0410113: DIVERSIDADE BIOLÓGICA E FILOGENIA

AULA PRÁTICA 2) Alveolados: Apicomplexos

Objetivo: Ananlisar dois gêneros de apicomplexos parasitas de invertebrados Gregarina e

Monocystis visando identificar algumas das fases do ciclo de vida.

Material 1 -Gregarina sp. Parasita intestinal de larvas e adultos de artrópodes. Nesta prática serão utilizadas as larvas do besouro do gênero Tenebrio.

Coloque sobre uma lâmina, uma ou duas gotas da solução previamente preparada quecontém gregarinas. Cubra a preparação com lamínula e observe ao microscópio, inicialmentecom aumento menor e depois com aumentos maiores (não use a objetiva de 100X).

Procedimento para isolar as gregarinas (Se quiser realizar esse procedimento peçaao técnico)

Pega-se uma larva de tenébrio. Com lâmina de barbear corta-se a cabeça; segurando ocorpo da larva com uma pinça, puxa-se, com outra pinça, a extremidade posterior, de modo aretirar o intestino e demais partes do sistema digestório; esse material é colocado numa lâminajuntamente com gotas de solução fisiológica; sob lupa, o intestino é isolado do restante do tubodigestório e aberto a partir da extremidade posterior com auxílio de estiletes ou agulhas; sepresentes, as gregarinas vão sendo liberadas junto com as massas fecais e secreções; asgregarinas são, então, separadas do material mais grosseiro e colocadas na solução fisiológica.

Ao mesmo tempo em que observa o material ao microscópio, procure identificar quaisfases do ciclo de vida da gregarina estão presentes na preparação. Para isso, compare o que estáobservando com o esquema do ciclo de vida desses apicomplexos (Figura 1). Aproveite essemomento para entender os processos que ocorrem nesse ciclo.

Faça um esquema dos tipos morfológicos que conseguiu observar, identificando-os.

O corpo do trofozoíto adulto apresenta, pelo menos, duas regiões distintas: o protomerito e o deutomerito. Reconheça-as, denominando-as. Em qual delas se localiza o núcleo?

Reconheça também no trofozoíto a presença de ecto- e endoplasma: o ectoplasma é aregião mais externa e clara do citoplasma e o endoplasma mais interna, densa e com granulações.

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Figura 1: Esquema do ciclo de vida de Gregarina.

Material 2- Monocystis sp. Gregarinídios podem ser também encontrados no interior das vesículas seminais de minhoca, como naquelas do gênero Pheretima (Pheretima hawayana é uma espécie de minhoca freqüente em locais cultivados e também conhecida popularmente como "minhoca louca"). Geralmente esses gregarinídios prestam-se para observarmos estágios da gamogonia e esporogonia.

Pegue algumas gotas de uma solução salina (0,45 %) na qual foram dissociadas as vesículasseminais de algumas minhocas. As gotas deverão ser depositadas sobre lâmina de vidro. Cubra apreparação com a lamínula e leve-a ao microscópio. Se houve infestação com o parasita você oobservará, além dos espermatozóides em formação das próprias minhocas.

Ao mesmo tempo em que observa o material ao microscópio, procure identificar quaisfases do ciclo de vida do Monocystis estão presentes na preparação. Para isso, compare o queestá observando com o esquema do ciclo de vida desses apicomplexos (Figura 2). Aproveite essemomento para entender os processos que ocorrem nesse ciclo.

Desenhe as formas parasitárias encontradas, indicando-as.

As formas mais comuns, presentes na preparação, correspondem aos trofozoítos,gamontes e esporocistos.

Citóforo

2n

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Os trofozoítos quando estão na fase final de sua formação, aparecem como célulasgrandes e livres na solução. Quando estão em fase de crescimento, encontram-se no interior docitóforo (massa central de citoplasma) da "blástula ou mórula espermática" (agregados de célulasainda não perfeitamente individualizadas e que podem ser espermatogônias - 8 a 16 células -,espermatócito I - 32 células -, espermatócito II - 64 células -, espermátides - 128 células -, ouespermatozóides - cauda ou flagelo presente); reconhece-se pelo movimento metabólico dotrofozoíto. Aqueles que permanecem imóveis podem, geralmente, ser reconhecidos pela presençado núcleo no interior da célula (região mais clara e esférica).

Os gamontes em sizígia, apresentam-se lado a lado, ou já envoltos pelo gamontocisto.

Formações transparentes e cheias de corpúsculos ovóides (em forma de pequenoslimões), correspondem ao gamontocisto com os esporocistos.

Figura 2: Esquema do ciclo de vida de Monocystis

Agora que já analisou os dois materiais, responda:1- Qual a função da solução fisiológica nas preparações?2- Esses organismos apresentam organelas relacionadas com a osmorregulação, como

vacúolos pulsáteis (ou contráteis)? Explique.3- Diferencie esporocisto de esporozoíto. 4- Qual a função dos trofozoítos, esporozoítos e gamontes? 5- Em qual etapa do ciclo ocorre a meiose?