GUIA DE PRACTICA BIOQUIMICA UNID.pdf

8/10/2019 GUIA DE PRACTICA BIOQUIMICA UNID.pdf

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CARRERA ACADMICO PROFESIONAL DEFARMACIA Y BIOQUMICA

GU DE PRCTIC

DE BIOQUMIC

Docentes Responsables:

Dr. Q.F. Mario A. Bolarte Arteaga.Dr. Q.F. Enrique A. Len Meja.

Apellidos y Nombres:

..

Horario de Prctica:

Mesa de Trabajo:

2014


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GUA DE PRCTICA DE BIOQUMICA

PROGRAMACIN DE PRCTICAS

PRCTICA DESARROLLO

PRCTICA 01 Determinacin de pH en fluidos biolgicos

PRCTICA 02 Enzimas y Actividad enzimtica.

PRCTICA 03 Obtencin de DNA de bazo.

PRCTICA 04 Introduccin a la Espectrofotometra

PRCTICA 05 Determinacin de Glucosuria.

PRCTICA 06 Determinacin Cuantitativa de Glucosa en sangre.

PRCTICA 07 ndice Glicmico y Glucosa Postprandial.

PRCTICA 08 Determinacin Cuantitativa de Colesterol.

PRCTICA 09 Determinacin cuantitativa de Triglicridos

PRCTICA 10 Determinacin cuantitativa de Protenas Totales y

Albmina en SueroPRCTICA 11 Determinacin cuantitativa de Urea en Orina.

PRCTICA 12 Medidas Antropomtricas


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NORMAS PARA EL USO Y TRABAJO EN EL LABORATORIO

1. Realizar las prcticas de laboratorio con el debido inters y responsabilidad.2. Presentarse vestido correctamente con su correspondiente guardapolvo y distintivo de

la Universidad.3. Poner maletines y mochilas en el estante, llevar a las mesas solo lapiceros y cuadernos.

4. Est terminantemente prohibido beber o comer dentro del laboratorio.5. Leer cuidadosamente la gua de prctica y tener en cuenta las indicaciones de los

profesores de prctica sobre el uso del material y equipos de laboratorio, as como elorden, limpieza y seguridad que debe mantenerse.

6. Por cada prctica de laboratorio cada mesa de trabajo presentar un nico informe, el cualconsta de las siguientes partes:- Cartula.- Objetivos.- Marco Terico.- Desarrollo Experimental.-

Discusin de los resultados.- Conclusiones.- Cuestionario.- BibliografaDicho informe se presentar en la siguiente prctica en el horario y grupo respectivo.

7. El inicio de la prctica es en la hora exacta programada. Se tendr una toleranciade 10 minutos, luego de ese lapso de tiempo no se podr ingresar al laboratorio, por lotanto se le considerar como una inasistencia y no tendr derecho a nota de informe deprcticas.

8. Las inasistencias en las prcticas no son recuperables en ninguno de los grupos,

calificndose al alumno con nota cinco (05). Aquel alumno que acumule 30% deinasistencias no tiene derecho a nota prctica.9. Cada alumno ser integrante de una mesa de trabajo, a la cual pertenecer a lo largo

del semestre acadmico.10. Por mesa de trabajo, ser nombrado un responsable que se har cargo del material y

equipos recibidos as como de la presentacin de los informes.11. En caso de dao, deterioro o prdida del material y/o equipos, el responsable de mesa

informar del hecho al profesor de prcticas, TODO GRUPO ES RESPONSABLE DEL DAOCAUSADO, y deber repararlo a la brevedad posible, no ms de una (01) semana despusdel incidente.

12. Al final de la prctica, se proceder a limpiar el material usado, con el fin de entregarlo enlas mismas condiciones en las que fueron recibidos, caso contrario se le descontar unpunto en la nota de informe a todo el grupo.

13. Una vez limpio el material, el responsable de mesa lo devolver a la persona encargada dellaboratorio.

14. El laboratorio deber quedar completamente limpio, las mesas secas y limpias, debiendoarrojar todos los desechos al tacho de basura.


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PRCTICA 01:

Determinacin de pH en f lu idos biolgicos

COMPETENCIAS:

Aplica los conceptos fundamentales sobre el pH. Utiliza las tcnicas para medir el pH.

MATERIALES Y EQUIPOS:

POTENCIMETRO ANARANJADO DEMETILO

BURETA 25ML ESTANDAR DEpH 10

PIPETA 1ML

BEACKER 100ML PAPEL DE TORNASOLAZUL

SOPORTEUNIVERSAL

AC. ACTICO0,1N

PIPETA 2ML

MATRAZ 100ML PAPEL DE TORNASOLROSADO

PINZA PARABURETA

NA(OH) 0,1 N PIPETA 5ML

ESTANDAR DE pH4

INDICADOR DE pH 1-14 TUBOS 13X100ML AGUADESTILADA

PIPETA 10ML

ESTANDAR DE pH7

GRADILLAS VASODESCARTABLE

FENOLFTALEINA HCL 0,1N

FUNDAMENTO TERICO:

METODOS DE DETERMINACION DEL pH:

Existen varios procedimientos:

Mediante indicadores.

Mediante cintas o papel de pH universal. Mediante el potencimetro o pHmetro.

DETERMINACION DEL pH MEDIANTE EL USO DE INDICADORES:

Indicadores.-Son soluciones o cuerpos qumicos que se agregan a los lquidos para dosar,con el fin de ver el momento preciso del trmino de la reaccin; manifestndose por laaparicin, desaparicin o modificacin del color.


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DETERMINACIN DEL pH MEDIANTE EL USO DEL PAPEL INDICADOR:

Papel Indicador: Es un papel especial que contiene absorbidos indicadores en serie o a lolargo, que al ponerse en contacto con la solucin a evaluar da un color que corresponde alpH aproximado de la solucin problema.

DETERMINACIN DE pH MEDIANTE EL POTENCIMETRO O pHMETRO:

Se fundamenta en la generacin de una diferencia de potencial que se establece cuandose emplean dos soluciones ionizadas de diferente concentracin en las cuales se hacepasar una corriente elctrica, es decir la diferencia de potencial es proporcional a ladiferencia de concentracin(es) entre las soluciones.

METODO OPERATIVO:

1. Identificacin de pH con Papel Tornasol:

Con la ayuda de un gotero o una bagueta coloca en una placa de toques unas gotas decada muestra.

Enfrenta la solucin al papel de tornasol (rojo/azul) y tabula tus resultados.

2. Identificacin de pH con Reactivo Indicador de Fenolftalena:

En tubos de ensayo coloca 01 mL de muestra problema y dilyela con 01 mL de aguadestilada.

