MALFORMAÇÕES EM PEQUENOS RUMINANTES · Na necropsia, o cérebro não apresentava giros e sulcos e o cerebelo estava reduzido de tamanho. Histologicamente, em ... ruminantes no Brasil,

CENTRO DE SAÚDE E TECNOLOGIA RURAL

CAMPUS DE PATOS – PB

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM MEDICINA VETERINÁRIA

JOSÉ RÔMULO SOARES DOS SANTOS

MALFORMAÇÕES EM PEQUENOS RUMINANTES

PATOS-PB

2012



Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação

em Medicina Veterinária da Universidade Federal

de Campina Grande como requisito parcial para a

obtenção do título de Doutor em Medicina

Veterinária.

Orientador: Prof. Dr. Franklin Riet-Correa

PATOS-PB

2012

FICHA CATALOGADA NA BIBLIOTECA SETORIAL DO

CSTR / UFCG - CAMPUS DE PATOS – PB de acordo com a AACR2

S237c Santos, José Rômulo Soares dos 2012

Malformações em pequenos ruminantes /José Rômulo Soares dos Santos – Patos - PB: CSTR, UPGMV, 2012.

54f. Inclui bibliografia

Orientador: Franklin Riet-Correa Tese (Doutorado em Medicina Veterinária – Centro de Saúde e

Tecnologia Rural, Universidade Federal de Campina Grande).

1 – Malformações. 2 – Mutação genética. 3 - Plantas tóxicas. 4 – Pequenos ruminantes. I - Título

CDU: 615.9:619



Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação

em Medicina Veterinária da Universidade Federal

de Campina Grande como requisito parcial para a

obtenção do título de Doutor em Medicina

Veterinária.

Aprovada em 20/12/2012

BANCA EXAMINADORA

Prof. Dr. Franklin Riet-Correa - Orientador

Universidade Federal de Campina Grande – Campus de Patos-PB

Unidade Acadêmica de Medicina Veterinária

Prof. Dr. Suedney de Lima Silva

Universidade Federal da Paraíba – Faculdade de Veterinária – Areia-PB

Prof. Dr. Fabio de Souza Mendonça

Universidade Federal Rural de Pernambuco

Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal

Prof. Dr. Gildenor Xavier Medeiros



Prof. Dr. Eldinê Gomes de Miranda Neto



“DedicoestetrabalhoaoprofessorFranklinRietCorreaAmaralporsemearnosemiáridosertanejoparaibanoasementedabuscapelo

conhecimento,equeelabroteefloresçaentreascactáceasparaobemmaiorqueéasaúdeanimaleaconsolidaçãodaMedicinaVeterinária.”

AGRADECIMENTOS

Aos animais fonte de estudo e figuras que devem ser zeladas pelos seres humanos,

principalmente pelos médicos veterinários.

A Lucas e Rafaela, anjos amados eternos na minha vida, o meu pedido de perdão por

todos esses 8 anos em pós graduação e de tempo que deixei de me dedicar melhor a vocês.

A minha querida Ariana, um anjo que me fez enxergar coisas simples e importantes

que poucos dão importância.

Minha eterna gratidão e desculpas pelos transtornos ao grande amigo Flávio, que foi

essencial na execução deste trabalho.

Aos Guerreiros Flávio, Sara, Almir e Eldinê, por não medirem esforços na dedicação

com o cotidiano do Hospital Veterinário. Gostaria que houvesse mais pessoas tão

comprometidas quanto vocês. A Sara, especialmente, pela forma única e idônea de pensar na

saúde dos Ruminantes.

Ao professor Gil, exemplo de educador, que me fez enxergar que a educação está além

de transmitir conhecimento e elaborar e corrigir provas.

Ao professor Danilo, em nome do qual agradeço a UAMV e o Governo Federal, pela

liberação e pelo estimulo na realização desse sonho.

Aos amigos inesquecíveis que fiz no doutorado Fabrício, Luciano, Diego, Allan,

Glauco, Eduardo, Lisanka, Talita e Luiza, meu respeito e minha consideração.

A Nevinha e Dal, grandes amigos, em nome dos quais agradeço a todos os

funcionários.

A Marta, Bela e Jade, graduandas da Medicina Veterinária, e grandes amigas.

Enfim, a todos MUITO OBRIGADO!

RESUMO

Esta tese inclui uma revisão de literatura e dois artigos. O primeiro capítulo é uma revisão que

abrange princípios gerais da teratologia, a epidemiologia, o diagnóstico, a clínica e a patologia

das malformações em pequenos ruminantes. No artigo que corresponde ao segundo capítulo,

foi estudado a teratogenicidade de Mimosa tenuiflora. Quinze ovelhas, distribuídas em dois

grupos foram introduzidas em área invadida pela planta. O Grupo 1, com seis ovelhas

prenhes, foi introduzido na área experimental 20 dias após o acasalamento. O Grupo 2,

formado por nove ovelhas não prenhes e um carneiro, foi introduzido na área experimental no

início do experimento. A cada 15 dias eram realizados exames ultrassonográficos para

acompanhamento da gestação. No Grupo 1, três ovelhas abortaram, cada uma um feto sem

malformações. Outra ovelha pariu dois cordeiros, um com hiperflexão na articulação inter-

falangeana proximal no membro torácico direito e outro sem malformações. Outra ovelha

pariu um cordeiro com hiperflexão dos dois membros pélvicos na região da articulação tarso-

metatársica. No grupo 2, uma ovelha abortou um feto sem malformações e cinco pariram

cordeiros normais. Três das ovelhas desse grupo não emprenharam durante todo o período

experimental, mostrando retornos repetidos ao cio, sugerindo perda embrionária. Concluiu-se

que M. tenuiflora, além de causar malformações causa, também, mortalidade embrionária e

abortos em ovelhas. No terceiro capitulo, o artigo relata os achados clínicos e patológicos de

um caprino com lisencefalia e hipoplasia cerebelar. No exame físico, esse caprino de 30 dias,

apresentava incoordenação e incapacidade de ficar em pé, decúbito esternal permanente,

ataxia, ausência do reflexo de ameaça, tremores de intenção e nistagmo. Após 11 dias de

internamento o caprino foi eutanasiado e necropsiado. Na necropsia, o cérebro não

apresentava giros e sulcos e o cerebelo estava reduzido de tamanho. Histologicamente, em

todo o córtex cerebral, a substância cinzenta estava mais espessa e a substância branca mais

fina que o normal. Os neurônios estavam distribuídos de forma aleatória na substância

cinzenta. No cerebelo, as camadas estavam desorganizadas, com localização heterotópica das

células. Os achados macroscópicos e histológicos são característicos de lisencefalia e

hipoplasia cerebelar. Lisencefalia é uma doença rara na medicina veterinária e não tinha sido

descrita em caprinos.

Palavras-chave: aborto, malformações congênitas, mortalidade embrionária, mutações

gênicas, plantas tóxicas, teratógenos.

ABSTRACT

This thesis includes a review and two papers. The first chapter is a review about general

principles of teratology and epidemiology, diagnosis, clinical signs and pathology of

malformations in small ruminants. The second chapter is a paper that studied the

teratogenicity of Mimosa tenuiflora. Fifteen sheep, divided into two groups, were introduced

into an area invaded by the plant. Group 1 consisted of six pregnant ewes that were introduced

into the experimental area 20 days after mating. Group 2 consisted of nine non pregnant sheep

and a ram introduced into the area at the start of the experiment. Every 15 days each sheep

was examined by ultrasound to control pregnancy. In Group 1, three sheep aborted single

fetuses without malformations. One sheep delivered two lambs, one with hyperflexion of the

proximal inter-phalangeal joint of the right forelimb and another without malformations.

Another sheep delivered a lamb with a hyperflexion of both hindlimbs in the region of the

tarsal-metatarsal joint. Only one sheep delivered a normal lamb. In Group 2, one sheep

aborted a fetus without malformations and five delivered normal lambs. Three sheep of this

group returned to estrus repeatedly and did not get pregnant during the mating period,

suggesting embryonic loss. It is concluded that M. tenuiflora cause malformations, embryonic

mortality and abortion in sheep. In the third chapter, the paper relates a case of lissencephaly

and cerebellar hypoplasia in a goat. The goat presented sternal recumbence, absent menace

response, intention tremors, ataxia, and nystagmus. It was euthanized and necropsied after

been hospitalized during eleven days. At necropsy, the surface of the brain was smooth,

cerebral sulci and gyri were absent, and the cerebellum was reduced in size. Histologically, in

all cerebral cortex, the grey matter was thicker and the white matter was thinner than normal.

The neurons were arranged randomly in the grey matter. In the cerebellum, the layers were

disorganized and there was heterotopy of the cells. The histologic and gross lesions are

characteristic of lissencephaly associated with cerebellar hypoplasia. Lissencephaly is a rare

disease in veterinary medicine and had not been reported previously in goats.

Keywords: Abortions, congenital malformations, embryonic mortality, genic mutations,

poisonous plants, teratogens.

LISTA DE FIGURAS

CAPÍTULO II

Figura 1. Cordeiro mostrando hiperflexão na articulação inter-falangeana proximal

no membro torácico direito, na intoxicação por Mimosa tenuiflora...........................

41

Figura 2. Cordeiro mostrando hiperflexão dos membros pélvicos na região da

articulação tarso-metatársica, na intoxicação por Mimosa tenuiflora.........................

42

CAPÍTULO III

Figura 1. Caprino com lisencefalia e hipoplasia cerebelar. (A) Vista dorsal

mostrando ausência de giros e sulcos na superfície telencefálica e hipoplasia

cerebelar. (B) Corte transversal. A substância cinzenta está mais espessa que o

normal (paquigiria) e a substância branca mais fina. A substância branca não se

invagina na substância cinzenta. (C) Cerebelo mostrando disgênese cortical

caracterizada por ninhos de neurônios granulares com raras células de Purkinje na

periferia da substância branca (H-E, 10x). (D) Córtex frontal. Uma desorganização

dos neurônios corticais é observada na substância cinzenta. Os neurônios estão

distribuídos aleatoriamente da camada molecular superficial até a camada cortical

mais profunda, sem padrão de organização laminar (H-E, 10x).................................

50

SUMÁRIO

INTRODUÇÃO............................................................................................................ 09

Referências............................................................................................................. 10

CAPÍTULO I – Malformações em pequenos ruminantes – Revisão de Literatura 11

Abstract.................................................................................................................... 12

Resumo..................................................................................................................... 13

1.Introdução.................................................................................................................. 13

2.Princípios da teratogenicidade e patogênese geral................................................ 14

3.Etiologia das malformações................................................................................ 17

3.1 fatores intrínsecos............................................................................................. 17

3.2 fatores extrínsecos............................................................................................. 18

4.Epidemiologia............................................................................................................ 25

5.Achados clínicos e patológicos ............................................................................... 26

6.Diagnóstico................................................................................................................ 27

7.Controle e profilaxia.................................................................................................. 28

8.Considerações finais.................................................................................................. 29

9.Referências................................................................................................................ 29

CAPÍTULO II – Malformações, abortos e mortalidade embrionária em ovinos

causada pela ingestão de Mimosa tenuiflora (Leguminosae)......................................

