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XLIICongresso Brasileiro de Fitopatologia Micologia 663 662 Crescimento micelial e esporulação de Bipo/ari bicolor do açaizeiro em diferentes meios de cultura e regimes de luminosidade. Silva, JC1;Torres, DB1;Silva, A1; Lustosa, D.C.1; Silva, GB1. Laboratório de Microbiologia Agrícola/Instituto de Ciências Agrárias. CEP: 66077-530, Montese, PA, Brasil. josi_any@ yahoo.com.br. Mycelial growth and sporulation of Bipo/ari bicotor 01 açaizeiro in dilferent culture media and lighting schemes. A ocorrência de Bipolaris bicolor atua como fator limitante na cultura do açaizeiro (Euterpe o/eraceae) em terra firme. Este trabalho teve por objetivo verilicar a influência do meio de cultura e luminosidade no crescimento micelial e esporulação de B. bicolor. O delineamento foi DIC,com quatro tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foram T1L1(meio BDA, fotoperíodo 12 h);T1L2 (BDA-12 h de luz branca/12 h de luz negra); T2L 1 (meio Czapeck, fotoperíodo 12 h) e T2L2 (Czapeck-12 h de luz branca/12 h de luz negra). Em placas de Petri de plástico, contendo meio de cultura, loram semeados discos de mi- célio, e acondicionadas em cãmara de crescimento, à temperatura de 25°C. Foi avaliado o crescimento radial diário, e no 6° dia a esporula- ção. O Tratamento T1 L1 diferiu significativamente dos demais trata- mentos quanto ao crescimento micelial. Enquanto que, a variável esporulação, não apresentou dilerença significativa entre os meios e períodos de luminosidade. Porém T1 L2 apresentou uma tendência a maior esporulação. Apoio Financeiro: CNPq/Rede CT_Petro. 664 Germinação conidial in vitro de Microcyc/us ulei (Fusic/adium macrosporum) causador do mal-das-folhas da seringueira. Oliveira, TAS1; Cardoso, SEA2; Mattos, CRR2; Blum, LEB1. lDep. Fitopatologia, UnB, Brasília, DF, 2Plantações Michelin da Bahia, Ituberá, BA. E-mail: [email protected]. /n vitro conidial germination of Microcyclus ulei (Fusic/adium macrosporum) the causal agent of South American leaf blight 01 the rubber tree. O mal-das-folhas (Microcyc/us u/e/) da seringueira (Hevea brasi/iensis) é o maior responsável por perdas nas áreas de cultivo no Brasil. Sen- do Fusic/adium macrosporum o estádio anamórfico-conidial a fase mais infectiva do fungo. Portanto, testou-se a germinação de esporos in vitro de três isolados (PMB21, PMB22, PMB23) do fungo. Os coní- dios loram coletados em folhas com sintomas da doença. As suspen- sões conidiais foram preparadas em solução de tween 80 (0,05% em água destilada e esterilizada) e ajustadas à concentração para 2,0 x 10 5 conídios/ml. Após o ajuste da suspensão, pipetou-se 0,5 ml e espalhou-se, em placa de Petri contendo meio Agar-água solidilicado. Foram realizadas quatro repetições, para cada isolado. A avaliação do percentual de germinação foi leita ao microscópio óptico, após 1, 2, 3, 4,5,6,7,8,9 e 10 horas de incubação a 24°C, contando-se o número de esporos germinados e não-germinados. Utilizaram-se, para calcu- lar a percentagem de conídios germinados, as médias das áreas observadas aleatoriamente em cada repetição. Os valores médios de germinação conidial após 10 horas de incubação loram semelhantes, 97,2% para o isolado PMB21, 97,0% para PMB23 e 96,4%para PMB22. Apoio Financeiro: PMB, CAPES. Tropical Plant Pathology 34 (Suplemento), agosto 2009 Variabilidade genética de Cryptosporiopsis spp., causador da podridão "Olho-de-boi" em macieira. Russi, A 1 ; Comparim, CC2; Bogo, A2; Sanhueza, RMV3; Ritschel, PSl 1Embrapa Uva e Vinho, Bento Gonçalves, RS, Brasil; 2Universidade do Estado de Santa Catarina-UDESC, Lages, SC, RS, Brasil; 3Centro de Pesquisa Proterra, Vacaria, RS, Brasil. [email protected]. Genetic variability of Cryptosporiopsis spp., causal agent 01 apple bulls eye rol. A cultura da macieira é afetada pela podridão "Olho-de-boi", causada pelo fungo Cryptosporiopsis spp. Este trabalho teve por objetivo avaliar a variabilidade de 23 isolados de Cryptosporiopsis spp., cole- tados no Sul do país. Para gerar polimorfismos na região ITS loi utili- zada a digestão com nove enzimas de restrição. Também foram anali- sados polimorfismos resultantes da amplilicação de 114 fragmentos com a utilização de 25 iniciadores RAPD. Na análise da região ITS não foram observados polimorfismos. A análise RAPD permitiu a distinção de três grupos, dois bastante próximos, que incluíram o isolado cp8, coletado em Vacaria-RS. Um terceiro grupo, distante dos dois já mencionados, incluiu cinco isolados, entre eles o isolado cp5, coletado em Fraiburgo-SC. A análise morfológica e o sequenciamento do gene da B-tubulina confirmaram que o isolado cp5 apresenta 98,7% de semelhança em relação ao isolado cp8, sugerindo a ocor- rência de duas espécies bastante relacionadas do fungo Cryptospo- riopsis spp no Sul do Brasil. Os fragmentos ITS serão sequenciados para confirmar a ausência de polimorfismos nesta região. 665 Phylogenetic relationships of Microcyc/us ulei based on the ITS region. Hora Júnior, BT1 Oliveira, SASl, Maflia, LA1; Mizubuti, ESG1. Depto de Fitopatologia/UFV, CEP: 36570-000, Viçosa, MG, Brasil. E- mail: [email protected]. Relações filogenéticas da espécie Microcyclus ulei com base na análise da região ITS. Molecular phylogenetic studies based on the ITS rDNA region have been a uselul approach to understand the evolutionary relationships among species and to provide additional characters to the classification of fungi. Microcyclus ulei (anamorph: Fusicladium macrosporium) causes the South American Leal Blight, an important disease of rubber tree (Hevea sp.), and used to be classified in the Mycosphaerellaceae family. However, based on a re-assessment of morphological characters, it was placed in the Plasnistromellaceae lamily. Due to the lack of DNA sequence data for this new classification, the ITS region of four isolates of M. ulei collected in Bahia State were sequenced to resolve its phylogenetic position using parsimony and maximum likelihood methods. Complementary sequences were obtained from the GenBank. M. ulei did not form a monophyletic group with neither Comminustispora agavaciensis (anamorph: Hyphospora agavaciensis) that belongs to the Plasnistromellaceae nor with other species of Fusic/adium. There was strong evidence from both phylogenetic methods that M. ulei belongs to the Mycosphaerellaceae. Financial Support: FAPEMIG; Plantações Michelin da Bahia. S191