Adiciona a cada tubo II gotas de Reactivo Indicador de Fenolftalena. Tabula tus resultados.

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10

Papel Rojo

Papel Azul

NATURALEZA

cido / Base

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10

Resultado(IncoloroGrosella)

NATURALEZAcido / Base


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3. Identificacin de pH con Papel Indicador 1-14:

Con la ayuda de un gotero o una bagueta coloca en una placa de toques unas gotas decada muestra.

Enfrenta la solucin al Papel Indicador y con la ayuda de la cartilla de referenciaidentifica la naturaleza cida o bsica de las soluciones. Tabula tus resultados.

4.- Identificacin de pH con el uso del pHmetro.

Con los estndares de pH verifica la calibracin del pHmetro. En un beacker limpio y seco, coloca una muestra de 150 mL de orina y sumerge el

electrodo del pHmetro. Anota el pH de la muestra y comprala con los resultados anteriores.

Cuestionario

1.-Mencione el pH normal de: Sangre, orina, lquido seminal, lquido cefalorraqudeo, lquidoamnitico, saliva y su correlacin con alguna patologa.

M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7 M8 M9 M10

ResultadoNumrico

NATURALEZAcido / Base


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PRCTICA 02:

Enzimas y Actividad enzimtica

COMPETENCIAS:

Identifica la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales. Relaciona la accin de la temperatura con la actividad enzimtica. Identifica la accin hidroltica del enzima amilasa.

MATERIALES Y EQUIPOS:

GRADILLASTUBOS DE ENSAYOMECHERO

PIPETA 2 MlPIPETA 5 mLBEACKER 250 mLTRIPODEMALLA DE ASBESTOBURETAPROPIPETATROZOS DE PAPA

TROZOS DE HGADO DE POLLOMORTERO Y PILONPEROXIDO DE HIDRGENO

AGUA DESTILADABEACKER 50 Ml

ACIDO CLORHIDRICO 0.5 NARENA FINASOLUCION DE ALMIDON 1%REACTIVO DE LUGOLREACTIVO DE BENEDICTPINZA DE MADERA

FUNDAMENTO TERICO:

Las enzimas son molculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones qumicas,siempre que sea termodinmicamente posible. En estas reacciones, las enzimas actansobre una molcula denominada sustrato; las cuales se convierten en molculasdiferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en la clula necesitanenzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas porenzimas se les denomina reacciones enzimticas.

METODO OPERATIVO:

1. RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA:

La catalasa es un enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos animales yvegetales.

La funcin de sta enzima en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismocelular, se forma una molcula txica que es el perxido de hidrgeno. (H2O2)


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Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y oxgeno, por lo que se solucionael problema.

La reaccin de la catalasa es la siguiente:

La existencia de la catalasa en los tejidos animales, se aprovecha para utilizar el aguaoxigenada como desinfectante cuando se echa sobre una herida. Como muchasbacterias son anaerbicas (no pueden vivir con oxgeno), mueren con eldesprendimiento de oxgeno que se produce cuando la catalasa de los tejidos actasobre el agua oxigenada.

DESARROLLO:

Rotula tres tubos de prueba con las letras A,B y C.

Colocar en el tubo A un pedazo de hgado del tamao de un frijol, en el tubo Bun tamao similar de papa y en el C arena.

Anadir 03 mL de agua oxigenada a cada tubo. Observa, anota e interpreta los resultados.

2. REUTILIZACIN DEL ENZIMA:

Rotula dos tubos con las letras D y E. Sacar 02 mL del sobrenadante del tubo A.

Verter 01 mL de dicho sobrenadante en D y 01 mL en E. Anadir al tubo D un pedazo de hgado fresco y al tubo E 01 mL de agua

oxigenada. Observa, anota e interpreta los resultados.

3. DESNATURALIZACION DE PROTENAS:

Colocar en un tubo de ensayo un trocito de hgado entero.

Poner el tubo a bao mara con agua en ebullicin durante 05 minutos. Retirar el tubo Aadir 02 mL de agua oxigenada.

Observar anotar e interpretar los resultados. Repetir la experiencia con papa.


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REACCIN DE BENEDICT.

TUBOS 01 02

DIGERIDO 1 01 mL -

DIGERIDO 2 - 01 mL

RVO. BENEDICT 0.5 mL 0.5 mL

Colocar a Bao de agua hirviente por 05 minutos. Observe, anote e interprete losresultados.

CUESTIONARIO

1. Cules son los productos finales de la digestin del almidn por la amilisa?2. Qu funcin cumple el HCl 0.5 N en el tubo de digestin?


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PRCTICA 03:

Obtencin de DNA de bazo.

COMPETENCIA:

Extrae DNA del bazo.

MATERIALES:

SOLUCIN DE CITRATO 0.01 MSOLUCION DE NaCl 0.14 M.CENTRIFUGA

TUBOS DE CENTRFUGAHIELO SECOSOLUCIN DE NaCl 2.6 M.

ALCOHOL ETILICO 95 %BAGUETASBEACKER 250 mLBEACKER 50 mLGRADILLA

PAPEL FILTROARO DE METALSOPORTE UNIVERSALPINZA Y NUEZ.EQUIPO DE DISECCIN.LICUADORA.

EMBUDO DE VIDRI


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FUNDAMENTO TERICO:

Cuando se desea purificar una sustancia se deben seleccionar las clulas o tejidos quese van a utilizar como materia prima. En el caso del DNA esta seleccin es en especialimportante porque el contenido de DNA es pequeo en la mayor parte de las clulas. La clula

ideal ser aquella que tenga una relacin ncleo/citoplasma alta,como en los linfocitos yclulas del tumor asctico de Ehrlich. Sin embargo, no es fcil obtener este tipo de clulaspor lo que frecuentemente se usan rganos tpicamente linfoides como el timo y el bazo.

El primer paso en la extraccin del DNA es la homogeneizacin del tejido. Este

paso puede degradar en parte la molcula del DNA si no se toman las precaucionesnecesarias, la solucin reguladora es de citrato 0.01M y NaCl 0.14M, a pH de 7.2 a 7.4; lafuerza inicade esta solucin hace insolublea la desoxirribonucleoprotena. Si se centrifugaeste homogeneizado, en el residuo quedarn los restos celulares y lasdesoxirribonucleoprotenas insolubles. En el sobrenadante se encuentran compuestos

solubles como la mayor parte de los cidos ribonuclicos.

Al homogeneizar el tejido se liberan las enzimas de los lisosomas, entre ellas laDNAasa, la cual hidroliza el DNA. Se sabe que el Mg++es indispensablepara la actividad deesta enzima; si en la solucin existe citrato, ste se une al Mg++e impide la accin de laDNAasa. Otra forma de evitar la accin hidroltica de la enzima es trabajar a temperaturasbajas(0C a 2C).