35

Abstract............................................................................................................... 36

Resumo................................................................................................................. 37

Introdução............................................................................................................. 38

Material e Métodos............................................................................................... 38

Resultados............................................................................................................. 40

Discussão.............................................................................................................. 41

Referências............................................................................................................ 42

CAPÍTULO III – Lisencefalia e hipoplasia cerebelar em caprino............................ 45

Abstract................................................................................................................. 46

Resumo................................................................................................................. 46

Referências............................................................................................................ 51

CONCLUSÕES............................................................................................................ 54

9

INTRODUÇÃO

A exploração de caprinos e ovinos é a principal atividade pecuária no semiárido

brasileiro e tem importância cultural e socioeconômica histórica no desenvolvimento da

região Nordeste. Os rebanhos caprino e ovino na região nordeste são expressivos,

constituindo uma população de 10.160.737 de caprinos e de 6.717.980 ovinos. Muitos

entraves existem na pecuária Nordestina: o período de estiagem; a disponibilidade de

alimentos e as doenças. Entre os problemas patológicos de pequenos ruminantes, as

malformações representam 23% das causas de mortes neonatais em cordeiros (Nóbrega Junior

et al. 2005), e 7,62% em cabritos (Medeiros et al. 2005). No Nordeste brasileiro estimam-se

perdas anuais de 273.120 cabritos e 259.582 cordeiros por malformações. Esses dados foram

estimados considerando 56% de fêmeas em idade de reprodução, uma taxa de natalidade de

1,6 para caprinos e 1,0 para ovinos e 30% de mortalidade perinatal (Riet-Correa et al. 2007).

Além da mortalidade perinatal, as anomalias congênitas estão relacionadas à perdas

embrionárias e abortos levando a dimuição da eficiência reprodutiva dos rebanhos caprino e

ovino e causando perdas econômicas importantes (Dantas et al. 2012).

Individualmente, a maioria das malformações ocorre raramente. Quando aparecem

repetidamente em um dado rebanho ou área geográfica tornam-se alvo de investigação. No

entanto, boa parte dos defeitos não é relatada e poucos são os registros de sua ocorrência. O

estudo das malformações não é simples, principalmente no que se refere ao estudo genético.

A falta de informação adequada, a inadequada descrição anátomo-patológica das

malformações, a inadequada análise genética e a falha na interpretação dos achados que

contribuem para o entendimento e associação entre os processos embriológicos, patológicos e

de natureza genética constituem deficiências com relação ao estudo dos defeitos congênitos

nos animais domésticos (Leipold et al. 1983).

Devido a essa falta de informação há dificuldade no estudo das anomalias e

determinação das possíveis causas, de forma que o diagnóstico é um desafio na prática

veterinária. São poucos os dados sobre a ocorrência de defeitos congênitos em pequenos

ruminantes no Brasil, a não ser por estudos com Mimosa tenuiflora (Pimentel et al. 2007,

Dantas et al. 2012, Santos et al. 2012) e poucos relatos de casos individuais como

perossomus elumbis em ovinos (Castro et al. 2008) e epidermólise bolhosa em caprinos

(Medeiros 2012). Para diminuir as perdas reprodutivas dos rebanhos caprino e ovino é

importante o estudo das malformações.

10

Esta tese inclui três capítulos: o primeiro é uma revisão de literatura sobre

malformações em pequenos ruminantes; o segundo é um artigo, que se intitula

“malformações, abortos e mortalidade embrionária em ovinos causada pela ingestão de

Mimosa tenuiflora (Leguminosae)”; e o terceiro é um artigo intitulado “lisencefalia e

hipoplasia cerebelar em caprino”.

REFERÊNCIAS

Castro M.B., Szabó M.P.J., Moscardini A.R.C. & Borges J.R.J. 2008. Perosomus elumbis em

um cordeiro no Brasil. Ciência Rural, Santa Maria, 38(1):262-265

Dantas A.F.M., Riet-Correa F., Medeiros R.M.T., Lopes J.R., Gardner D.R., Panter K. &

Mota R.A. 2012. Embryonic death in goats caused by the ingestion of Mimosa tenuiflora.

Toxicon 59 (5) 555-557.

Leipold, H.W.; Huston, K.; Dennis, S.M. Bovine congenital defects. Advances in Veterinary

Science and Comparative Medicine, v. 27, p. 197-271, 1983.

Medeiros J.M., Tabosa I.M., Simões S.V.D., Nóbrega Júnior J.E., Vasconcelos J.S. & Riet-

Correa F. 2005. Mortalidade perinatal em caprinos no semi-árido da Paraíba. Pesquisa

Veterinária Brasileira. 25(4): 201-206.

Medeiros G.X. Riet-Correa F., Barros S.S., Soares M.P., Dantas A.F.M., Galiza G.J.N.,

Simões S.V.D., Borges A.S. 2012. Dystrophic epidermolysis bullosa in goats. Journal of

Comparative Pathology, In Press, Corrected Proof, Available online 1 November 2012.

http://dx.doi.org/10.1016/j.jcpa.2012.09.002.

Nóbrega Júnior J.E., Riet-Correa F., Nóbrega R.S., Medeiros J.M., Vasconcelos J.S., Simões

S.V.D. & Tabosa I.M. 2005. Mortalidade perinatal de cordeiros no semi-árido da Paraíba.

Pesq. Vet. Bras.. 25(3): 171-178.

Pimentel L.A., Riet Correa F., Gardner D., Panter K.E., Dantas A.F.M., Medeiros R.M.T.,

Mota R. A. & Araújo J.A.S. 2007. Mimosa tenuiflora as a cause of malformations in

ruminants in the Northeastern Brazilian semiarid rangelands. Vet. Pathol. 44(6):928-931.

Riet-Correa F., Medeiros R.M.T., Tokarnia C.H. & Döbereiner J. 2007. Toxic plants for

livestock in Brazil: economic impact, toxic species, control measures and public health

implications, p.2-14. In: Panter K.E., Wierenga T.L. & Pfister J.A. (ed.). Poisonous plants:

global research and solutions. CAB International, Cambridge. EUA.

Santos J.R., Dantas A.F.M. & Riet-Correa F. 2012. Malformações, abortos e mortalidade

embrionária em ovinos causada pela ingestão de Mimosa tenuiflora (Leguminosae). Pesq.

Vet. Bras. 32(11):1103-1106.

11

CAPÍTULO I

Malformações em pequenos ruminantes - Revisão de Literatura

O presente trabalho foi formatado, segundo as normas da revista Pesquisa Veterinária

Brasileira (Anexo 2).

12

Malformações em pequenos ruminantes. Revisão de literatura1

José Rômulo Soares dos Santos2 e Franklin Riet-Correa2

ABSTRACT. Santos J.R.S., & Riet-Correa F. 2012. [Malformations in small ruminants.

Review.] Malformações em pequenos ruminantes. Revisão de literatura. Pesquisa Veterinária

Brasileira 00(0):00-00. Hospital Veterinário, CSTR, Universidade Federal de Campina

Grande, Campus de Patos, 58708-110 Patos, PB, Brazil. E-mail: [email protected]

In this paper the general pathogenesis, etiology, epidemiology, clinical signs,

pathology, diagnosis and control of malformations in sheep and goats are reviewed.

Congenital malformations can be defined as any morphologic or functional defect of an organ

or system at birth. These malformations can occur during the development of the embryo or

the fetus. Their origin can be intrinsic (chromosomic or genic alterations) or extrinsic

(infectious, physical or chemical agents). The frequency of congenital malformations in sheep

and goats is variable depending on the causal agents involved (hereditary or environmental),

breeds, geographical areas, and season of occurrence. When malformations occur as

outbreaks, it is possible that the cause is non-hereditary and when it occurs sporadically, can

be inherited. Besides the epidemiology, the clinical signs and the pathology aid in the

diagnosis. All organs and systems are susceptible to malformations, but the musculoskeletal

system, nervous system and urogenital system are more frequently involved. The lack of

information is the main obstacle in diagnosis of the causes of congenital malformations,

especially sporadic malformations, which in most cases are not reported. In Brazil, there are

few data on the occurrence of congenital defects in small ruminants, especially goats, except

for studies with Mimosa tenuiflora and few individual case reports as perossomus elumbis in

sheep and epidermolysis bullosa in goats. To report the malformations associated with a

detailed epidemiological investigation is important for the identification of the causes and to

allow their control.

INDEX TERMS: Congenital malformations, genic mutation, poisoning plants, teratology.

1 Enviado para publicação em….. Aceito em ...... 2 Hospital Veterinário, Centro de Saúde e Tecnologia Rural (CSTR), Universidade Federal de Campina Grande (UFCG), Campus de Patos, 58708-110 Patos, PB, Brasil. *Autor para correspondência: [email protected]

13

RESUMO. Neste trabalho é realizada uma revisão da etiologia, epidemiologia, patogenia,

sinais clínicos, patologia, diagnóstico e controle das malformações em caprinos e ovinos.

Malformações congênitas podem ser definidas como todo defeito morfológico ou funcional

em um órgão ou sistema presente ao nascimento. Esses defeitos podem ocorrer nas fases de

desenvolvimento embrionário ou fetal podendo ser de origem intrínseca (alterações

cromossômicas ou genicas) ou extrínseca (agentes infecciosos, físicos e químicos). A

frequência das malformações congênitas em caprinos e ovinos é variável, dependendo dos

agentes causais envolvidos (hereditária ou ambiental), das raças, áreas geográficas e estação

do ano. Quando malformações ocorrem em forma de surtos, suspeita-se que a origem é não-

hereditária e quando ocorre de forma esporádica, pode ser de origem hereditária. Além da

epidemiologia, os achados clínicos patológicos dão suporte para o diagnóstico. Qualquer

sistema ou órgão é susceptível à ocorrência de malformações, mas os sistemas músculo-

esquelético, sistema nervoso e o sistema urogenital são mais frequentemente envolvidos. A

falta de informação é o principal entrave no rastreamento das possíveis causas das

malformações congênitas, principalmente as malformações esporádicas, que na maioria das

vezes não são relatadas. No Brasil, há poucos dados sobre a ocorrência de defeitos congênitos

em pequenos ruminantes, principalmente caprinos, a não ser por estudos com Mimosa

tenuiflora e poucos relatos de casos individuais como perossomus elumbis em ovinos e

epidermólise bolhosa em caprinos. O relato do aparecimento de malformações associada a

uma detalhada investigação epidemiológica é fundamental para a identificação das causas das

malformações e permite a tomada de medidas eficientes para o seu controle.

TERMOS DE INDEXAÇÃO: Malformações congênitas, teratologia, mutação gênica, plantas

tóxicas.

1. INTRODUÇÃO

Na antiguidade, acreditava-se que influências extrínsecas como “maus espíritos” ou dietas

podiam influenciar sobre desenvolvimento embriológico dos seres humanos e animais. No

século XIX, Etienne Geoffroy de Saint Hilaire estudou anomalias e criou o termo teratologia.

