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19/03/2015
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EQB-353Microbiologia Industrial
Escola de Química / UFRJ
Prof. Rodrigo P. NascimentoMicrobiologista (DEB-EQ-UFRJ)
Datas Importantes19/05 – 1ª. Prova Teórica P1 (Prof. Rodrigo) (a confirmar)
07/07 – 2ª. Prova Teórica P2 (Prof. Alice)05/05 – Início das Aulas Praticas (a confirmar)02/07 – Estudo Dirigido em Grupos09/07 – 2ª. Chamada (P1 e P2) (Prof. Alice e Rodrigo) 21/07 – Prova Final (Prof. Alice e Rodrigo)
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Presença Obrigatória: 75%Cada aula representa 2 presenças
Trabalhos Extras ao longo da disciplina – pontos extras
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BIB
LIO
GR
AFI
A
MICROBIOLOGIAMICROBIOLOGIA
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Introdução à MicrobiologiaIntrodução à Microbiologia
• Micro (gr: pequeno) + bio (gr: vida) + logia (gr:estudo) = estudo de pequenos organismos
• Microbiologia: ramo da biologia que estuda osseres microscópicos.
• Preocupa-se com a forma, a estrutura, areprodução, a fisiologia, o metabolismo e suaidentificação.
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Os Micro-organismos
COMO A MICROBIOLOGIA SURGIU??
????
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MicróbiosCélulas procarióticas
Bactérias
Archaeas
Células eucarióticas Algas
Protozoários
3,5 bilhões de anos
2,0 bilhões de anos
Fungos
Células eucarióticas Algas
Protozoários 2,0 bilhões de
anosFungos
Células eucarióticas Algas
Protozoários 2,0 bilhões de
anosFungos
Células eucarióticasAlgas
Protozoários
2,0 bilhões de anosFungos
1665 – 1857 Desenvolvimento lento da Microbiologia
- Limitação das análises = simples descrições morfológicas, ao
acúmulo de observações e às primeiras tentativas de
classificação taxonômica.
1857 – 1910 IDADE DE OURO DA MICROBIOLOGIA
- Grande desenvolvimento de técnicas morfológicas e
fisiológicas na área de taxonomia.
1910 - ... Uma nova Era Biológica???
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Onde a Microbiologia esta presente?Onde a Microbiologia esta presente?
Produção de alimentos (queijos, vinhos, cerveja, ...)Produção de alimentos (queijos, vinhos, cerveja, ...)
Tratamento de tecidosTratamento de tecidosProdutos químicos (butanol, xilitol, ácidos orgânicos)Produtos químicos (butanol, xilitol, ácidos orgânicos)
Antibióticos, antivirais, imunomoduladoresAntibióticos, antivirais, imunomoduladoresBiocombustíveis (metano e etanol)Biocombustíveis (metano e etanol)
Manejo agrícola (fertilidade)Manejo agrícola (fertilidade)Meio Ambiente (ciclagem)Meio Ambiente (ciclagem)
Doenças de plantas e animaisDoenças de plantas e animaisDoenças em seres humanosDoenças em seres humanos
Intoxicação ambientalIntoxicação ambiental_________________________________________________________________________________EQB353 – Microbiologia Industrial Escola de Química / UFRJ
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1013 1014
+ =
Carta Enigmática1
Savage, DC (1977) Annu. Rev. Microbiol. 31: 107Tosta, CE (2001) Mem. Inst. Oswaldo Cruz, 96: 415
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Sulco gengival – Preparação corada pelo método de Gram
Estudo dos microEstudo dos micro--organismosorganismos
Divididos em:
* Bacteriologia: estudo das bactérias
* Micologia: estudo dos fungos
* Parasitologia: estudo dos protozoários e vermes parasitas
* Virologia: estudo dos vírus
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Denominam-se “micro-organismos” os seres procarióticos
(bactérias e archaeas), os eucarióticos unicelulares
(protozoários, microalgas e leveduras), os eucarióticos
coloniais (certas espécies de protozoários) e os
eucarióticos multicelulares simples (fungos filamentosos)
nos quais se observam níveis muito simples de
diferenciação celular.
Afinal, qual a definição para microAfinal, qual a definição para micro--organismo??organismo??
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Porque são MICRO-organismos?
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Micro-organismos x Homem
Dimensões MicrobianasDimensões Microbianas
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microscópio de Robert Hooke(1635-1703)
microscópios primitivos de uma lente feitos por
van Leeuwenhoek (1632-1723)
Como observá-los?
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Fatia fina de cortiça, com suas células (desenho por Robert Hooke)
Seções longitudinais e transversais de um nervo Desenhos por van Leeuwenhoek (1719)
Bactéria Escherichia coli vista no microscópio ótico (a) e eletrônico (b).
Como surgiu tanta diversidade biológica?Como surgiu tanta diversidade biológica?