El siguiente paso en la purificacin est basado en que lasdesoxirribonucleoprotenas y el DNA son solubles en soluciones salinas concentradas ,

mientras que la mayor parte de las protenas precipitan en estas condiciones. Si el residuo sesuspende en solucin de NaCl 2.6M y se centrifuga, el residuo insoluble estar formadofundamentalmente por protenas, mientras que el DNA permanecer en solucin. Este DNAse puede precipitar selectivamente por la adicin selectiva de 2 volmenes de alcohol etlicoal 95%formndose un precipitado blanco fibroso, el cual se puede recoger por rotacin de un

agitador de vidrio con pequeos salientes.

METODO OPERATIVO:

La muestra de bazo se coloca en un mortero, previamente enfriado y se secciona loms finamente posible con una tijera. Se colocan 450 mL de la solucin reguladora decitrato 0.01M NaCl 0.14M, a pH de 7.2 fra, en una licuadora cuyo vaso haya sidopreviamente enfriado.

Se hace funcionar la licuadora a baja velocidad y se van aadiendo los trozos de bazode todos los equipos, esperando a que se homogeneice completamente el primeroantes de aadir el segundo y as sucesivamente.

Una vez terminada la adicin, contine homogeneizando por 30 60 segundos ms.


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Utilizando la centrifuga automtica refrigerada, se coloca el homogeneizado en tubos decentrfuga apropiados teniendo cuidado de tarar perfectamente los tubos opuestos.PRECAUCIN! (CONSULTE AL PROFESOR).

Se centrifuga por 15 minutos a 5 000 rpm. El sobrenadante se desecha.

El residuo insoluble se lava en el mismo tubo con 15 mL de citrato 0.01M NaCl 0.14M,

pH 7.2, agitando hasta volver a resuspender con ayuda de una varilla de vidrio, si esnecesario.

Se vuelve a centrifugar a 5 000 rpm por 5 minutos y el sobrenadante se desecha.

Al residuo insoluble que contiene el DNA y residuos celulares se le aaden 15 mL deNaCl 2.6M fro y se homogeneiza por agitacin.

El cido desoxirribonuclico es soluble en esta solucin mientras que la mayor parte delas protenas son insolubles.

Centrifugue a 8 000 rpm por 30 minutos. El lquido sobrenadante contiene el DNA ensolucin y el sedimento, que contiene restos celulares y protenas insolubles, sedesecha.

La solucin salina sobrenadante se coloca en un vaso de precipitados y se aadenlentamente dos volmenes de alcohol etlico al 95%, procurando que la fase alcohlicaquede en la parte superior.

Se deber observar la formacin de un precipitado blanco, denso, en la interfase.Utilizando un agitador con pequeos salientes, agite esta mezcla lentamenteprocurando enrollar sobre el agitador las fibras del DNA precipitadas.

CUESTIONARIO

1. Explique por qu se utiliz bazo como materia prima y no otro rgano cualquiera.2. Sera conveniente utilizar solucin reguladora de fosfatos para la extraccin del DNA?

Por qu?

3. Por qu es conveniente trabajar durante toda la extraccin a baja temperatura?


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Donde:

Io = Intensidad de la luz incidente.I = Intensidad de la luz transmitida.E = Coeficiente de extincin molar, valor constante dependiendo de la naturaleza de la

Sustancia y de la longitud de ondaI = Espesor del recipiente en cm.C = Concentracin de la solucin.

A = D.O. = Absorbancia (A) aumenta conforme disminuye la Transmitancia (T) y larelacin entre ambas es logartmica.

CALCULO DE LA CONCENTRACIN DE UNA SOLUCION PROBLEMA:

Para calcular la concentracin de una solucin problema con el empleo de unEspectrofotmetro, existen dos formas:- Mtodo de la curva standard o curva de calibracin.- Factor de calibracin.

a) CURVA STANDARD.- Este mtodo consiste en utilizar varios estndares deconcentraciones conocidas y progresivas para luego construir un grfico en un sistemade coordenadas en el que se colocan las lecturas en las ordenadas (Eje Y) y lasconcentraciones en las abscisas (Eje X). En la recta obtenida (Funcin lineal), se puede

extrapolar la absorbancia o densidad ptica de la muestra problema, hallando laconcentracin de la misma en el eje de las abscisas.

b) FACTOR DE CALIBRACIN.-(Fc), El factor de calibracin es un trmino que serelaciona con la concentracin de una sustancia con su absorbancia, es decir laintensidad que absorbe una sustancia de concentracin conocida (Standard o Patrn).

As tenemos:

Fc = [ Standard ] / A

Donde:Fc = factor de calibracin.

A = absorbancia del tubo standard.[Standard] = concentracin del standard.


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Con el factor de calibracin se puede fcilmente determinar la concentracin de unamuestra desconocida o problema (MP), conociendo su absorbancia.Si la muestra problema y el standard son procesados de la misma manera (diluciones)

se podr usar directamente la siguiente frmula:

[ MP ] = A. Fc

Si la muestra problema sufre diluciones previas se encontrar el factor de dilucin (Fd)que es matemticamente la inversa de la dilucin (dil) y esta a su vez es:

Dil = Vol / Vol o

Donde:Vol = Volumen de la muestra problema tomada para hacer la dilucin.Vol o = Volumen total.

Para este segundo caso cuando se quiere saber la concentracin de una muestraproblema se proceder usando la siguiente frmula:

[ MP ] = A. Fc. dil

Donde:A = Absorbancia de la muestra problema.Fc = Factor de calibracin.Dil = Factor de dilucin.[MP] = Concentracin de la muestra.


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EXPERIMENTO

1. Preparar la siguiente batera de tubos:

Solucin stock: Bicromato de Potasio 80 mg%.Calcular la concentracin en mg% de bicromato de K en cada uno de los tubosStandard (I-II-II-IV).

Leer las absorbancia de los cuatro tubos a 350 nm de longitud de onda () en elespectrofotmetro contra el H2O destilada (Abs. H2O=0).

2. Con los datos obtenidos construir en un papel milimetrado la grfica deabsorbancia en el eje de las Ordenadas vs concentracin de bicromato de K en eleje de las Abscisas.

3. Una vez obtenida la curva de calibracin, medir la absorbancia de la muestraproblema (Problema X).

4. Obtener el factor de calibracin (Fc) promedio con las soluciones standard y susAbsorbancia utilizadas para construir las curvas de calibracin ajustadas.

5. Calcular la concentracin de la muestra problema por los siguientes mtodos:A.- Grficamente extrapolando su absorbancia en la curva de calibracin.B.- Usando Factor de Calibracin, multiplicando su absorbancia por el factor de

calibracin del standard.