Na Europa, entre os anos 1950 e 1960, a teratologia ganhou atenção da comunidade científica

mundial devido aos efeitos deletérios da hipovitaminose A em embriões de ratos e porcos e

aos efeitos da talidomida, um sedativo utilizado durante a gravidez em seres humanos, que

resultou em malformações de membros em recém-nascidos. Até então, os defeitos congênitos

eram, na sua grande maioria, atribuídos a herança genética e a partir daí, a teratologia se

14

estabeleceu como ciência ligada à embriologia (Leipold et al. 1983, Sinowartz 2010). Hoje,

malformações congênitas são definidas como todo defeito morfológico estrutural ou funcional

na constituição de algum órgão ou sistema presente ao nascimento. Esses defeitos podem

ocorrer nas fases de desenvolvimento embrionário ou fetal e podem ser de origem intrinseca

(alterações cromossômicas ou genéticas) ou extrínseca (agentes infecciosos, físicos e

químicos) (Sinowarts 2010). Podem ser letais, semiletais ou compatíveis com a vida (Leipold

et al. 1983).

2. PRINCÍPIOS DA TERATOGENICIDADE E PATOGÊNESE GERAL

A patogênese dos defeitos congênitos é pouco entendida, mas é evidente que cada doença

ocasionada por um agente teratogênico específico ou gene tem sua própria patogênese. Seis

princípios regem a teratologia:

2.1. O GENÓTIPO DETERMINA A SUSCEPTIBILIDADE

A herança genética não é responsável por induzir uma malformação causada por um

teratógeno, mas existe uma considerável variação na suscetibilidade a teratógenos entre

genótipos. Em animais domésticos, o tipo e a incidência das malformações variam entre

espécies e entre raças. Por exemplo, ovelhas prenhes são mais resistentes aos efeitos

teratogênicos da Conium maculatum do que vacas (Keeler 1984).

2.2. O TERATÓGENO DEVE CHEGAR AO CONCEPTO

Todos os produtos químicos livres no plasma materno tem acesso ao concepto através

da placenta (Keeler 1984, McEvoy et al. 2001).

2.3. AS MALFORMAÇÕES INDUZIDAS PELOS TERATÓGENOS SÃO

DOSE-DEPENDENTE

O efeito teratogênico é dose-dependente e a incidência, o tipo e a severidade da

malformação dependem da composição do principio ativo, do estágio da gestação em que

ocorre a ingestão e da quantidade do teratógeno ingerido (Panter et al. 1998, McEvoy et al.

2001, Welch et al. 2011). Fatores que determinam a dose de teratógenos que chegam ao

concepto incluem: a quantidade do princípio ingerido; a quantidade resultante da degradação

no rúmen e intestino; a quantidade absorvida na circulação materna; a quantidade resultante

do metabolismo; a quantidade que passa a placenta e atinge a circulação do concepto; a

quantidade que atinge o local do insulto; e o período gestacional.

15

2.4. UM TERATÓGENO PODE PRODUZIR MORTE AO INVÉS DE

MALFORMAÇÕES

A alta incidência de abortos e reabsorção embrionária podem sinalizar problemas com

princípios teratogênicos. Princípios ativos teratogênicos ingeridos em altas doses durante a

gestação podem resultar em embrioletalidade ou mortalidade fetal (Keeler 1984, Panter et al.

1994, Bernardi 2002, Welch et al. 2011). Quando a embrioletalidade ocorre até a fase de

implantação, em torno do 16º dia, é dita mortalidade embrionária precoce, aqui o ciclo estral

não é afetado, podendo o animal ter cios repetidos e não emprenhar. Quando a

embrioletalidade ocorre entre a fase de implantação e o 34º dia em ovinos e 35º dia em

caprinos, período em que termina a organogênese, é dita mortalidade embrionária tardia e há

alteração no ciclo estral. Quando há mortalidade fetal, segue-se o aborto. Algumas plantas

como Astragallus spp. e Oxytropis spp., além de causar deformações podem causar, também,

morte fetal e aborto em caprinos e ovinos (Panter et al. 1994).

2.5. O CONCEPTO DEVE SER EXPOSTO NO PERÍODO DE

DESENVOLVIMENTO EM QUE É SUSCEPTÍVEL

O embrião em desenvolvimento consiste em grupos de células que estão em

crescimento e se diferenciam em diferentes taxas ao longo de períodos de tempo diferentes,

mas de uma forma estritamente controlada e sequencial. Portanto, um dos princípios mais

importantes da teratologia é que a susceptibilidade a um teratógeno varia de acordo com o

estágio de desenvolvimento do embrião ou feto, no momento da exposição (Keeler 1984,

McEvoy et al. 2001). Para um teratógeno produzir uma malformação especifica, ele deve

exercer sua influência em determinado momento da gestação. A susceptibilidade aos agentes

ambientais ou genéticos diminui com o avanço da idade do feto (Sinowartz 2010). Nem todos

os teratógenos atuam na mesma fase de desenvolvimento. Alguns são prejudiciais, apenas, em

um estágio inicial de desenvolvimento. A Veratrum californicum é um exemplo bem

conhecido; quando ingerida durante uma janela embriológica (no 14° dia de gestação) causa

ciclopia em cordeiros (Welch et al. 2011). Outros teratógenos afetam estádios de

desenvolvimento tardios como a tetraciclina, por exemplo, que causa manchas nos dentes e

outras estruturas ósseas após esses tecidos rígidos terem se formado (Sinowartz 2010).

Nas primeiras semanas até a implantação do embrião, em torno do 16º dia de gestação,

insultos normalmente não resultam em defeito no desenvolvimento. As malformações aqui

são de origem intrínseca (mutação genica ou cromossômica) e vem desde a fase de zigoto.

16

Nesse período o embrião é mais resistente a agentes teratogênicos. Agentes que perturbam a

fase de clivagem podem comprometer os estágios de mórula ou de blastocisto, ou interferirem

com a aposição normal do concepto à mucosa uterina, afetando a implantação do embrião na

mesma e podendo induzir embrioletalidade e perda embrionária precoce (Sinowatz 2010,

McEvoy et al. 2001).

Em ovinos, o período de suscetibilidade máxima às malformações começa quando a

organogênese é iniciada, entre o 16º e o 34° dias dia de gestação (Robinson 1951) e entre o

16º e 35º dia em caprinos, quando começa a fase fetal (Panter et al. 1990, Sinowatz 2010).

Os sistemas nervoso, esquelético e urogenital e os órgãos dos sentidos apresentam um

período de susceptibilidade maior, estendendo-se da organogênese à fase fetal (Bernardi 2002,

Schild 2007, Sinowarts 2010). Na fase fetal, algumas estruturas que sofreram diferenciação

normal sofrem deformações (Bernardi 2002). A artrogripose e a fenda palatina são tipos de

deformações que resultam da intoxicação por certos alcaloides, que produzem redução nos

movimentos fetais. Normalmente, os movimentos fetais são de flexão e extensão da cabeça,

do pescoço e dos membros. O movimento fetal restrito dos membros resulta na fixação

artrogripótica e a pressão da língua no palato duro, quando o pescoço fica em uma posição

constantemente fletida, inibe o fechamento do palato (Panter et al. 1987, Panter et al. 1990).

Os primeiros movimentos fetais ocorrem normalmente a partir do 34º e 35º dia de gestação

em ovinos e caprinos, respectivamente, o que coincide com o final do período embrionário e

início do período fetal. Entre os 38 e 40 dias de gestação em caprinos deveria ocorrer a fusão

do palato (Panter et al. 1990). Além do período de exposição, deve-se levar em consideração

o grau de lesão produzido pelo agente teratogênico. Um determinado teratógeno pode levar a

diferentes graus de anormalidades, dependendo do período de organogênese em que o animal

for exposto e da lesão produzida (Panter et al. 1998, Welch et al. 2011).

2.6. TERATÓGENOS EXERCEM SEUS EFEITOS POR MECANISMOS

ESPECÍFICOS

Teratógenos diferentes podem induzir o mesmo defeito metabólico provocando assim

deformidades similares. Por exemplo, o alcalóide quinolizidínico anagirina, em Lupinus spp.,

e o alcalóide piperidínico coniina, em Conium maculatum, provocam malformações ósseas

semelhantes, como artrogripose e fenda palatina, em fetos caprinos e ovinos (Keeler 1984).

17

3. ETIOLOGIA DAS MALFORMAÇÕES

As malformações congênitas ocorrem em consequência de fatores intrínsecos (genéticos) ou

extrínsecos (infecciosos, tóxicos e mecânicos) ou pela interação de ambos, agindo em um ou

mais estágios do desenvolvimento fetal. Além disso, muitas malformações ocorrem de forma

esporádica sem causa conhecida (Radostitis et al. 2007, Schild 2007, Sinowartz 2010). Os

agentes que conhecidamente causam defeitos congênitos são apresentadas a seguir:

3.1 FATORES INTRÍNSECOS

As malformações genéticas podem resultar em amplo espectro de distúrbios que pode

variar de malformações graves até a presença de distúrbios metabólicos em animais que

podem ter nascido aparentemente normais, mas que desenvolvem mais tarde o defeito, como

doenças do armazenamento (Radostitis et al. 2007, Smith & Sherman 2009).

O desenvolvimento normal é controlado por uma interação entre o genoma de um

embrião e seu ambiente. A susceptibilidade a um teratógeno depende do genótipo do embrião

e do modo como interage com fatores ambientais adversos. Isso é melhor explicado pela

diferença na susceptibilidade entre genótipos. Um exemplo, já mencionado, é a diferença na

susceptibilidade a Conium maculatum entre ovinos e bovinos (Keeler 1984). Além disso,

diferenças na susceptibilidade a teratógenos têm sido encontrados em diferentes linhagens de

determinadas espécies (Sinowarts 2010).

Malformações de origem genética são decorrentes de mutações, ou seja, modificações

do DNA. Modificações que alteram os cromossomos são denominadas mutações

cromossômicas. Antes da fase de implantação, o embrião é resistente à agentes teratogênicos,

mas susceptível a aberrações cromossômicas e mutações genicas. Se as modificações ocorrem

num loco gênico específico, alterando uma ou mais bases do gene, elas são denominadas

mutações gênicas. As mutações podem ocorrer em qualquer célula, tanto em células da

linhagem germinativa como em células somáticas. No entanto, apenas as mutações nas células

germinativas podem passar de uma geração à seguinte, sendo, portanto, as responsáveis pelas

doenças hereditárias (Thompson et al. 1993, Thompson et al. 2008).

3.1.1. MUTAÇÕES CROMOSSÔMICAS

As mutações cromossômicas são geralmente associadas com malformações múltiplas.

Alterações cromossômicas podem decorrer de mudanças quantitativas no número de

cromossomos (poliploidia ou aneuploidia), decorrentes de falha durante a mitose e/ou meiose.

Radiações e teratógenos químicos podem causar quebras e deleções na estrutura dos

18

cromossomos. A importância da anormalidade cromossômica nos defeitos congênitos em

animais pecuários não tem sido estudada extensamente (Mine 2000, Otto 2006, Radostitis et

al. 2007, Schild 2007).

