticosPlaquetários

Não críticos: calibrarBalançasSeladoras

3.2 Identificar outros setores envolvidosEngenharia/ Eng. ClínicaCQHLaboratório de Microbiologia



Validação4. Protocolo de validação

4.1 Definir os objetivos

4.2 Elaborar o cronograma

4.3 Definir e treinar os operadores

4.4 Elaborar o plano amostral

4.5 Descrever o processo (POPs)

4.6 Especificar os resultados esperadose os critérios de aceitação

4.7 Especificar o monitoramento



Validação

5. Iniciar a validação



Validação

6.1 Avaliar os resultadosVolumeContagem de plaquetas Contagem de leucócitospHEnsaio microbiológico

% de conformidade% de recuperação

6.2 Elaborar o relatório de validação



Validação

Monitoramento Revalidação

Resultado não-conforme

Alteração no processo

Alteração nos requisitos

Relatório de validação

Nova validação

Alteração do equipamento

Alteração nos insumos



Validação



Referências

• NR 32 - Segurança e Saúde no Trabalho em Serviços de Saúde

• Anexo IV da Portaria de Consolidação nº 5, de 28 de setembro de 2017

• Guia para uso de hemocomponentes. Ministério da Saúde. 2ª Ed. 2015.

• Manual de Vigilância Sanitária para o Transporte de Sangue e Componentes no Âmbito da Hemoterapia. ANVISA 2ª Ed. 2016

• AABB Technical Manual, 17th Edition. 2014.

• Hemoterapia: fundamentos e prática. Dante M. Langhi Jr., Dimas T. Covas e José O. Bordin - 1ª Ed. 2007.• Técnicas Modernas Em Banco de Sangue e Transfusão. Denise M. Harmening - 6ª Ed. 2015.

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