CUESTIONARIO:

1.- Explique el mecanismo de funcionamiento de un espectrofotmetro.

2.- Qu diferencias existen entre un fotocolormetro y un espectrofotmetro?.3.- Grafique el espectro de luz, tanto en el rango visible como no visible con sus

respectivas longitudes de ondas.4.- Qu relacin matemtica existe entre Absorbancia y Transmitancia?


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5.- Construya una curva de calibracin con los siguientes valores:

Con la curva obtenida hallar la concentracin de las siguientes muestras, sabiendo quesus absorbancia fueron:Muestra A........................0.015Muestra B........................0.125Muestra C........................0.350


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CUESTIONARIO:

1.- Qu es la diabetes Mellitus y como se diagnostica desde el punto de vista dellaboratorio?

2.- Explique en qu consiste el umbral renal y la tasa de reabsorcin de laglucosa.

3.- Describa los mtodos que existen para el dosaje de la glicemia.4.- Explique el mecanismo de accin de los reactivos de Benedict y de Fehling.5.- Qu son la hemoglobina glicosilada y la fructosamina y cul es su importancia en la

diabetes?

PRCTICA 06:


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Determin acin Cuant i tat iva de Gluco sa en sangre.

FUNDAMENTO TERICO

Como se ha indicado, la diabetes dependiente de insulina cursa con un aumento de la

concentracin de glucosa en sangre (glicemia), que se produce de manera repentina yadems es severa. Una hiperglucemia superior a 124 mg/dl detectada en ms de unaocasin en ayunas, adems se considera tambin un valor mayor a 200 mg/dl encualquier momento son indicativos de posible diabetes, diagnstico que debeconfirmarse con otras pruebas.La determinacin de glucosa sangunea es una prueba muy frecuente en bioqumica yse puede llevar a cabo tanto por mtodos qumicos como enzimticos, siendo estosltimos los ms especficos.

Hay dos tipos de mtodos qumicos:

a. Reducimtricos, que se basan en la capacidad reductora de la glucosa. Debido a lapresencia en la muestra de otros compuestos reductores, estos mtodos dan cifrassuperiores a las correspondientes a la glucosa verdadera. Ejemplos son el mtodo deFolin-Wu y el de Somogy-Nelson.b. Furfurlicos: se basan en la capacidad de la glucosa para formar furfural al sufrirdeshidratacin en un medio cido. Un ejemplo es el mtodo que emplea orto-toluidina.

En cuanto a los mtodos enzimticos:

a. Mtodo de la hexoquinasa: emplea las enzimas hexoquinasa y glucosa-6-fosfatodeshidrogenasa. Por cada molcula de glucosa se forma una de NADPH, que puedemedirse espectrofotomtricamente a 340 nm. Es el mtodo de referencia recomendadopor las organizaciones internacionales.b. Mtodo de glucosa oxidasa y peroxidasa (GOD-POD): es el que se utiliza en estaprctica para medir los niveles de glucosa sangunea de la muestra problema y de losestndares. Se explica a continuacin:

En el mtodo GOD-POD, en un primer paso la glucosa oxidasa cataliza la oxidacin dela D-glucosa a cido D-glucnico con formacin de perxido de hidrgeno. ste esutilizado por la peroxidasa para oxidar a la 4-aminofenazona y al fenol, dando lugar auna quinonaimina coloreada. La intensidad de color ser proporcional a laconcentracin de glucosa presente inicialmente. El esquema de la reaccin es elsiguiente:


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MATERIALES Y REACTIVOS

Tubos de ensayo de 10 ml. Pipetas. Espectrofotmetro. Agua destilada. Solucin patrn de glucosa (100 mg/dl). Reactivo de color de glucosa, que contiene: Glucosa oxidasa, peroxidasa, 4-

aminofenazona, fenol, tampn fosfato pH: 7.0

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL :

La muestra de sangre extrada del paciente ser centrifugada y se separar el suero.

Hacer una dilucin del suero midiendo exactamente en un tubo de ensayo 0.2 ml desuero y agregar 4.8 ml de agua destilada, mezclar hasta homogenizar. Luego sepreparan los siguientes tubos:


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Incubar los tres tubos en Bao Mara de 37C por 10 minutos. Mezclar bien la solucin.Leer las absorbancias en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULOS

Encontrar la concentracin de glucosa en la muestra utilizando el mtodo del factor decalibracin.

VALORES NORMALES

La glicemia normal en ayunas es de 70 a 110 mg/dl.


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PRACTICA 7:

NDICE GL ICMICO Y GLUCOSA POST PRANDIAL

Definicin de DMLa diabetes Mellitus es un grupo de enfermedades metablicas caracterizadas por lapresencia de hiperglucemia resultante de un defecto en la secrecin de insulina, en laaccin insulnica, o en ambas.

Clasificacin de DM

Diagnstico

Es muy importante el diagnstico temprano de la enfermedad debido a que niveleselevados de glucosa, an cercanos al lmite superior normal, producen daos en lamicrovasculatura de retina y rin


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Existen otras entidades fisiopatolgicas relacionadas con hiperglucemia que no llegan acumplir los criterios de diabetes pero que son muy importantes ya que deben servigiladas ya que estos pacientes presentan riesgo elevado de evolucionar a diabetes.

Estas son la tolerancia disminuida a la glucosa y la glucosa en ayunas anormal.Tolerancia disminuida a la glucosa es aquel caso cuando despus de una pruebade tolerancia con 75 g de glucosa se obtienen a las dos horas valores mayores a 140 ymenores a 200 mg/dl.La glucosa anormal en ayunas es aquel caso en que los valores en ayunas sonmayores a 110 pero menores a 126 mg/dl.


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Experimento A: TEST DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA Y GLUCOSAPOSTPRANDIAL

FUNDAMENTO TERICO

Las pruebas de tolerancia a la glucosa oral fueron utilizadas por mucho tiempo paradiagnstico de Diabetes Mellitus o intolerancia disminuida, pero ya no se utilizan derutina, pero si pueden servir tanto para la Diabetes como para la intolerancia.Importante es recalcar que los niveles importantes en ambos casos son los obtenidos alas dos horas, y que la cantidad de glucosa a ingerir debe ser de 75 gramos. El disolver75 gramos en por lo menos 300 ml de agua hace la solucin ms agradable al paladar ypor lo tanto tendrn ms aceptacin por parte del paciente.