3.1.2. MUTAÇÃO GÊNICA

A maioria dos defeitos congênitos hereditários conhecidos é transmitida por genes

recessivos autossômicos, que resultam no nascimento de animais malformados, cujos

progenitores são normais. Os genes recessivos são a mais importante forma de transmissão

hereditária de enfermidades. Estes genes são transmitidos de geração em geração pelos

indivíduos heterozigotos e, deste modo, perpetuam-se nas raças das diferentes espécies

animais (Radostitis et al. 2007, Schild 2007).

Os genes dominantes manifestam-se na primeira geração, em cruzamentos de animais

portadores heterozigotos com indivíduos homozigotos normais, sendo que as enfermidades

transmitidas desta forma são mais facilmente controladas. Genes dominantes ou recessivos

podem apresentar penetrância e/ou expressividade variável. No caso de penetrância

incompleta o número de animais com a malformação é menor do que o número esperado de

animais afetados, portanto, há animais que têm o gene dominante ou são homozigotos para

genes recessivos e não evidenciam a malformação. Na expressividade variada o fenótipo dos

indivíduos apresenta graus diferentes da malformação, podendo haver, inclusive, casos

subclínicos. Outras formas de transmissão hereditária estão representadas pela

sobredominância e pela herança poligênica. A herança por sobredominância resulta em:

indivíduos normais, com malformação e portadores que não apresentam o defeito e têm

fenótipo superior para características produtivas (neste caso há risco de que sejam utilizados

como reprodutores). A herança poligênica caracteriza-se por defeitos transmitidos por vários

pares de genes (Mine 2000, Otto 2006, Radostitis et al. 2007, Schild 2007, Banerjee 2010).

3.2 FATORES EXTRÍNSECOS

Dentre os fatores ambientais que podem causar defeitos congênitos destacam-se

fatores físico-mecânicos, deficiência nutricional, infecções virais e intoxicações por fármacos

e plantas. O feto é um indicador biológico sensível da presença de algumas influências

nocivas no meio ambiente. Defeitos de origem genética ocorrem de forma esporádica e

defeitos congênitos não hereditários que ocorrem como surtos, levam a suspeitar de uma

possível origem infecciosa ou tóxica (Delatour 1983, Keeler 1984). Quando os defeitos

ocorrem em forma de surtos, repetidamente, há um considerável interesse devido às perdas

19

econômicas que estão envolvidas com esse problema. A susceptibilidade a teratógenos é

maior no período de organogênese e diminui com a idade fetal e o tipo de lesão vai depender

da natureza e gravidade (tamanho da dose e duração da aplicação) do estímulo nocivo (Keeler

1984, Panter et al. 1990).

3.2.1. FATORES FÍSICO-MECÂNICOS

Anomalias comuns como luxações de quadril e deformações do crânio têm sido

atribuídas a fatores mecânicos que impõem uma pressão intra-uterina anormal sobre o feto.

Este fenômeno é muitas vezes relacionado à uma quantidade reduzida de fluido na cavidade

amniótica ou à malformações uterinas na mãe (Radostitis et al. 2007).

A radiação ionizante é um potente teratógeno em todas as espécies. A resposta

depende da dose e fase de desenvolvimento em que o embrião é exposto à radiação. Embora

a dose de radiação ionizante, em um exame de raios-X de diagnóstico, seja mínima, deve-se

evitar em fêmeas grávidas por causar quebras das cadeias de ADN e mutações. A radiação

ionizante tem sido associada a uma variedade de defeitos congênitos, incluindo microcefalia,

fenda palatina, malformações esqueléticas e anomalias do sistema nervoso (Sinowarts 2010).

A hipertermia também é capaz de induzir defeitos congênitos nas diversas espécies

animais. A indução experimental de hipertermia em gestantes acarreta deformidades

congênitas, o que não parece ter equivalente de ocorrência natural. As anormalidades mais

graves ocorrem após a exposição no inicio da gestação (18-25 dias em ovelhas). As

malformações vistas são artrogripose e atrofia dos membros de cordeiros. A hipertermia em

ovelhas, entre o 30° e o 80° dia de gestação, causa retardo no crescimento fetal (Radostitis et

al. 2007).

3.2.2. FATORES NUTRICIONAIS

Há muitos defeitos congênitos em animais que, reconhecidamente, são causados por

deficiências de nutrientes específicos na alimentação da mãe. Na deficiência de iodo, o bócio

e o aumento na mortalidade neonatal ocorrem em todas as espécies. A deficiência pode ser

também devido à deficiência primária ou induzida por nitrato ou pela ingestão de Brassica

spp. A ataxia enzoótica dos cordeiros ocorre tanto por uma deficiência primária de cobre

quanto por uma deficiência secundária, em que a disponibilidade de cobre é comprometida

por outros minerais como molibdênio, enxofre e ferro. Na hipovitaminose D, ocorre

raquitismo neonatal (Radostitis et al. 2007).

20

A deficiência congênita de cobalto é referida como redutora do vigor em cordeiros ao

nascimento e como causa de aumento da mortalidade perinatal devido a um defeito na função

imunológica. A má nutrição materna pode resultar em aumento da mortalidade neonatal e

deve ser suspeitada como gênese de deformidades (Radostitis et al. 2007).

3.2.3. AGENTES INFECCIOSOS

Vários vírus causam malformações em caprinos e ovinos. A teratogênese viral

depende da penetração e replicação do vírus, da fase de gestação em que a infecção ocorre, da

patogenicidade do vírus (por exemplo: cepas do vírus da diarreia viral bovina citopatogênicas

versus não-citopatogênicas) e do estado imunológico do feto no momento da infecção. As

infecções virais podem causar morte pré-natal, nascimento de neonatos inviáveis portadores

de malformações ou nascimento de neonatos viáveis, mas com crescimento retardado ou

função anormal (cegueira). A idade gestacional no momento da infecção é a principal

influência. Durante o início de desenvolvimento, a zona pelúcida funciona como uma barreira

contra infecções virais, mas quando ela se rompe no blastocisto, os embriões tornam-se

vulneráveis à infecção viral. A barreira placentária previne infecções virais em algum grau,

mas muitos vírus podem atravessá-la. Portanto, infecções virais maternas em estágios críticos

do desenvolvimento podem ser uma causa grave de malformações (Sinowarts 2010).

O Virus Akabane ao infectar ovelhas e cabras prenhes pode causar malformações nos

conceptos, podendo causar artrogripose, microencefalia e hidrocefalia. Em ovelhas, a

susceptibilidade para os defeitos congênitos é maior entre 30 e 50 dias de gestação (Kurogi et

al. 1977, Pugh 2002, Smith & Sherman 2009). O vírus do Vale Cachê é conhecido por causar

malformações similares às provocadas pelo vírus Akabane em cordeiros. O período de

susceptibilidade para os defeitos congênitos situa-se entre 36 e 45 dias de gestação

(Radostitis et al. 2007). Infecções com o vírus Wesselsbron e o vírus da Febre do Vale Rift

são relatadas como causadoras de anomalias do sistema nervoso central em ovinos (Pugh

2002, Radostitis et al. 2007, Smith & Sherman 2009).

Na infecção natural em ovelhas pelo vírus da língua azul (entre o 50° e o 80° dia de

gestação) pode ocorrer morte e reabsorção fetais, ou nascimento de animais mortos ou

enfraquecidos, e, ainda, hidrocefalia ou hidranencefalia, bem como, artrogripose. Vacinação

em ovelhas com vírus atenuado entre o 35º e o 45º dia de gestação provoca elevada

prevalência de porencefalia nos cordeiros. Defeitos similares podem ser produzidos pelo

vírus Chuzan e Aino (Osburn 1972, Pugh 2002, Tsuda et al. 2004, Smith & Sherman 2009)

21

A infecção pelo vírus da enfermidade da fronteira entre o 16 e o 90º dia de gestação

das ovelhas, pode resultar em morte embrionária precoce, aborto, natimortos e nascimento de

cordeiros defeituosos ou pequenos e fracos, com crescimento retardado e nascimento de

cordeiros persistentemente infectados ou cordeiros com hipomielinogênese, hidranencefalia e

displasia cerebelar (Sawyer et al. 1991, Pugh 2002, Smith & Sherman 2009)

3.2.4. FATORES QUÍMICOS

Dentre os fatores ambientais que podem causar defeitos congênitos destacam-se as

intoxicações por plantas e por fármacos (Delatour 1983). Qualquer substância química que

tem o potencial de alterar a função celular, ou que é citotóxica tem potencial teratogênico. Os

mecanismos que levam à teratogênese podem variar desde a inibição de sistemas de enzimas

específicas (por exemplo anidrase carbônica) à interferência com o metabolismo do ADN

(Sinowartz 2010). Por exemplo, os alcalóides esteroidais presentes na V. californicum (Keeler

1978, Panter et al. 1994) interferem no desenvolvimento do tubo neural, afetando as células

do neuroepitélio embrionário que secretam catecolaminas. A inibição da liberação de

catecolaminas interrompe a migração normal e o desenvolvimento das células embrionárias,

causando ciclopia (Sim et al. 1985). Contudo o mecanismo de muitos teratógenos é

desconhecido (Sinowartz 2010).

Várias drogas terapêuticas, em níveis de exposição definidas e em estágios críticos de

desenvolvimento, podem também ser potencialmente teratogênicas. Alguns benzimidazóis

(parabendazol, cambendazol, oxfendazol, netobimina) são teratogênicos importantes para

ovinos, causando anormalidade esquelética, renal e vascular, quando administrados entre o

14° e o 24° dia de gestação (Pugh 2002, Radostitis et al. 2007). Outras drogas como cortisona,

estradiol, bismuto, selênio e sulfonamidas podem, também, induzir o aparecimento de

malformações congênitas (Delatour 1983).

A concentração de determinadas drogas e seu potencial teratogênico para

determinadas espécies, ainda não está claro. Por exemplo, a talidomida é altamente

teratogênica em humanos, coelhos, e primatas, mas não em roedores de laboratório. A

utilização de alguns antibióticos durante a gravidez tem sido associada com defeitos

congênitos, a estreptomicina em dose alta pode resultar em surdez do ouvido interno; a

tetraciclina pode atravessar a barreira placentária e causar amarelamento dos dentes e, em

doses elevadas, interferir com a formação de esmalte, quando administrada no final gestação

(Sinowartz 2010).

22

Os defeitos congênitos podem ser causados, também, pela ingestão, durante a

gestação, de plantas tóxicas como: Veratrum californicum, Lupinus spp., Conium maculatum,

Nicotiana spp., Astragalus spp., Oxytropis spp., Trachymene spp., e Mimosa tenuiflora

(Keeler 1984, Panter et al. 2000, 1994, Cheeke, 1998, Gardner et al. 1998, James et al. 2004,

Pimentel et al. 2007). Algumas dessas plantas contêm como princípio tóxico alcalóides

esteroidais, quinolizidínicos ou piperidínicos, que tem efeito teratógeno (Keeler 1984, Panter

et al. 1994, Gardner et al. 1998).