PROCARIOTOSPROCARIOTOS – Bactérias e Archaeas
EUCARIOTOSEUCARIOTOS – Fungos, Protozoários, Plantas, Animais
Milhões de espécies já foram descritas e ainda faltam
milhões a serem descobertas
Milhares já foram extintas e nem sequer chegamos a conhecer
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S. pneumoniae Entamoeba histolítica
Giardia lamblia
Acantharea
BactériasBactérias ProtozoasProtozoas FungosFungos AlgasAlgas
S.cerevisae
Candida albicans
Diatomáceas
Chlorella
Ceratium sp.
Agrobacterium
Rhyzobium
Micorrizas
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Sub-divisões da BiologiaBaseada nos reinos:Botânica - Reino VegetalZoologia - Reino AnimalMicrobiologia compreende:
Bacteriologia – bactériasMicologia – fungosProtozoologia – protozoáriosFicologia – algasVirologia – vírus
Baseada na organização celular:Biologia da célula – citologia (estudo da célula)
fisiologia (estudo das funções)
Biologia das populações:Taxonomia – nomenclatura e classificaçãoEcologia – relação entre o ser vivo e o meio ambienteEvolução – adaptações dos seres vivos e mutações Genética – estuda a herança biológica
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Características da vida• Organização:
A célula é a forma mais simples da organização biológica:única célula (organismos unicelulares)
mais de uma célula (organismos pluricelulares)
• Metabolismo:soma total de todos os processos químicos
que ocorrem na matéria vivaAnabolismo: são as reações de sínteseCatabolismo: são as reações degradativas
• Irritabilidade: resposta a estímulos externos ou mudanças no meio ambiente
• Crescimento: excesso de processos sintéticos
• Ciclo vital: nascimento, crescimento, reprodução, envelhecimento e morte
EUCARIOTOS E ORGANELASEUCARIOTOS E ORGANELAS
Baseado em estudos de sequenciamento do ácidonucléico, surgiram 3 linhas evolutivas: Archaea, Bacteria eEukarya.
- Células Eucarióticas PrimitivasNão continham nem mitocôndria nem cloroplasto, nemmembrana nuclear.
- Núcleo → conjunto de moléculas de DNA que secombinaram e segregaram a um envelope lipoprotéicojunto com fibras do aparato mitótico.
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2,0-1,6bilhões de
anos
Bactéria ancestral das atuais Cianobactérias
e plastídeos
~1,5 bilhões de anos Dias
atuais
Fungos, metazoários e protistas
Algas e plantas
superiores
Nível de oxigênio
atmosférico
Bactéria ancestral das atuais α-proteobactérias
Bactéria primitiva
Archaea primitiva
2,9-2,5bilhões de
anos
Célula eucariota primitiva
CENANCESTOR
Evento endosimbiótico
Evento endosimbiótico
Evento simbiótico
Mitocôndrias
Os microOs micro--organismos e a origem dos organismos e a origem dos eucariotoseucariotos
ENDOSIMBIOSEENDOSIMBIOSE
ÁRVORE FILOGENÉTICAÁRVORE FILOGENÉTICAClassificação dos Seres VivosClassificação dos Seres Vivos
- Os organismos são agrupados em categorias taxonômicas outaxa (singular taxon), com base no grau de similaridade entreeles. Todos estão relacionados por meio da evolução.
– Em 2001 foi lançado o projeto internacional chamado “Allspecies Inventory”, com o proposito de identificar e registrarcada espécie de vida na terra nos próximos anos (até 2026).Os biólogos já identificaram mais de 1,5 milhão de organismosdiferentes, mas estima-se que o número de espécies estejaentre 7 e 1000 milhões de seres vivos.
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ÁRVORE FILOGENÉTICAÁRVORE FILOGENÉTICAClassificação dos Seres VivosClassificação dos Seres Vivos
• 5 reinos (animalia, plantae, fungi, monera e protista)• Reino → Filo → Classe → Ordem → Família → Gênero →Espécie
• Existência de 2 tipos de células procarióticas e 1 tipo de célulaeucariótica (diferenças no rDNA, na estrutura das membranas lipídicas,tRNA, sensibilidade a antibióticos).
• Carl Woese (1978) propôs elevar estes 3 tipos de células para umnível acima do Reino, denominado de Domínio.
Análise Molecular do RNAr 16S / 18SAnálise Molecular do RNAr 16S / 18S
ATUALMENTEATUALMENTE:: 33 domíniosdomínios ee váriosvários gruposgrupos monofiléticosmonofiléticos
DOMÍNIOS
FILOS OU REINOS?
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Hierarquia TaxonômicaHierarquia Taxonômica
• Classificação dos Procariotos
- Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology- Procariotos (muito difícil e arbitrário a classificação taxonômica)Domínio BACTERIADomínioARCHAEA
- Uma espécie procariótica é definida de uma maneira diferente dasespécies eucarióticas, que são um grupo de organismos intimamenterelacionados que podem cruzar entre si.
- A divisão celular em bactérias não é diretamente ligada à conjugaçãosexual.
(Reino Monera - ???)