En caso de la prueba de tolerancia de 75 gramos en adultos en nios se debe utilizaruna cantidad de glucosa correspondiente al peso del nio (1,75 g de glucosa por Kg depeso). Es de suma importancia recordar que antes de iniciar cualquier prueba detolerancia a la glucosa oral, se debe pedir una muestra de orina al paciente, parahacerle un anlisis cualitativo glucosa. Esto debido a que si el paciente presentaglucosuria, no se debe realizar la prueba de tolerancia, ya que la glucosuria indica en la

gran mayora de los casos, niveles sanguneos de glucosa elevados y la ingesta de altasconcentraciones de glucosa le podra provocar al paciente un shock hiperglicmico.Existen otras pruebas de tolerancia que son aceptadas tanto por la OrganizacinMundial de la Salud como por la American Diabetes Association, estas son lasrelacionadas con la Diabetes Mellitus Gestacional.

La curva de tolerancia a la glucosa para tamiz de la DMG consiste en la ingesta enayunas de 50 gramos de glucosa, se mide la glicemia a la hora, si los niveles sonmenores a 140 mg/dl se desecha la DMG, si los niveles son iguales o mayores a 140mg/dl se debe proceder a hacer la prueba confirmatoria para DMG. Esta consiste eningerir en ayunas 100 gramos de glucosa y hacer una curva de tres horas. Si dos de losniveles obtenidos en dicha curva sobrepasan los valores indicados en la siguiente tabla,se hace el diagnstico de DMG.


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La prueba de glucosa postprandial viene a ser una prueba de tolerancia a la glucosaacortada, donde solo se considera el valor basal y el de las dos horas.

MATERIALES Y REACTIVOS

Tubos de ensayo de 5 ml. Micro pipetas automticas de 10 ul. Espectrofotmetro. Solucin patrn de glucosa (100 mg/dl). Reactivo de color de glucosa, que contiene: Glucosa oxidasa, peroxidasa, 4-

aminofenazona, fenol, tampn fosfato pH: 7.0

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL :

Se determinar la glicemia en muestras obtenidas a una persona en forma basal, a los

30 min, 60 min y 120 min. Luego de tomar la muestra sangunea basal se le da detomar al paciente 75 gr de glucosa disuelto en 300 mL de agua con unas gotas delimn. Las muestras de sangre extradas de la persona sern centrifugadas y sesepararn los sueros. Para la determinacin de las glicemias se utilizar el mtodo dela glucosa oxidasaperoxidasa (GOD-POD).


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Incubar los tubos en Bao Mara de 37C por 10 minutos. Leer las absorbancias paracada una de los tubos en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULOS

Encontrar la concentracin de glucosa en cada una de las muestras utilizando elmtodo del factor de calibracin.

CUESTIONARIO:

1.- Con los datos de glicemia obtenidos en el experimento construir en un papelmilimetrado una grfica de tiempo vs. Glicemia y apreciar la curva de tolerancia a laglucosa.

2.- Como sera esta curva en el caso de una persona normal, un diabtico y unintolerante a la glucosa.

3.- Qu importancia tiene la deteccin de micro albuminuria en una persona?4.- Qu son y en qu casos se hace un dosaje de pptido C y de insulina en unpaciente diabtico.

5.- Cules son las complicaciones agudas y crnicas de la diabetes?


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PRACTICA N 8:

DETERMINACIN CUALITATIVA DE COLESTEROL

El nivel srico de colesterol ha sido objeto en los ltimos aos de numerosasinvestigaciones tanto en individuos sanos como enfermos.Desde un punto de vista mdico la determinacin de colesterol en forma aislada tieneutilidad diagnstica limitada. Sin embargo, su concentracin vara de manera ms omenos predecible en un gran nmero de condiciones clnicas. Se ha visto que elcolesterol es uno de los factores contribuyentes a la formacin de ateromas dado quelas complicaciones arterioesclerticas prevalecen en individuos hipercolesterolemicos.

Diversos estudios epidemiolgicos han permitido observar adems, que el riesgo decontraer enfermedad cardaca coronaria (ECC) para los individuos (varones de ms de40 aos) con colesterolemia menor igual a 200 mg% es 3 veces menor que entreindividuos con ms de 230 mg% y 6 veces menor que entre individuos con ms de 260mg%.

Sin embargo, actualmente se sabe que es necesario conocer adems la distribucin delas lipoprotenas encargadas del transporte: HDL (lipoprotenas de alta densidad),considerada como el factor protector y LDL (lipoprotenas de baja densidad),

consideradas como el verdadero factor de riesgo. Las funciones biolgicas inherentesa los distintos grupos de lipoprotenas, las variaciones en su composicin y losresultados de los diversos estudios epidemiolgicos, indican que los valores aislados decolesterol HDL y colesterol LDL no pueden tomarse como ndices predicativos de riesgo,sino que es necesario conformar un perfil Lipidico con los valores de colesterol total,colesterol LDL y colesterol HDL.


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CALCULO DE RESULTADOS:

Calcular la concentracin de colesterol total en suero, aplicando el mtodo del factor decalibracin.Recordar que la concentracin del standard de colesterol es de 200 mg%

VALORES DE REFERENCIA:

Los valores de colesterol en sangre fluctan segn edad, sexo y hbitos de dieta y deejercicio. Sin embargo, es preferible no hacer referencia a valores normales, pues la

norma promedio de una poblacin no necesariamente refleja ausencia de riesgopatolgico en el caso de colesterol.

Menos de 200 mg% valor deseable

200 a 239 mg% valor fronteraMayor de 240 mg% valor alto

Exper imento B :DETERMINACIN DE COLESTEROL HDL EN SUERO

FUNDAMENTOS DEL METODO:

Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente laslipoprotenas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de

Sulfato de Dextrn de PM 500,000 en presencia de iones Mg++.En el sobrenadante separado por centrifugacin, quedan las HDL y se realiza ladeterminacin del colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema msconveniente.

REACTIVOS:

REACTIVO PRECIPITANTE.- Contiene una solucin de Sulfato de Dextrn y deCl2Mg.H2O

PROCEDIMIENTO:En un tubo medir 0.5 ml de muestra y agregar 0.05 ml (50 ul) de Reactivo Precipitante.Homogenizar agitando (sin invertir) durante 20 segundos.Dejar 30-40 minutos en refrigeracin (4-10C). No colocar en el congelador.Centrifugar a 3000 rpm. X 03 minutosUsar el sobrenadante como muestra.


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En tres tubos colocar:

Incubar 15 minutos en Bao Mara a 37C.Leer en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULOS:

De acuerdo al mtodo del factor de calibracin, considerando que la concentracin delstandard es de 45.7 mg%.

VALORES NORMALES:

4065 mg%

Exper imento C:DETERMINACIN DE COLESTEROL LDL EN SUERO


Las lipoprotenas de baja densidad (LDL) se separan del suero precipitndolasselectivamente mediante el agregado de polmeros de alto peso molecular. Luego decentrifugar, en el sobrenadante quedan las dems lipoprotenas (HDL y VLDL), elcolesterol ligado a las mismas se determina empleando el sistema ms conveniente.Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtieneel colesterol unido a las LDL.