A Veratrum californicum está relacionada ao aparecimento de ciclopia congênita e

deformidade do crânio de cordeiros quando ingerida no 14º dia de gestação por ovelhas, com

anormalidades de membros se ingerida entre o 27º e o 32° dia de gestação e com estenose

traqueal se ingerida entre o 31° e o 33° dia de gestação (Panter et al. 1994). Também é descita

como tóxica em caprinos, bovinos (Gardner et al. 1998), coelhos, hamsters, ratos e

camundongos (Keeler 1984). Essa planta contém alcalóides esteroidais: ciclopamina,

cicloposina e jervina. Desses três, ciclopamina é o que apresenta maior concentração na planta

(Keeler 1978, Panter et al. 1994). Esses compostos além de serem responsáveis por

malformações congênitas também causam perdas embrionárias em ovelhas. Quando V.

californicum é ingerido por ovelhas prenhes entre 14º e 21º dias de gestação, poderá ocorrer

alta incidência de morte embrionária e reabsorção (Panter et al. 1994, Gardner et al. 1998).

Em ovelhas prenhes que se alimentam da planta entre 27 e 41 dias de gestação, a frequência

de mortalidade embrionária diminui, mas pode ocorrer alta incidência de perdas neonatais,

especificamente entre os dias 27 e 33 de prenhez (Keeler et al. 1985). Além de interferir nas

células do neuroepitélio embrionário que secretam catecolaminas e inibir a migração normal e

o desenvolvimento das células embrionárias, a jervina de V. californicum interfere no

metabolismo das cartilagens, responsável pela estenose traqueal e encurtamento dos ossos

metacarpo, metatarso e tíbia, comprometendo o desenvolvimento dos precursores

condrogênicos no desenvolvimento dos condrócitos (Campbell et al. 1987).

No gênero Lupinus, alguns alcalóides como os quinolizidínicos (anagirina) e

piperidínicos (amodendrina) são responsáveis pela ação teratogênica em bovinos (Keeler

1984). L. formosus contém alta concentração de amodendrina e é responsável por causar

malformações esqueléticas acentuadas e fenda palatina em bovinos, caprinos e possivelmente

em ovinos (Panter et al. 1990). Essa substância tem potencial teratogênico maior que a

anagirina, que causa malformações ósseas (doença do bezerro torto) (Keeler 1976). Esses

alcalóides produzem redução nos movimentos fetais, desencadeando malformações ósseas

nos animais susceptíveis, como foi comprovado em cabras prenhes (Panter et al. 1990). Os

23

animais podem apresentar flexão ou hiperextensão dos membros e coluna vertebral e

anormalidades secundárias das costelas. A intoxicação em ovelhas ou cabras quando ingerem

Lupinus spp., entre 30 a 60 dias de gestação, pode resultar em múltiplas contraturas

congênitas (artrogripose, escoliose, xifose, lordose e fenda palatina). O aparecimento de fenda

palatina foi descrito em caprinos e ovinos que ingeriram Lupinus spp entre 35 e 41 dias de

gestação (Panter & Keeler 1992).

A Conium maculatum contém alcaloides piperidínicos (Keeler 1984), dos quais,

coniina, y-coniceína e n-metilconiína são conhecidos por serem teratogênicos para suínos,

bovinos, ovinos e caprinos (Keeler et al. 1980, Panter et al. 1990). Ovelhas prenhes são mais

resistentes aos efeitos teratogênicos da C. maculatum do que bovinos (Keeler 1984). A

administração de C. maculatum fresco, contendo y-coniceína, para ovelhas ou cabras prenhes

resulta em efeitos tóxicos e teratogênicos (Keeler et al. 1980). Quando ingerido por ovelhas

no período de 30 a 60 dias de gestação causa artrogripose, escoliose, torcicolo e fenda

palatina. A infusão dos alcaloides puros, y-coniceína e n-metilconiína, dentro da vesícula

amniótica de cabras causa intoxicação e morte fetal em alguns casos. Quando a infusão ocorre

entre 35 e 41 dias de gestação verificam-se severos defeitos esqueléticos e fenda palatina em

caprinos. Os níveis tóxicos de y-coniceína e n-metilconiína aparentemente podem perdurar de

forma crescente na circulação fetal até o 50º dia de gestação, cerca de 10 dias após o final da

administração. Isso sugere que a ingestão de C. maculatum em um único dia ou por alguns

dias pode expor o feto a dosagens suficientes para a intoxicação, mesmo que já tenha passado

o período de maior susceptibilidade, desencadeando malformações (Panter & Keeler 1992).

A nicotina encontrada em Nicotiana spp. foi discutida como possível teratógeno,

entretanto, Keeler et al. (1984) demonstraram que as malformações esqueléticas eram devidas

ao alcalóide piperidínico, anabasina, extraído em concentrações elevadas de N. glauca e nos

talos da N. tabacum. A ingestão de N. glauca por ovelhas e cabras prenhes causa fenda

palatina e malformações esqueléticas. Quando é ingerida durante o período de 37 a 39 dias em

ovelhas e 34 a 41 dias de gestação em cabras, pode resultar em morte e reabsorção

embrionárias (Panter et al. 2000). A fenda palatina ocorre entre 35 e 41 dias de gestação em

cabras prenhes e possivelmente as malformações esqueléticas ocorram entre os dias 40 e 60

de gestação (Panter e Keeler 1992).

Astragalus spp. e Oxytropis spp. (locoweeds) são plantas conhecidas por serem

teratogênicas, mas seu principio tóxico ainda permanece desconhecido. O alcaloide

indolizidínico swainsonina presente nesses gêneros é responsável por uma doença do

armazenamento de oligossacarídeos conhecida por locoism em ovinos, bovinos e equinos,

24

mas não tem sido demonstrado que esse alcaloide apresenta efeitos teratogênicos, responsável

pelo aborto e malformações (Panter et al. 1994, Gardner et al. 1998, Cook et al. 2009). As

principais malformações observadas em ovinos que ingerem algumas espécies de Astragalus e

Oxytropis são rotação lateral dos membros torácicos, contração de tendões, flexura e

hipermobilidade de cartilagens e flexão do carpo. Muitos cordeiros recuperam-se dessas

alterações parcialmente (James et al. 1967). Algumas espécies além de causar deformidades

podem causar embrioletalidade e abortos (Keeler 1984, Panter et al. 1994).

Trachymene spp. causam uma condição em ovinos denominada de “cordeiros das

pernas curvadas”. Trachymene cyanantha e Trachymene ochracea, nativas da Austrália,

apresentam ação teratogênica para ovinos, causando um crescimento desigual das placas

epifisárias durante a fase fetal. Mas pode ocorrer também intoxicação de neonatos que

ingeriram leite de ovelhas. Quando ovelhas ingerem a planta após o 35º dia de gestação

ocorre malformações dos membros dos cordeiros. Os animais apresentam principalmente

malformações dos membros torácicos tais como desvio, deformações e desgaste irregular dos

cascos dos membros afetados (Dowling & Mckenzie 1993). O princípio tóxico responsável

pelas malformações é desconhecido (Keeler 1984).

No Nordeste brasileiro, a jurema preta (Mimosa tenuiflora) causa malformações em

caprinos (Pimentel et al. 2007) e ovinos (Santos et al. 2012). Pimentel et al (2007) testaram os

efeitos do consumo de M. tenuiflora durante todo o período gestacional em cabras e

verificaram malformações em 75% das crias, encontrando queilosquise, opacidade de córnea,

dermóide ocular, estenose segmentar do cólon e escoliose. Medeiros et al (2008)

demonstraram o efeito teratogênico da M. tenuiflora ao reproduzir malformações em 84%

dos filhotes de ratas que receberam ração contendo 10% de sementes, entre 6o e o 21o dia de

gestação. Os autores encontraram defeitos como fenda palatina, escoliose, esterno bífido,

aplasia de esternebras, hipoplasia do osso nasal, etc. Além de malformações, M. tenuiflora é

descrita como causa de mortalidade embrionária em caprinos (Dantas et al. 2012) e ovinos

(Santos et al. 2012). O princípio ativo de M. tenuiflora é, ainda, desconhecido, mas alcaloides

derivados da triptamina foram isolados em folhas e sementes (Gardner et al. 2011). O período

de gestação, no qual ocorre a ação da planta e as malformações não é conhecido, mas

acredita-se que a época de maior susceptibilidade seja durante os primeiros 60 dias de

gestação (Riet-Correa et al. 2009).

25

4. EPIDEMIOLOGIA

A frequência das malformações congênitas não tem uma proporção fixa uma vez que podem

ser causadas por diferentes agentes (hereditários ou ambientais) e pode variar entre as raças,

áreas geográficas e estações do ano. Malformações hereditárias ocorrem de forma esporádica

(Dennis & Leipold 1972); enquanto que as malformações não hereditárias podem ocorrer

como surtos, devendo ser levado em consideração uma possível origem infecciosa ou tóxica

(Delatour 1983, Keeler 1984). Quando as malformações ocorrem em formas de surto,

repetidamente, em um dado rebanho ou área geográfica, há um considerável interesse em se

investigar a causa, devido às perdas econômicas que estão envolvidas. Pelo contrário, boa

parte das malformações que ocorrem, individualmente, de forma esporádica, acabam não

sendo estudadas (Radostitis et al. 2007, Schild 2007, Sinowartz 2010). Além disso, muitos

defeitos são identificados apenas durante a necropsia, que nem sempre é realizada em animais

a campo, tornando ainda mais complicado o estudo da frequência das malformações

(Marcolongo-Pereira et al. 2010).

A falta de informações adequadas, a inadequada descrição anátomo-patológica, a

inadequada análise genética e a falha na interpretação dos achados que contribuem para o

entendimento e associação entre os processos embriológicos, patológicos e hereditários

constituem deficiências com relação ao estudo dos defeitos congênitos nos animais

domésticos (Leipold et al. 1983). Devido a essa falta de informação há dificuldade no estudo

dessas anomalias e da determinação das possíveis causas, de forma que o diagnóstico é um

desafio na prática veterinária. No Brasil, são poucos os dados sobre a ocorrência de defeitos

congênitos em pequenos ruminantes, principalmente caprinos, a não ser por estudos com

Mimosa tenuiflora (Pimentel et al. 2007, Dantas et al. 2012, Santos et al 2012) e poucos

relatos de casos individuais, como perossomus elumbis em ovinos (Castro et al. 2008), ou

coletivos, como epidermólise bolhosa em caprinos (Medeiros et al. 2012).

A frequência de malformações congênitas é estimada entre 0,2% e 2% dos ovinos

nascidos (Schild 2007). Em levantamento realizado em ovinos nos Estados Unidos de um

total de 21.031 cordeiros da raça Rambouillet nascidos, foram observados 26 animais

defeituosos em um período de 15 anos. Neste trabalho os autores concluíram que a ocorrência

de 4,2% de natimortos e 3% de aborto foram as causas de perdas econômicas mais

importantes (Saperstein et al. 1975). Em outro estudo, de 4.408 nascimentos de cordeiros,

1,6% apresentavam defeitos congênitos graves (Hughes et al. 1972).