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O CONCEITO DE ESPÉCIE NA MICROBIOLOGIAO CONCEITO DE ESPÉCIE NA MICROBIOLOGIA
O conceito usado para definir espécie em eucariotos com reprodução
sexuada não se aplica a micro-organismos dos domínios Archaea e
Bactéria.
Critérios usados para definir se dois micro-organismos pertencem a
mesma espécie:
- Devem ter percentual molar % de G+C similar.
- A taxa de reassociação do DNA deve ser maior que 70%.
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• Classificação dos Procariotos
- O “crescimento” de uma bactéria em um meio de cultivo, por um dadotempo é chamado CULTURA. Se for meio sólido, pode ser chamadode COLÔNIA
- COLÔNIA = clone (população derivada de uma única célula),consequentemente, tem-se uma cultura pura quando somenteexistem indivíduos da mesma espécie.
- Todas as células no clone devem ser idênticas. Entretanto, culturapura de uma mesma espécie não são idênticas em todas ascaracterísticas. Cada um desses grupos são chamadas deLINHAGENS.
- As linhagens são identificadas por números, letras ou nomes queseguem o epíteto específico (micróbios procariotos e eucariotos).
Epíteto específico = espécie
Todo organismo é composto por um binômio (gênero e espécie)
Nom
e em
itál
ico
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Taxonomia• Características culturais – nutrientes exigidos;
• Características morfológicas –dimensões das células, seus arranjos, a diferenciação e a identificação de suas estruturas;
• Características metabólicas – a maneira pela qual o micro-organismo desenvolve os processos químicos vitais, caminhos metabólicos;
• Características químicas – identificação dos principais constituintes químicos das células, purificação e caracterização dos constituintes;
• Características antigênicas – detecção de componentes especiais das células que fornecem evidências de semelhanças entre as espécies. Inoculação e pesquisa de anticorpos;
• Características genéticas – análise da composição do DNA e a relação entre o DNA isolado de diferentes micro-organismos.
Livros de Referência (Manual Bergey)
- A divisão celular em bactérias não é diretamente ligada àconjugação sexual.
- Uma espécie procariótica é definida simplesmentecomo uma população de células com característicassimilares
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POR QUE ESTUDAR POR QUE ESTUDAR
MICROBIOLOGIA EM MICROBIOLOGIA EM
ENGENHARIA ???ENGENHARIA ???
MICROMICRO--ORGANISMOSORGANISMOS
x x
INDÚSTRIAINDÚSTRIA
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Micro-organismos Industriais, Produtos e Formação de Produtos
Origem – processos de fermentação alcóolica (cerveja e vinho)
Evolução – síntese de produtos fármacos, alimentícios, combustíveis, enzimas, produtos químicos (ácidos orgânicos, butanol, polietileno, ...)
Presente e Futuro – manipulação genética, organismos transformados
BIOTECNOLOGIA MICROBIANA – geração de produtos não naturais de micro-organismos
Biotecnologia Microbiana
Uso de micro-organismos em larga escala
Geração de produtos de valor comercial (enzimas e antibióticos)
Transformação de produtos químicos (xilitol, furfural) / manipulação genética
O homem convive com micro-organismos desde seu
aparecimento na Terra.
O homem primitivo simplesmente não entendia as
doenças e não tinha noção alguma sobre sua
transmissibilidade.
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Marcos no Desenvolvimento da Biotecnologia
Multidisciplinaridade da Biotecnologia
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A Nova Biotecnologia
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Porque estudar a célula?
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Esquema Geral de um Processo Fermentativo
ÁREAS INDUSTRIAIS DE APLICAÇÃO MICROBIANA
- Têxtil (enzimas)
- Papel e Celulose (enzimas)
- Alimentícia (enzimas e microrganismos)
- Curtume (enzimas)
- Cosméticos (enzimas)
- Farmacêutica (antibióticos, antivirais e enzimas)
- Detergentes (enzimas)
- Química (biosensores, ácidos orgânicos)
- Combustível (bioetanol)
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Produtos gerados pela Microbiologia Industrial
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Coleções de Cultura
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Legislação Brasileira – Acesso ao Patrimônio Genético (Microbiologia)
A Medida Provisória nº 2.186-16 define "patrimônio genético" como "informaçãode origem genética, contida em amostras do todo ou de parte de espécimevegetal, fúngico, microbiano ou animal, na forma de moléculas e substânciasprovenientes do metabolismo destes seres vivos e de extratos obtidos destesorganismos vivos ou mortos, encontrados em condições in situ, inclusivedomesticados, ou mantidos em condições ex situ, desde que coletados in situ noterritório nacional, na plataforma continental ou na zona econômica exclusiva“
Bioprospecção: atividade exploratória que visa identificar componente dopatrimônio genético e informação sobre conhecimento tradicional associado,com potencial de uso comercial.
O Estudo da Microbiologia é muito amploTodas as áreas têm a sua importância e a sua aplicabilidade
Todas as fontes industriais vêm do ambiente e retornam processadas para a fonte natural
Sem os microrganismos, o planeta Terra não teria vida