REACTIVOS:

REACTIVO PRECIPITANTE.- Solucin de sulfato de polivinilo disuelto en polietilenglicol(PM 600).

PROCEDIMIENTO:

En un tubo, colocar 0.2 ml (200 ul) de suero problema y aadir 0.1 ml (100 ul) deReactivo Precipitante.Homogenizar agitando (sin invertir) durante 20 segundos.Dejar 15 minutos en un bao de agua a 20-25C.Centrifugar a 3000 rpm. X 03 minutosUsar el sobrenadante como muestra.


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Incubar 15 minutos en bao de agua a 37C.Leer en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULOS:

LDL Colesterol = Colesterol total - (Abs muestra neta x factor de calibracin)La concentracin del standard es de 62.4 mg%.

VALORES NORMALES:

Riesgo bajo o nulo: Menor de 140 mg%Riesgo moderado: 140 a 190 mg%Riesgo elevado : Mayor de 190 mg%

CUESTIONARIO:

1.- Qu es RIESGO CORONARIO y como se calcula?

2.- Explique que diferencias hay entre la arterioesclerosis y la ateroesclerosis?3.- Describa como se produce la biosntesis de colesterol dentro del organismo.4.- Explique que es el colesterol VLDL y como se calcula.5.- Que rol cumplen los triglicridos y como se realiza su metabolismo.


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PRACTICA N 9:

DETERMINACIN CUANTITATIVA DE TRIGLICERIDOS

Los triglicridos forman la mayor parte del peso seco del tejido adiposo, constituyendo

por lo tanto una potente forma de almacenamiento de energa.El movimiento de cidos grasos entre los distintos compartimientos del organismo, seproduce con gran rapidez en respuesta a diversos estmulos (dieta, actividad fsica,

stress, edad, etc.). Por este motivo es de esperar que los triglicridos (uno de los msimportantes vehculos para el transporte de cidos grasos) varen tambin suconcentracin en respuesta a estos factores fisiolgicos.Sin embargo, el equilibrio de estos mecanismos puede verse alterado, conduciendo a

niveles anormales de triglicridos circulantes. La persistencia de esta condicin, seasocia con numerosas patologas, tales como enfermedad heptica, renal,

Hiperlipidemias esenciales, etc.Un caso que resulta de particular inters es el aumento de triglicridos en individuos

obesos, en los cuales tiene importancia pronostica, respecto a la probabilidad dedesarrollar enfermedad cardaca coronaria. Alrededor del 50% de los lpidos de laslesiones ateromatosas que ocurren en las arterias coronarias son triglicridos, por lo

que es posible relacionar a los triglicridos con la patognesis de la arteriosclerosiscoronaria. Este punto de vista est sustentado por el hecho de que un gran porcentajede pacientes con infarto de miocardio tambin exhiben Hipertrigliceridemia.

Para la determinacin de triglicridos en suero se usar la determinacin enzimtica deglicerol a partir de glicridos.Los mtodos enzimticos se basan en la determinacin del glicerol contenido en lasmolculas de los triglicridos, tras la hidrlisis (qumica enzimtica) para remover los

cidos grasos. La determinacin enzimtica del glicerol ha sido usada durante muchosaos; sin embargo, en estos mtodos se empleaba la hidrlisis alcalina de lostriglicridos. El reciente desarrollo del uso de enzimas (lipasa, usualmente combinadacon una proteasa) para catalizar la hidrlisis, ha posibilitado el empleo de mtodos

directos, rpidos y especficos. Los sistemas totalmente enzimticos eliminan el uso dereactivos custicos, extraccin con solventes, baos de altas temperaturas y mezclas

de adsorcin para la remocin de Fosfolpidos. Estudios recientes se han concentradoen desarrollar reactivos con lipasas, que hidrolizan completamente los triglicridos.


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Experimento A:DETERMINACIN DE TRIGLICERIDOS EN SUERO


Se producen reacciones qumicas basadas en la determinacin qumica de glicerol apartir de glicridos.La primera etapa consiste en que los triglicridos son hidrolizados enzimticamente poruna lipoprotena lipasa especfica, produciendo glicerol y cidos grasos.

Lipoprotena lipasaTriglicridos Glicerol + 3 cidos grasos

En una segunda etapa el glicerol se fosforila a glicerol-1-fosfato en presencia deglicerolkinasa.

Glycerol kinasaGlycerol + ATP Glicerol-1-P + ADP

En una tercera etapa el derivado fosforilado se oxida mediante la glicerol fosfatooxidasa (GPO), con produccin de agua oxigenada.

GPOGlicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato

Finalmente el agua oxigenada as formada produce la unin oxidativa del fenol y la 4-aminofenazona, en reaccin catalizada por la peroxidasa (POD), con formacin de unaquinonaimina roja.

POD2 H2O2 + 4-AF + clorofenol 4-(p-benzoquinona monoimino) fenazona + 4 H2O

REACTIVOS PROVISTOS:

- Standard: solucin acuosa de glicerol equivalente a 200 mg% de triglicridos.- Buffer: solucin de buffer conteniendo clorofenol a pH 7,5.- Enzimas:Viales conteniendo lipoprotena lipasa, glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato

oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).


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INSTRUCCIONES DE RECONSTITUCION Y MEZCLADO:

- Standard: listo para usar.- Reactivo de trabajo:

*5/10 x 20 ml: agregar 20 ml de Buffer a un vial de Enzimas.

Mezclar hasta disolucin completa. Homogenizar y fechar.*4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Enzimas con una porcin de Buffery luego transferir al frasco de Buffer enjuagando varias veces. Homogenizar y fechar.

MATERIAL REQUERIDO:

- Espectrofotmetro.- Probeta, micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.- Frasco de vidrio color mbar.

-

Cubetas espectrofotomtricas.- Bao de agua a 37C.- Reloj timer.

PROCEDIMIENTO:

Homogenizar la muestra antes de usar, especialmente frente a sueros lechosos.En tres tubos de ensayo marcados B (Blanco), S (Standard) y M (Muestra), colocar:

Mezclar.Incubar 5 minutos en Bao Mara a 37C.Enfriar y leer en espectrofotmetro a 505 nm llevando el aparato a cero con aguadestilada.

CALCULO DE LOS RESULTADOS:

Corregir las lecturas con el blanco y usar las lecturas corregidas para los clculos.