No Rio Grande do Sul é observada uma taxa de prevalência de 0,5% de malformações

congênitas em ovinos, incluindo as malformações esporádicas, as enfermidades hereditárias e

26

os defeitos congênitos produzidos por causas ambientais (Schild 2007). Marcolongo–Pereira

et al. (2010) encontraram uma frequência de 0,36% de malformações em ovinos na região sul

do Rio Grande do Sul. No Laboratório Regional de Diagnóstico, em Pelotas, Rio Grande do

Sul, de um total de 821 ovinos examinados entre 1978 e 2008, as malformações congênitas

representaram 0,24% (Schild et al. 2009). No Rio Grande do Sul, as malformações

representaram entre 0,5% e 0,8% das causas de mortalidade perinatal em cordeiros (Mendez

et al. 1982, Oliveira e Barros 1982), o que representa entre 0,1% e 0,3% dos cordeiros

nascidos. Na região nordeste, as malformações representam 23% das causas de mortes

neonatais em cordeiros (Nóbrega Junior et al. 2005), e perfazem 7,62% em cabritos

(Medeiros et al., 2005). Assis (2011) encontrou uma frequência de 4,99% caprinos e 1,87%

ovinos com anomalias congênitas. Dantas et al (2010) estudando malformações em

ruminantes no semiárido brasileiro, no período de 2000 a 2008, encontraram em 418 ovinos,

5,01% de malformações, sendo 4,3% associadas à intoxicação por M. tenuiflora e 0,71%

malformações esporádicas. Em 495 caprinos a frequência de malformações foi de 2,41%,

sendo 1,81% causadas por intoxicação por M. tenuiflora e 0,6% de malformações

esporádicas.

Uma expressão da prevalência de defeitos congênitos é de pouquíssimo valor, a

menos que esteja relacionada ao tamanho da população sob-risco, mas os registros não

costumam incluir esses dados fundamentais. Além disso, a maioria dos registros disponíveis é

retrospectiva e se baseia no número de casos encaminhados em um laboratório ou hospital.

5. ACHADOS CLÍNICOS E PATOLÓGICOS

A maioria das malformações congênitas é facilmente reconhecida ao nascimento. Em alguns

casos os defeitos são reconhecidos somente após um cuidadoso exame clínico-patológico

(Saperstein et al. 1975). As lesões podem ser identificadas macroscópica ou histologicamente

ou por ambas as formas (Leipold et al. 1983). Qualquer sistema ou órgão é susceptível à

defeitos congênitos, mas alguns são mais frequentemente afetados do que outros. O sistema

músculo-esquelético, o sistema nervoso e o sistema urogenital são frequentemente envolvidos

em malformações congênitas (Leipold et al. 1983), talvez devido ao seu prolongado período

de desenvolvimento embrionário.

No Brasil, em caprinos e ovinos, diversas malformações esporádicas ou causadas por

diversos agentes incluem acefalia, dicefalia, artrogripose, microftalmia, dermóide ocular,

fenda palatina, atresia anal, hipomielinogênese devido à carência de cobre em ovinos,

epidermolise bolhosa e condrodisplasia (Schmidt & Oliveira 2004, Medeiros et al. 2005,

27

Nóbrega Júnior et al. 2005, Dantas 2010). Anomalias da mandíbula (agnatia, braquignatia e

prognatia) são descritos em caprinos e ovinos em municípios da Bahia (Magalhães et al.

2008). Algumas malformações em caprinos e ovinos aparecem combinadas, como o caso da

fenda palatina e artrogripose em casos de intoxicação por M. tenuiflora. A artrogripose pode

afetar somente os membros anteriores ou os membros posteriores (bimélica), como também

pode afetar os quatro membros (tetramélica) (Medeiros et al. 2005, Nobrega Junior et al.

2005, Pimentel et al. 2007, Dantas et al. 2010). Os animais afetados, geralmente, nascem em

partos distócicos, frequentemente mortos. Quando nascem vivos tem dificuldade de se manter

em pé ou alimentar-se e podem morrer. Outras alterações esqueléticas são malformações de

coluna vertebral como cifose, escoliose e torcicolo. Perosomus elumbis ou agenesia do

segmento caudal da coluna vertebral associada à artrogripose e atrofia muscular dos membros

pélvicos foi descrita em ovino neonato no estado de São Paulo (Castro et al. 2008).

6. DIAGNÓSTICO

O diagnóstico dos defeitos congênitos é complexo e o desafio depois de identificar a

anormalidade é determinar sua causa. As considerações epidemiológicas oferecem melhores

indícios na hora de se diagnosticar a causa, se a malformação é de origem hereditária ou

ambiental. A frequência com que uma determinada malformação ocorre em um rebanho pode

ser um indicativo importante para a determinação de sua origem. Quando malformações

ocorrem em forma de surtos, de modo geral, existe um agente causal ambiental (vírus,

plantas, medicamentos, agentes físicos, etc.). A epidemiologia dessas malformações,

combinada com achados clínicos patológicos, bem como o histórico da existência e exposição

aos teratógenos, dá suporte para o diagnóstico. Para o diagnóstico de defeitos congênitos que

ocorrem em consequência de agentes ambientais é necessário conhecer-se o estado nutricional

das fêmeas prenhes e a ocorrência de infecções virais no rebanho. O conhecimento do manejo

utilizado no rebanho, da aplicação de medicamentos em determinados períodos da gestação e

o reconhecimento das áreas onde os animais permanecem durante a gestação são dados

fundamentais para a determinação da etiologia destas enfermidades (Marcolongo-Pereira et al.

2010).

Os defeitos congênitos que ocorrem esporadicamente em um único animal constituem

o maior problema. Há, usualmente, pouca dificuldade em definir a condição clinicamente,

mas pode ser impossível determinar a causa. Quando anormalidades individuais ocorrem

espontaneamente, a determinação da sua causa é, muitas vezes, um desafio, mesmo quando

se empregam todos os métodos de exame. Defeitos congênitos hereditários transmitidos por

28

genes recessivos apresentam-se em baixa frequência nos rebanhos e, geralmente, expressam-

se em gerações alternadas. Nesse caso, o conhecimento da genealogia do rebanho é de

utilidade para a determinação da etiologia. Se houvesse registros adequados sobre a

reprodução, seria razoavelmente fácil verificar a possível participação da hereditariedade. A

determinação atualizada dos agentes reconhecidos como teratógenos surgiu principalmente

de estudos epidemiológicos sequenciais, o mesmo acompanhamento deveria ser aplicado no

aparecimento de casos individuais, que não são na maioria das vezes relatados. A introdução

de um determinado reprodutor ou sêmen em um rebanho, anterior ao aparecimento da

malformação, é um indicativo de transmissão hereditária, quando as demais causas podem ser

descartadas, e pode permitir a identificação de animais descendentes portadores. Em geral é

impossível determinar a etiologia de casos esporádicos de defeitos congênitos, porém,

quando o número de animais acometidos aumenta, passa a ser indispensável uma tentativa de

se estabelecer a causa. A não notificação desses casos esporádicos, aliada ao não estudo

dessas malformações permite que esses portadores continuem transmitindo esses possíveis

genes (Radostitis et al. 2007, Schild 2007, Marcolongo-Pereira et al. 2010) .

7. CONTROLE E PROFILAXIA Uma das formas de se evitar malformações congênitas hereditárias transmitidas por genes

recessivos é não fazer uso de consanguinidade nos rebanhos, entretanto, os genes

indesejáveis permanecem nos animais portadores e perpetuam-se nas diferentes raças

animais. Ao aparecer casos esporádicos de malformações, estes devem ser notificados para

instituições de pesquisa e então tentar fazer o estudo genético (Schild 2007). Testes de

progênie são indicados, como forma de controle, para reprodutores, fundamentalmente para

aqueles utilizados em centrais de inseminação artificial, cujo sêmen é distribuído em larga

escala. O cruzamento de um touro com 40 filhas permite a comprovação, com 99% de

segurança, de que o mesmo não é portador de genes recessivos indesejáveis se todos os

descendentes deste cruzamento forem normais (Radostitis et al. 2007).

Defeitos congênitos devidos à agentes teratogênicos podem ser controlados a partir do

conhecimento dos fatores que levam a ocorrência desses defeitos, evitando uso de

medicamentos durante a gestação, controlando infecções virais e mantendo um bom estado

nutricional para os animais em gestação. Por exemplo, sugere-se como medidas de controle e

prevenção evitar que cabras e ovelhas prenhes sejam colocadas para pastejar em áreas com M.

tenuiflora na fase de organogênese ou de desenvolvimento embrionário, principalmente

durante os primeiros 60 dias de gestação (Riet-Correa et al. 2009).

29

8. CONSIDERAÇÕES FINAIS

No estudo das malformações o principal entrave é a falta de informação. O relato do

aparecimento de malformações associada a uma detalhada investigação epidemiológica é

fundamental para a identificação das causas das malformações e permite a tomada de medidas

eficientes para o seu controle. Algumas informações são essenciais na investigação

epidemiológica como: frequência com que os defeitos ocorrem; condição nutricional das mães

e dos neonatos acometidos e alterações nas fontes comuns do alimento; histórico sobre

enfermidades das mães dos neonatos acometidos; histórico do uso de fármacos nas fêmeas

durante a gestação; área geográfica onde as fêmeas se encontram; presença de plantas tóxicas;

estação do ano em que ocorreram as agressões; e se houve introdução de animais no rebanho.

Essas informações podem auxiliar para determinar se a etiologia é hereditária ou não e

direcionar a busca da origem do problema.

9. REFERÊNCIAS

Assis A.C.B.O. 2011. Enfermidades de ovinos e caprinos no semiárido paraibano e avaliação

dos protocolos de controle de linfadenite caseosa. 54f. Dissertação (Mestrado em

Medicina Veterinária), Escola de Veterinária, Universidade Federal de Campina Grande,

Patos-PB.

Banerjee S. 2010. A lethal genetic fator in garole lambs – a case study. World applied science

journal. 10(4):397-401.

Bernardi M.M. 2002. Exposição aos medicamentos durante o período perinatal, p.692-699.

In: Spinosa H.S., Gorniak S.L. & Bernardi M.M. (Edes), Farmacologia Aplicada à

Medicina Veterinaria. 3ª ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, RJ. 752p.

Campbell M., Horton W. & Keeler R. 1987. Comparative effects of retinoic acid and Jervine

on chondrocyte differentiation. Teratology. 36: 235-243.

Castro M.B., Szabó M.P.J., Moscardini A.R.C. & Borges J.R.J. 2008. Perosomus elumbis em

um cordeiro no Brasil. Ciência Rural, Santa Maria, 38(1):262-265.

Cheeke P.R. 1998. Natural Toxicants in Feeds, Forages, and Poisonous Plants. 2nd Danville,

Interstate Publishers. 479p. 691-699p.

Cook D., Ralphs M.H., Welch K.D. & Stegelmeir B.L. 2009. Locoweed poisoningin

livestock. Rangelands. 31(1): 16-21.