XLIICongresso Brasileiro Fitopatologia Micologiaainfo.cnptia.embrapa.br/digital/bitstream/item/200665/1/...XLIICongresso Brasileiro de Fitopatologia Micologia 662 663 Crescimento micelial

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XLIICongresso Brasileiro de Fitopatologia Micologia

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Crescimento micelial e esporulação de Bipo/ari bicolor doaçaizeiro em diferentes meios de cultura e regimes deluminosidade. Silva, JC1;Torres, DB1;Silva, A1; Lustosa, D.C.1; Silva,GB1. Laboratório de Microbiologia Agrícola/Instituto de CiênciasAgrárias. CEP: 66077-530, Montese, PA, Brasil. [email protected]. Mycelial growth and sporulation of Bipo/ari bicotor 01açaizeiro in dilferent culture media and lighting schemes.

A ocorrência de Bipolaris bicolor atua como fator limitante na culturadoaçaizeiro (Euterpe o/eraceae) em terra firme. Este trabalho teve porobjetivo verilicar a influência do meio de cultura e luminosidade nocrescimento micelial e esporulação de B. bicolor. O delineamento foiDIC,com quatro tratamentos e cinco repetições. Os tratamentos foramT1L1(meio BDA, fotoperíodo 12 h);T1L2 (BDA-12 h de luz branca/12h de luz negra); T2L 1 (meio Czapeck, fotoperíodo 12 h) e T2L2(Czapeck-12 h de luz branca/12 h de luz negra). Em placas de Petride plástico, contendo meio de cultura, loram semeados discos de mi-célio, e acondicionadas em cãmara de crescimento, à temperatura de25°C. Foi avaliado o crescimento radial diário, e no 6° dia a esporula-ção. O Tratamento T1 L1 diferiu significativamente dos demais trata-mentos quanto ao crescimento micelial. Enquanto que, a variávelesporulação, não apresentou dilerença significativa entre os meios eperíodos de luminosidade. Porém T1L2 apresentou uma tendência amaior esporulação. Apoio Financeiro: CNPq/Rede CT_Petro.

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Germinação conidial in vitro de Microcyc/us ulei (Fusic/adiummacrosporum) causador do mal-das-folhas da seringueira.Oliveira, TAS1; Cardoso, SEA2; Mattos, CRR2; Blum, LEB1. lDep.Fitopatologia, UnB, Brasília, DF, 2Plantações Michelin da Bahia,Ituberá, BA. E-mail: [email protected]. /n vitro conidialgermination of Microcyclus ulei (Fusic/adium macrosporum) the causalagent of South American leaf blight 01 the rubber tree.