Para hallar la concentracin de triglicridos en el suero problema, se debe utilizar elmtodo del factor de calibracin.Triglicridos (mg%) = M x Fc


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El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee lossiguientes valores de triglicridos:

Deseable: < 150 mg%.Moderadamente elevado a elevado: 150199 mg%.Elevado: 200499 mg%.Muy elevado: > 500 mg%.

CUESTIONARIO:

1.- Describa las caractersticas principales de los lpidos y su clasificacin.

2.- Explique la importancia biolgica de los triglicridos.3.- Cmo se produce la digestin y absorcin de los triglicridos?4.- Mencione la proporcin de triglicridos dentro de las lipoprotenas y la accin de la

lipasa lipoproteca.5.- Enumere los diferentes mtodos tanto qumicos como enzimticos para el dosaje de

triglicridos.


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PRCTICA N 10

DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES Y ALBMINA EN SUERO


Determinacin de Protenas Totales:Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico, en medio alcalino,para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidades proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.

Determinacin de Albmina:La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la forma aninica dela Bromo Cresolsulfon Ftalenas (BCF), en presencia de un exceso de colorante, enmedio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto al blanco dereactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra.

REACTIVOS:

Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en NaOH 875 mmol/l y alquil arilpoli ter (AAP).Reactivo BCF: solucin de Bromo Cresolsulfon Ftalenas (en polioxietiln lauril ter).Suero Patrn: solucin de albmina y globulinas en estado nativo con ttulo conocidode protenas (Biuret Kjeldhal) y albmina (unin BCF).

MATERIAL REQUERIDO:

Espectrofotmetro.Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.Tubos de ensayo.Bao Mara a 37C.Reloj timer.

PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE PROTEINAS TOTALES:En tres tubos colocar:

Mezclar los tubos.Incubar durante 15 minutos en Bao Mara a 37C.Leer en espectrofotmetro a 540 nm.


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PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACIN DE ALBMINA:En tres tubos colocar:

Mezclar los tubos.Mantenerlos a temperatura ambiente durante 10 minutos.Leer en espectrofotmetro a 625 nm.


Protenas totales (g/dl) = M x fc fc = P.T. (g/dl) / SAlbmina (g/dl) = M x fc fc = Alb. (g/dl)/ S

Albmina (g/dl)Relacin A/G = ---------------------------------------Prot. Tot. (g/dl) - Alb. (g/dl)


PROTENAS TOTALES: 6,1 a 7,9 g/dl.ALBMINA: 3,5 a 4,8 g/dl.RELACION A/G: 1,2 a 2,2


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Experimento B: DETERMINACIN DE CREATININA URINARIA


La Creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio tamponado, previadesproteinizacin con cido pcrico, obtenindose un cromgeno que se mide a 510 nm.

REACTIVOS:

Reactivo 1: cido pcrico 41,4 mmol/l.Reactivo 2: buffer glicina/NaOH 1 mol/l, pH final 12,4.Standard: solucin de Creatinina 2 mg%

MATERIAL REQUERIDO:

Espectrofotmetro.Tubos de ensayo.

Micro pipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.Reloj timer.

PROCEDIMIENTO:

Recolectar orina de 24 horas.Medir la diuresis, tomar una alcuota y efectuar una dilucin 1:50 de la misma.Luego en tres tubos de ensayo preparar lo siguiente:

Mezclar por inversin.Incubar 20 minutos a temperatura ambiente.Leer en espectrofotmetro a 510 nm.


M

Creatinina en orina (mg/24 horas) = ------ x 20 mg/l x 50 x VSSiendo:

V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas.M = Absorbancia neta del tubo muestra.S = Absorbancia neta del tubo standard.


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VALORES DE REFERENCIA:900 a 1,500 mg/24 horas.

VALORACIN DEL ESTADO NUTRICIONAL

CUESTIONARIO:

1.- Con los datos obtenidos en los experimentos, realizar la valoracin nutricional dedicha persona sabiendo que es varn, pesa 60 Kg, su talla es 1,56 m y su volumenurinario en 24 horas fue de 1000 ml.

2.- Cmo hubiera sido la valoracin nutricional en el caso que la persona hubiera sidomujer?

3.- Mencione las caractersticas generales de las protenas y su clasificacin.

4.- Qu son las globulinas y cules son sus clases?5.- Describa los mtodos de dosaje tanto qumicos como enzimticos para protenas

totales, albmina, globulina y Creatinina.


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PRCTICA N 11

DETERMINACIN CUANTITATIVA DE UREA EN ORINA

El producto final ms importante del metabolismo proteico es la UREA. Esta esexcretada en la orina en mayor cantidad que cualquier otra sustancia.Concentraciones elevadas de urea en sangre son indicador de una inadecuada funcinexcretora y por consiguiente de la funcin renal.La urea sangunea puede aumentar por otras razones adems de excrecin renalinsuficiente, dichas causas se clasifican en: Pre-renal, son los estados en los cuales sealtera la circulacin por el rin y Post-renal por obstruccin de las vas urinarias. Porello la informacin ms exacta con respecto a la habilidad excretora de la urea por los

riones requiere de una comparacin de la concentracin de urea en sangre (BUN) y enla orina. Fisiolgicamente la urea se eleva debido a una dieta hiperproteica o con laedad y disminuye durante una dieta de bajo valor proteico.


La urea presente en la muestra es hidrolizada hasta amonaco y dixido de carbono,mediante una reaccin catalizada por la enzima ureasa:

Ureasa

Urea + H2O CO2 + 2 NH3

El amonaco en presencia de una base reacciona con fenol e hipoclorito de sodioformando azul de indo fenol. La intensidad de color azul es proporcional a la cantidadde urea en la muestra.

REACTIVOS:

Reactivo 1.- Solucin de fenol y nitro prusiato de sodio.Reactivo 2.- Solucin de hipoclorito de sodio en NaOH 0.625NEnzima.- Solucin de ureasa.


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PROCEDIMIENTO:

Se diluye la orina a 1:50 con agua destilada.

Preparar los siguientes tubos:

Mezclar e incubar los tubos en un Bao Mara a 37C por 5 minutos.Asegurarse que los reactivos no se hayan quedado en las paredes de los tubos.Luego agregar en cada tubo, 1 ml del Reactivo 1, y posteriormente 1 ml del Reactivo 2.

Mezclar el contenido de los tubos e incubarlos en un bao de agua a 37C por 5minutos.Transcurrido este tiempo agregar 4 ml de agua destilada en cada tubo.Mezclar los tubos por inversin y proceder a leer la absorbancia en unespectrofotmetro a 540 nm vs el blanco.

CALCULOS:Abs muestra

Urea (mg/dl) = --------------------- x 60 x Factor de dilucin

Abs standardDato: Urea x 0.466 = Nitrgeno ureico.