Toxicon 59 (5) 555-557.

30

Dantas A.F.M., Riet-Correa F., Medeiros R.M.T., Galiza G.J.N., Pimentel L.A., Anjos B.L. &

Mota R.A. 2010. Malformações congênitas em ruminantes no semiárido do Nordeste

Brasileiro. Pesq. Vet. Bras. 30(10):807-815

Delatour, P. 1983. Some aspects of the teratogenicity of veterinary drugs. Veterinary

Research Communications. 7:125-131.

Dennis, S.M. & Leipold, H.W. 1972. Aprosopia (facelessness) in lambs. The Veterinary

Record. 90:365-367.

Dowling R.M. & Mckenzie R.A. 1993. Poisonous Plants. A field guide. Department of

Primary Industries, Queensland, Australia.164p.

Gardner D.R., Panter K.E., Stegelmeier B.L., James L.F., Ralphs M.H., Pfister J.A. & Schoch

T.K. 1998. Livestock poisoning by teratogenic and hepatotoxic range plants, p.303-306.

In: Garland T. & Barr A.C. (ed.). Toxic Plants and Other Natural Toxicants. CAB

International, New York. EUA. 585p.

Gardner D.R., Riet-Correa F. & Panter K.E. 2011. Alkaloid profiles of Mimosa tenuiflora

and associated methods of analysis. p.600-605. In:Poisoning by Plants, Mycotoxins and

Related toxins Edited By Riet Correa F, Pfister J, Schild A. L. & Wierenga T. CAB

International. 739p.

Hughes, K.L.; Haughey, K.G.; Hartley, W.J. 1972. Spontaneous congenital developmental

abnormalities observed at necropsy in a large survey of newly born dead lambs.

Teratology. 5 ( 1):5-10.

James L.F., Shupe J.L., Binns W. & Keeler R.F. 1967. Abortive and teratogenic affects of

locoweed on sheep and cattle. American Journal Veterinary Research. 28 (126): 1379-

1388.

James L.F., Panter K.E., Gaffield W. & Molyneux R.J. 2004. Reviews-Biomedical

applications of poisonous plant research. J. Agric. Food Chem. 52:3211-3230.

Keeler R.F. 1976. Lupine alkaloids from teratogenic and nonteratogenic lupins. III.

Identification of anagyrine as the probable teratogen by feeding trials. Journal of

Toxicological and Environmental Health. 1:887-889.

Keeler R.F. 1978. Cyclopamine and related steroidal alkaloid teratogens: their occurrence,

structural relationship and biological effects. Lipids. 13: 708-7-15.

Keeler R.F., Balls L.D., Shupe J.L. & Crowe M.W. 1980. Teratogenicity and toxicity of

coniine in cows, ewes and mares. Cornell Veterinarian. 70: 19-26.

Keeler R.F. 1984. Teratogens in plants. Journal of animal science. 58: 1029-1039.

31

Keeler R.F., Young S. & Smart R. 1985. Congenital tracheal stenosis in lambs induced by

maternal ingestion of Veratrum californicum. Teratology. 31: 83-88.

Kurogi H., Inaba Y., Takahashi E., Sato K., Satoda K., Goto Y., Omori T. & Matumoto M.

1977. Congenital abnormalities in newborn calves after inoculation of pregnant cows with

Akabane vírus. Infection and Immunity. 17 (2):338-343.

Leipold H.W., Huston K. & Dennis, S.M. 1983.Bovine congenital defects. Advances in

Veterinary Science and Comparative Medicine. 27:197-271.

Magalhães V.R., Santana A.F., Oliveira A.C., Wicke A.A. & Barone M.M. 2008.

Levantamento da ocorrência de anomalias da mandíbula em caprinos e ovinos, encontrada

em cinco municípios da microrregião de Irecê (BA). 9(2): 341-345.

Marcolongo-Pereira C. , Schild A.L., Soares M.P., Vargas Junior. S.F. & Riet-Correa, F.

2010. Defeitos congênitos diagnosticados na região sul do Rio Grande do Sul. Pesq. Vet.

Bras. 30 (10): 816-826.

Mine O.M., Kedikilwe K., Naebele R.T. & Nsoso S.J. 2000. Sheep-goat hibrid born under

natural conditions. Small Ruminant Research. 37:141-145.

McEvoy T.G., Robinson J.J., Ashworth C.J., Rooke J.A. & Sinclair K.D. 2001. Feed and

forage toxicants affecting embryo survival and fetal development. Theriogenology. 55:

113-129.


Correa F. 2005. Mortalidade perinatal em caprinos no semi-árido da Paraíba. Pesquisa

Veterinária Brasileira. 25(4): 201-206.

Medeiros R.M.T., Figueiredo A.P.M., Benício T.M.A., Dantas F.P.M & Riet-Correa F. 2008.

Teratogenicity of Mimosa tenuiflora seeds to pregnant rats. Toxicon. 51:316-319.

Méndez M.C. , Riet-Correa F. , Ribeiro J., Selaive A. & Schild, A.L. 1982. Mortalidade

perinatal em ovinos nos municípios de Bagé, Pelotas e Santa Vitória do Palmar, Rio

Grande do Sul. Pesq. Vet. Bras. 2 (2):69-76.

Medeiros G.X. Riet-Correa F., Barros S.S., Soares M.P., Dantas A.F.M., Galiza G.J.N.,

Simões S.V.D., Borges A.S. 2012. Dystrophic epidermolysis bullosa in goats. Journal of

Comparative Pathology, In Press, Corrected Proof, Available online 1 November 2012.

http://dx.doi.org/10.1016/j.jcpa.2012.09.002.



Pesq. Vet. Bras.. 25(3): 171-178.

32

Oliveira A.C. & Barros S.S. 1982. Mortalidade perinatal em ovinos no município de

Uruguaiana, Rio Grande do Sul. Pesq. Vet. Bras. 2(1):1-7.

Osburn B.I. 1972.Animal model for human disease. Hydranencephaly, porencephaly, cerebral

cysts, retinal dysplasia, CNS malformations. Animal model: bluetongue-vaccine-virus

infection in fetal lambs. The American Jounal of Pathology. 67 ( 1): 211-214.

Otto P.G. 2006. Genética básica para veterinária. Editora Roca ltda, São Paulo. 284p.

Panter K.E., Bunch T.D., James LF. & Sisson D.V. 1987. Ultrasonographic imaging to

monitor fetal and placental developments in ewes fed locoweed (Astragalus lentiginosus).

American Journal of Veterinary Research. 48: 686-690.

Panter K.E., Keeler R.F., Bunch T.D. & Calan R.J. 1990. Congenital skeletal malformations

and cleft palate induced in goats by ingestion of Lupinus, Conium and Nicotiana species.

Toxicon. 28: 1377-1385.

Panter K.E. & Keeler R.F. 1992. Induction of cleft palate in goats by Nicotiana glauca during

a narrow gestational period and the relation to reduction in fetal movements. Journal of

Natural Toxins. 1: 25-32.

Panter K.E., James L.F., Gardner D.R. & Molyneux R.J. 1994. The effects of poisonous

plants on embryonic and fetal development in livestock, p.325-332. In: Colegate S.M. &

Dorling P.R. (Eds), Plant Associated Toxins. CAB International, Wallingford, UK. 581p.

Panter K.E., Gardner D.R., Shea R.E., Molyneux R.J. & James LF. 1998. Toxic and

teratogenic piperidine alkaloids from Lupinus, Conium and Nicotiana species, p.345–350.

In: Garland T. & Barr A.C. (Eds), Toxic Plants and other Natural Toxicants. CAB

International, Wallingford, UK. 585p.

Panter K.E., Weinzweig J., Gardner D.R., Stegelmeier B.L. & James L.F. 2000. Comparison

of cleft palate induction by Nicotiana glauca in goats and sheep. Teratology 61:203-210.


Mota R. A. & Araújo J.A.S. 2007. Mimosa tenuiflora as a cause of malformations in

ruminants in the Northeastern Brazilian semiarid rangelands. Vet. Pathol. 44(6):928-931.

Pugh D.G. 2002. Sheep and goat medicine. 1ed. W.B. Saunders, Philadelphia. 513p.

Radostits O.M., Gay C.C., Hinchcliff K.W. & Constable P.D. 2007. Disease of the newborn,

p.127-172. In: Radostits O.M., Gay C.C., Hinchcliff K.W. & Constable P.D. Veterinary

Medicine - A textbook of the diseases of cattle, horses, sheep, pigs and goats. 10th ed.

Saunders Elsevier, Philadelphia, 2162p.

33

Riet-Correa F., Medeiros R.M.T., Pfister J., Schild A.L. & Dantas A.F.M. 2009. Poisonings

by Plants, Mycotoxins and Related Substances in Brazilian Livestock. Editora da

Universidade Federal de Campina Grande, Campina Grande, PB, 246p.

Robinson, T.J. 1951: Reproduction in the ewe. Biology Review, 26: 121-157.

Santos J.R., Dantas A.F.M. & Riet-Correa F. 2012. Malformações, abortos e mortalidade

embrionária em ovinos causada pela ingestão de Mimosa tenuiflora (Leguminosae). Pesq.

Vet. Bras. 32(11):1103-1106.

Saperstein G. , Leipold H.W. & Dennis S.M. 1975.Congenital defects of sheep. Journal of

the American Veterinary Medical Association. 167 (4): 314-322. Sawyer M.M., Schore,

C.E. & Osburn, B.I. 1991. Border disease of sheep - aspects for diagnostic and

epidemiologic consideration. Archives of Virology. Supplementum. 3: 97-100.

Sawyer, M.M.; Schore, C.E.; Osburn, B.I. Border disease of sheep--aspects for diagnostic and

epidemiologic consideration. Archives of Virology. Supplementum, v. 3, p. 97-100, 1991.

Schild A.L. 2007. Defeitos congênitos, p.25-55. In: Riet-Correa F., Schild A.L., Lemos

R.A.A. & Borges J.R.J. Doenças de Ruminantes e Equídeos. 3 ed. Santa Maria, Pallotti,

v.1, 722p.

Schild A.L., Ferreira J.L., Ladeira S.R., Ruas J.L. & Soares M.P. 2009. Boletim do

Laboratório Regional de Diagnóstico. Editora e Gráfica Universitária, Pelotas, 65p.

Schmidt V. & Oliveira R.T. 2004. Artrogripose em caprino: Relato de caso. Arq. Bras. Med.

Vet. Zootec. 56(4):438-440.

Sim F.R.P., Livett B.G., Browne C.A. & Keeler R.F. 1985. Studies on the mechanism of

veratrum teratogenicity. In: Seawright A.A., Hegarty M.P., James L.F. & Keeler R.F.

(Ed.). Plant Toxicology. Queensland Poisonous Plants Committee, Yeerongpilly, Australia.

Sinowatz F. 2010. Teratology, p.339-382. In: Hyttel P., Sinowatz F., & Vejlsted M. (Ed.),

Essential of Domestic Animal Embriology. 1 ed. Elsevier, China. 453p.

