Técnicas imunologicas

Janio Lopeswww.bioconcursos.com

Precipitação• Ocorre pela interação de antígenos (Ag) solúveis

“multivalentes” e seus anti-soros (Ac).• Simples: ( Ac ou Ag fixo e o outro se difunde no gel)• Dupla: (Ac e Ag se difundem no gel)

• Dupla (Ouchterlony)• Forma “linhas”

• Simples (Mancini)• Forma “alos”

Floculação - VDRL

• Teste não treponêmico• Reagentes– Cardiolipina (lipídeo de

mamifero)– Lecitina – Cristal de colesterol– Anticorpos anti-lipídio

ou reagininas

Elisa

• É um método quantitativo em que a reação Ac-Ag é monitorada por medida da atividade enzimática.

• Alta sensibilidade• Enzimas utilizadas: Peroxidade e Fosfatase alcalina• Leitura por Absorbância.

Imunofluorescencia• Anticorpos ligados covalentemente a fluorocromos.• Fluorocromos mais utilizados:– Fluoresceína, Isotiocianato, Lisamina-Rodamina B.

• Indireta: Usada para pesquisa de Ac ou Ag.

• + sensível– Ag+ Anti Ag + Anti-Ac

Marcado

• Direta: Usado para pesquisar Ag em tecidos– Ag + Ac-marcado

Bizu

• Reação de Montenegro: Aplicação intradérmica de antígenos (leishmaniose tegumentar).

• Reação de Paul Bunnel Davidison: pesquisa de anticorpos heterófilos contra hemácias de carneiro ou cavalos ( fase aguda da mononucleose infecciosa / V. Epstein-Barr)

• Reação de PPD: Derivado protéico purificado de tuberculina aplicado na intraderme. (tuberculose)

• Reação de Widal: ensaio imunologico de aglutinação para diagnostico de salmoneloses

Nefelometria

• Quantifica as reações de precipitação entre Ag-Ac medindo o espalhamento de luz (ângulo) provocado pela formação de imunocomplexos.

• Diminuição da trasmitâcia

Testes rápidos

• Imunocromatográficos• Qualitativo• Rápido• Simples• Amostra:

– Soro– Sangue total– Urina

• Enzima, corante coloidal ou ouro coloidal.

• Captura de Ac ou Ag