VALORES NORMALES:

Nitrgeno ureico.- 7 a 14 gr/24 hrs.Urea.- 15 a 30 gr/24 hrs.

BN = Ingesta nitrogenada(N ureico + N creatinnico + 2)

BN = ...................... gr/24 hrs.


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CUESTIONARIO:

1.- Con los datos obtenidos en la prctica, calcular el balance nitrogenado del pacientesabiendo que ingiri 8 gr de protenas en 24 horas.

2.- De donde proviene la Creatinina?3.- A qu se denomina uremia y que consecuencias trae?4.- A qu se llama BUN y que representa?5.- Para qu sirve la depuracin de Creatinina en orina de 24 horas?


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PRCTICA N 12

Medidas Antropomtricas.

COMPETENCIA:

Realiza una evaluacin nutricional de un nio. Calcula las medidas antropomtricas.

MATERIALES:

CINTA CIMDER O BRAZALETE DESALUD

BALANZA DEPI

CINTA MTRICA TENSIMETRO

BALANZA CON TALLMETRO ESTETOSCOPIO

FUNDAMENTO TERICO:

La evaluacin nutricional de un individuo es el conjunto de procedimientos destinados adeterminar las condiciones fsicas y orgnicas en que se encuentra en determinado momentode su vida. Estas condiciones se ven afectadas por factores ambientales, sociales,econmicos, etc., los cuales deben ser incluidos para la evaluacin.

Para realizar la evaluacin nutricional de un ser humano o de un grupo humano ms o menos

homogneo, se precisa de ciertas normas, que aplicadas debidamente pueden proporcionardatos tiles sobre el estado nutricional de dicha persona o grupo de personas.

Para esta clase de evaluaciones existen muchas tcnicas, algunas complejas y otras simples.Sin embargo, toda evaluacin nutricional debe considerar los siguientes aspectos:

1. Aspectos geogrficos y socioeconmicos.2. Estado sanitario y epidemiolgico.3. Antropometra.4. Estudio Clnico.

5. Estudios de laboratorio.6. Encuestas alimenticias.


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METODO OPERATIVO:

1. Determine el peso y talla del nio, paro tomar estas medidas deben encontrarse conprendas de vestir ligeras y sin zapatos, anote lo datos.

2. Pregunte usted sobre sus datos de procedencia, socioeconmicos y sanitarios del

paciente evaluado.3. A travs de la observacin, realice una evaluacin clnica del paciente tomando como

referencia las pautas establecidas en el cuadro adjunto.4. Con los datos obtenidos elabore un informe sobre el estado nutricional del nio.

DATOS CRITERIOS RESULTADOS

PERSONALES

Nombres y Apellidos

Edad

Sexo

Raza

GEOGRAFICOS Y

SOCIOECONOMICOS

Procedencia familiar

Ubicacin domiciliaria

Tipo de construccin

Gastos diarios en alimentos

ESTADO SANITARIO

Agua y desague

Disposicin de excretas

Disposicin de basura

Luz elctrica

Problema epidemiolgico

ANTROPOMETRIA

Peso

Talla

Superficie corporal

Permetro braquial.

Pliegue cutneo


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DATOS CRITERIOS RESULTADOS

ESTUDIO CLINICO

Cabellos: anotar si falta brillo, pigmentacin, grosor,fragilidad de arrancarlos.

Cara: Pigmentacin de la piel, presencia de dermatitisseborrica en la regin naso-labial, inflamacin

Labios: palidez, queilosis y estomatitis angular.

Lengua: Color, atrofia papilar, edema, glositis

Ojos: Palidez conjuntival, manchas de Bitot, xerosis de laconjuntiva y de la cornea, queratomalacia

Dientes: Esmalte moteado, caries, nmero de dientes.

Encias: Esponjosas, sangrantes, inflamacin

Glndulas del cuello: Aumento de tamao de la tiroides yglndulas salivales partidas

Piel y uas: Xerosis, petequias, hiperqueratosis,

dermatitis pelgica, aspecto de pintura cuarteada,inflamacin, ausencia de grasa, edema subcutnea,erupciones

Tejido subcutneo: Edema, cmulos, grasos

Tejido muscular esqueltico: Atrofia muscular,incremento de las protuberanciasfrontales, occipitales yde las epfisis seas. Ndulos costales. Deformacionestorxicas y de las piernas

Abdomen: Hepatomegalia, Esplenomegalia

Cardiovascular: Frecuencia cardiaca, presin arterial,

edema, especialmente en miembros inferioresSistema nervioso: Reflejos rotuliano y aquleo.Parlisis.Parestesia, Confusin mental.

ENCUESTAALIMENTICIA

N de veces que come al da

Alimentos que ms consume en : a) Desayuno

b) Almuerzo

c) Lonche

d) Cena

N de caloras al da

RESULTADO DE LAEVALUACION

ESTADO NUTRICIONAL RECOMENDACIONES


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INDICE DE MASA CORPORAL (IMC)

Se usa como indicador nutricional y se halla dividiendo el Peso (en Kilogramos) entre laestatura al cuadrado (en metros).

Masa (Kg)(altura (m))2

IMC REFERENCIA POSIBLES IMPLICACIONES Y RIESGOS

0 - 4,9 Delgadez III Postracin, astenia, adinamia, enfermedadesdegenerativas y peligro de muerte

5 - 9,9 Delgadez II Anorexia, bulimia, osteoporosis y autoconsumo de masa

muscular10-18,5 Delgadez I Trastornos digestivos, debilidad, fatiga crnica, estrs,ansiedad y difusin de las hormonas.

18,6-24,9 Peso Normal Estado normal, buen nivel de energa, vitalidad y buenacondicin fsica

25-29,9 Sobrepeso Fatiga, enfermedades digestivas, problemascirculatorios, mala circulacin en piernas y vrices.

30-34,9 Obesidad I Diabetes, hipertensin, enfermedades cardiovasculares,problemas articulares, rodilla y columna, clculosbiliares.

35-39,9 Obesidad II Diabetes, cncer, angina de pecho, infartos,

tromboflebitis, arteroscelrosis, embolias, alteraciones enla menstruacin

40+ Obesidad III Falta de aire, apnea, somnolencia, trombosis pulmonar,lceras varicosas, cncer de prstata, de colon, uterinoy mamario, reflujo esofgico, discriminacin social,laboral y sexual.

El IMC, a pesar que no hace distincin entre los componentes grasos y no grasosde la masa corporal total, es el mtodo ms usado para evaluar el grado deriesgo de la salud asociado a la obesidad.


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APELLIDOS Y NOMBRES

EDAD

SEXO

TALLA

PESO

IMC

CONDICIN

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GUIA DE PRACTICA BIOQUIMICA UNID.pdf