O mal-das-folhas (Microcyc/us u/e/) da seringueira (Hevea brasi/iensis)é o maior responsável por perdas nas áreas de cultivo no Brasil. Sen-do Fusic/adium macrosporum o estádio anamórfico-conidial a fasemais infectiva do fungo. Portanto, testou-se a germinação de esporosin vitro de três isolados (PMB21, PMB22, PMB23) do fungo. Os coní-dios loram coletados em folhas com sintomas da doença. As suspen-sões conidiais foram preparadas em solução de tween 80 (0,05% emágua destilada e esterilizada) e ajustadas à concentração para 2,0 x105 conídios/ml. Após o ajuste da suspensão, pipetou-se 0,5 ml eespalhou-se, em placa de Petri contendo meio Agar-água solidilicado.Foram realizadas quatro repetições, para cada isolado. A avaliação dopercentual de germinação foi leita ao microscópio óptico, após 1, 2, 3,4,5,6,7,8,9 e 10 horas de incubação a 24°C, contando-se o númerode esporos germinados e não-germinados. Utilizaram-se, para calcu-lar a percentagem de conídios germinados, as médias das áreasobservadas aleatoriamente em cada repetição. Os valores médios degerminação conidial após 10 horas de incubação loram semelhantes,97,2% para o isolado PMB21, 97,0% para PMB23 e 96,4%paraPMB22. Apoio Financeiro: PMB, CAPES.

Tropical Plant Pathology 34 (Suplemento), agosto 2009

Variabilidade genética de Cryptosporiopsis spp., causador dapodridão "Olho-de-boi" em macieira. Russi, A1; Comparim, CC2;Bogo, A2; Sanhueza, RMV3; Ritschel, PSl 1Embrapa Uva e Vinho,Bento Gonçalves, RS, Brasil; 2Universidade do Estado de SantaCatarina-UDESC, Lages, SC, RS, Brasil; 3Centro de PesquisaProterra, Vacaria, RS, Brasil. [email protected]. Geneticvariability of Cryptosporiopsis spp., causal agent 01 apple bulls eye rol.

A cultura da macieira é afetada pela podridão "Olho-de-boi", causadapelo fungo Cryptosporiopsis spp. Este trabalho teve por objetivoavaliar a variabilidade de 23 isolados de Cryptosporiopsis spp., cole-tados no Sul do país. Para gerar polimorfismos na região ITS loi utili-zada a digestão com nove enzimas de restrição. Também foram anali-sados polimorfismos resultantes da amplilicação de 114 fragmentoscom a utilização de 25 iniciadores RAPD. Na análise da região ITSnão foram observados polimorfismos. A análise RAPD permitiu adistinção de três grupos, dois bastante próximos, que incluíram oisolado cp8, coletado em Vacaria-RS. Um terceiro grupo, distante dosdois já mencionados, incluiu cinco isolados, entre eles o isolado cp5,coletado em Fraiburgo-SC. A análise morfológica e o sequenciamentodo gene da B-tubulina confirmaram que o isolado cp5 apresenta98,7% de semelhança em relação ao isolado cp8, sugerindo a ocor-rência de duas espécies bastante relacionadas do fungo Cryptospo-riopsis spp no Sul do Brasil. Os fragmentos ITS serão sequenciadospara confirmar a ausência de polimorfismos nesta região.

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Phylogenetic relationships of Microcyc/us ulei based on the ITSregion. Hora Júnior, BT1 Oliveira, SASl, Maflia, LA1; Mizubuti, ESG1.Depto de Fitopatologia/UFV, CEP: 36570-000, Viçosa, MG, Brasil. E-mail: [email protected]. Relações filogenéticas da espécieMicrocyclus ulei com base na análise da região ITS.

Molecular phylogenetic studies based on the ITS rDNA region havebeen a uselul approach to understand the evolutionary relationshipsamong species and to provide additional characters to the classificationof fungi. Microcyclus ulei (anamorph: Fusicladium macrosporium)causes the South American Leal Blight, an important disease of rubbertree (Hevea sp.), and used to be classified in the Mycosphaerellaceaefamily. However, based on a re-assessment of morphologicalcharacters, it was placed in the Plasnistromellaceae lamily. Due to thelack of DNA sequence data for this new classification, the ITS region offour isolates of M. ulei collected in Bahia State were sequenced toresolve its phylogenetic position using parsimony and maximumlikelihood methods. Complementary sequences were obtained from theGenBank. M. ulei did not form a monophyletic group with neitherComminustispora agavaciensis (anamorph: Hyphospora agavaciensis)that belongs to the Plasnistromellaceae nor with other species ofFusic/adium. There was strong evidence from both phylogeneticmethods that M. ulei belongs to the Mycosphaerellaceae. FinancialSupport: FAPEMIG; Plantações Michelin da Bahia.

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