Extracção do DNA do kiwi

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Extracção do DNA do kiwi

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  • 1.
    • Extraco do ADN do Kiwi

2. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Macerao do kiwi
  • Depois de descascado, introduziu-se o kiwi na liquidificadora. Com a fora centrfuga, as clulas que constituem a polpa do fruto so dissociadas dos tecidos a que pertencem e pode haver destruio da sua estrutura (parede e membrana celular).

3. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Destruio das paredes e membranas celulares
  • Para ajudar a romper membranas celulares (incluindo as membranas nucleares) removendo os lpidos das suas estruturas, juntou-se detergente ao kiwi e sal para neutralizar protenas e estabilizar o ADN.

Sal Detergente 4. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Separao dos fragmentos celulares das molculas de ADN atravs de 2 filtraes:
  • 1 com papel de filtro
  • 2 com algodo hidrfilo
  • Obteve-se um filtrado.

5. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Aglutinao das molculas de ADN com separao dos restantes constituintes do filtrado
  • Ao filtrado juntou-se lcool com a formao de duas fraces: uma alcolica e outra aquosa.
  • Sendo o ADN insolvel em lcool, precipitou e formou uma massa filamentosa esbranquiada.

lcool Filtrado 6. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Sendo o ADN insolvel em lcool, precipitou e formou uma massa filamentosa esbranquiada.

7. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Extraco do precipitado para colorao
  • Com a ajuda de gaze, procedeu-se filtrao do precipitado.

8. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Colorao do ADN
  • Utilizando a tcnica de Feulgen (ADN em gua destilada, ADN em HCl, ADN em gua destilada e ADN em reagente de Schiff) no se obtiveram os resultados esperados: flculos carmins.
  • Com a aplicao de verde de metilo ao ADN (experimentando), obteve-se apenas um contraste como evidencia a figura.

ADN 9. Actividade experimental- extraco do ADN do kiwi

  • Discutindo os resultados...
  • Tendo em conta que os procedimentos foram seguidos com rigor, a colorao no ter sido bem evidente por alterao da qualidade do corante utilizado (?...)
  • Concluindo ...
  • Recomenda-se a repetio de todo o processo de colorao com a utilizao de outros reagentes (o corante do protocolo - reagente de Schiff, bem como de outros corantes com afinidade com o ADN - verde de metilo, azul de metileno, gua iodada...) para identificao e destaque do ADN extrado.