Smith M.C. & Sherman D.M. 2009. Goat Medicine. 2 ed. Wiley-Blackwell, Ames. Iowa,

USA. 319-338.

Thompson, K.G.; Piripi, S.A.; Dittmer, K.E. 2008. Inherited abnormalities of skeletal

development in sheep. Veterinary Journal. 177 (3): 324-333.

Thompson M.W., McInnes R.R & Willard H.F. 1993. Genética médica. 5ª ed. Rio de Janeiro.

Gaunabara Koogan. 339p.

Tsuda T.; Yoshida K.; Ohachi S.; Yanese T.; Sueyoshi M.; Kamimura S.; Misui K. &

Yamakawa M. 2004. Arthrogriposis, hydranencephaly and cerebellar hipoplasia syndrome

34

in neonatal calves resulting from intrauterine infection with Aino virus. Veterinary

Research.35: 531-538.

Welch K.D., Lee S.T., Gardner D.R., Panter K.E., Steegelmeier B.L. & Cook D. 2011. Dose-

response evaluation of Veratrum californicum in sheep, p.243-250. In: Riet Correa F.,

Pfister J., Schild A.L. & Wierenga T. (Eds), Poisoning by Plants, Mycotoxins and related

Toxins. CAB International, Wallingford, UK. 739p.

35

CAPÍTULO II

Malformações, abortos e mortalidade embrionária em ovinos causada pela

ingestão de Mimosa tenuiflora (Leguminosae)

O presente trabalho foi publicado na Pesquisa Veterinária Brasileira (Anexo 2). Pesq.

Vet. Bras. 32(11):1103-1106, novembro 2012. http://www.pvb.com.br/pdf_artigos/01-11-

2012_10-44Vet%201291_2722%20LD.pdf

36

Malformações, abortos e mortalidade embrionária em ovinos causada pela

ingestão de Mimosa tenuiflora (Leguminosae)1

José Rômulo Soares dos Santos2, Antônio F.M. Dantas2 e Franklin Riet-Correa2

ABSTRACT.- Santos J.R.S., Riet-Correa F. & Dantas A.F.M. 2012. [Malformations,

abortion, and embryonic death in sheep caused by the ingestion of Mimosa tenuiflora.]

Malformações, abortos e mortalidade embrionária em ovinos causada pela ingestão de

Mimosa tenuiflora. Pesquisa Veterinária Brasileira 00(0):00-00. Hospital Veterinário, CSTR,

Universidade Federal de Campina Grande, Campus de Patos, 58708-110 Patos, PB, Brazil. E-

mail: [email protected]

To determine the teratogenicity of Mimosa tenuiflora, 15 sheep, divided into two

groups, were introduced into an area invaded by the plant. Group 1 consisted of six pregnant

ewes that were introduced into the experimental area 20 days after mating. Group 2 consisted

of nine non pregnant sheep and a ram introduced into the area at the start of the experiment.

The experiment began in October 2009, during the dry season, when M. tenuiflora was

seeding. During this period the M. tenuiflora plants were pruned to 40cm tall and the branches

with leaves and seeds were provided to the experimental sheep in the same area. After

prunning M. tenuiflora began to sprout even in the dry season, and the sheep were free to

graze the plant. They also received concentrate ration in amount equivalent to 1% of their

body weight. After the first rains in mid-January 2010, when the herbaceous layer appeared,

the pregnant sheep were confined in stalls, and M. tenuiflora was cut in the field and given to

the sheep until the end of the experiment. Every 15 days each sheep was examined by

ultrasound to control pregnancy. In Group 1, three sheep aborted single fetuses without

malformations. One sheep delivered two lambs, one with hyperflexion of the proximal inter-

phalangeal joint of the right forelimb and another without malformations. Another sheep

delivered a lamb with a hyperflexion of both hindlimbs in the region of the tarsal-metatarsal

joint. Only one sheep delivered a normal lamb. In Group 2, one sheep aborted a fetus without

malformations and five delivered normal lambs. Three sheep of this group returned to estrus

repeatedly and did not get pregnant during the mating period, suggesting embryonic loss.

1 Recebido em 9 de março de 2012. Aceito para publicação em 4 de agosto de 2012.

2 Hospital Veterinário, Centro de Saúde e Tecnologia Rural (CSTR), Universidade Federal de Campina Grande (UFCG), Campus de Patos, 58708-110 Patos, PB, Brasil. *Autor para correspondência: [email protected]

37

Thirty two ewes and one ram, that stayed in a paddock neighbor to the experimental paddock

and were used as control group, delivered normal lambs. It is concluded that M. tenuiflora

cause malformations, embryonic mortality and abortion in sheep.

INDEX TERMS: Mimosa tenuiflora, abortion, malformations, embryonic death, poisoning

plants.

RESUMO.- Para determinar a teratogenicidade de Mimosa tenuiflora, 15 ovelhas,

distribuídas em dois grupos, foram introduzidos em área invadida pela planta. O Grupo 1,

com seis ovelhas prenhes, foi introduzido na área experimental 20 dias após o acasalamento.

O Grupo 2, formado por nove ovelhas não prenhes e um carneiro, foi introduzido na área

experimental no início do experimento. O experimento começou no mês de outubro de 2009,

período de estiagem, quando M. tenuiflora estava sementando. Nesse período as plantas foram

rebaixadas a 40 cm de altura e os galhos com folhas e sementes foram disponibilizados para

os ovinos na mesma área onde M. tenuiflora foi rebaixada. M. tenuiflora começou a rebrotar

ainda na estação seca antes do período de chuvas. No período de rebrota, as ovelhas ficavam

livres para pastar M. tenuiflora e recebiam concentrado em quantidade equivalente a 1% do

peso vivo. Após as primeiras chuvas, em meados de janeiro do ano seguinte, quando o estrato

herbáceo apareceu, essas ovelhas foram confinadas em baias, onde M. tenuiflora foi fornecida

até o fim do experimento. A cada 15 dias eram realizados exames ultrassonográficos para

acompanhamento da gestação. No Grupo 1, três ovelhas abortaram, cada uma um feto sem

malformações. Outra ovelha pariu dois cordeiros, um com hiperflexão na articulação inter-

falangeana proximal no membro torácico direito e outro sem malformações. Outra ovelha

pariu um cordeiro com hiperflexão dos dois membros pélvicos na região da articulação tarso-

metatársica. No grupo formado pelas ovelhas que foram acasaladas na área experimental, uma

ovelha abortou um feto sem malformações e cinco pariram cordeiros normais. Três das

ovelhas desse grupo não emprenharam durante todo o período experimental, mostrando

retornos repetidos ao cio, sugerindo perda embrionária. Trinta e duas ovelhas e um carneiro,

que permaneceram numa área vizinha a área experimental e foram utilizados como controle,

pariram cordeiros normais. Conclui-se que M. tenuiflora, além de causar malformações causa,

também, mortalidade embrionária e abortos em ovelhas.

TERMOS DE INDEXAÇÃO: Mimosa tenuiflora, aborto, malformações, mortalidade

embrionária, plantas tóxicas.

38

INTRODUÇÃO

Diversas plantas, incluindo Astragalus lentiginosus, Conium maculatum, Lupinus spp,

Nicotiana glauca, Nicotiana tabacum, Oxytropis spp. e Veratrum californicum, causam

anomalias craniofaciais e malformações do sistema músculo-esquelético em ruminantes,

como artrogripose, braquignatia, ciclopia e palatosquise (Keeler 1990, Cheeke 1998, Gardner

et al. 1998, Panter et al. 2000, 2011, James et al. 2004). Os principais teratógenos descritos

em plantas são alcaloides indolizidínicos, piperidínicos e quinolizidinicos (Keeler 1984,

Panter et al. 1994).

No nordeste do Brasil, a ingestão de Mimosa tenuiflora (jurema preta) tem sido

associada a malformações congênitas, incluindo anomalias ósseas craniofaciais,

malformações oculares e artrogripose em ovinos, caprinos e bovinos (Medeiros et al. 2005,

Nóbrega Júnior et al. 2005, Dantas et al. 2010). Pimentel et al. (2007) testaram os efeitos do

consumo de M. tenuiflora durante todo o período gestacional em cabras gestantes e

verificaram malformações, semelhantes às observadas nos casos espontâneos, em 75% das

crias. Medeiros et al. (2008) demonstraram o efeito teratogênico de M. tenuiflora ao

reproduzir malformações (fenda palatina, escoliose, esterno bífido, aplasia de esternebras,

hipoplasia do osso nasal) em 84% dos filhotes de ratas que receberam ração contendo 10% de

sementes, entre o 6º e o 21º dia de gestação.

Casos espontâneos de anomalias congênitas são descritos em ovinos criados

extensivamente no semiárido associados ao consumo de M. tenuiflora (Dantas et al. 2010); no

entanto, a ocorrência de defeitos congênitos em ovinos relacionados ao consumo dessa planta

não foram, ainda, confirmados experimentalmente. Assim, o objetivo desse trabalho foi

reproduzir malformações fetais em ovelhas prenhes que ingeriram M. tenuiflora durante a

gestação.

MATERIAL E MÉTODOS

O experimento foi realizado nas dependências do Hospital Veterinário, da Universidade

Federal de Campina Grande, situado no município de Patos e também na Fazenda Caicú,

município de São José de Espinharas, Paraíba. Na fazenda foi demarcada uma área, de três

hectares (área experimental), 80% invadida por Mimosa tenuiflora. Nos outros 20% havia

Croton sonderianus (marmeleiro) e Caesalpinia bracteosa (Catingueira). A área está situada

na longitude S37°29´17´´, latitude W6°45´21´´ com altitude de 228 m.

Foram utilizadas 15 ovelhas e dois carneiros da raça Santa Inês, todos em idade

reprodutiva. Inicialmente, as ovelhas foram submetidas a exame ultrassonográfico para

39

confirmar diagnóstico negativo de gestação e os machos foram submetidos a exames

andrológicos a fim de determinar sua capacidade reprodutiva. Posteriormente, as ovelhas

foram identificadas e vermifugadas. As 15 ovelhas foram distribuídas aleatoriamente em dois

grupos. As seis ovelhas do Grupo 1 ficaram em curral com reprodutor no Hospital

Veterinário. O reprodutor era marcado com tinta vermelha na região do tórax e abdômen para

detecção do dia de cobertura pela impregnação da tinta no dorso das ovelhas. Vinte dias após

a cobertura era realizado exame ultrassonográfico; se confirmada a gestação, a ovelha era

encaminhada à área experimental. O Grupo 2 era composto por 9 ovelhas que ficaram na área

experimental com outro carneiro, também marcado com tinta vermelha. No final do dia, as

ovelhas eram recolhidas a baia determinando-se a data de cobertura caso as ovelhas

apresentassem mancha vermelha no dorso. Após 20 dias do dia de cobertura procedia-se a

ultrassonografia.

O experimento foi iniciado no mês de outubro de 2009, período seco, quando M.

tenuiflora estava sementando e as ovelhas consumiam as sementes que estavam no chão.

Nesse período as plantas foram rebaixadas a 40cm de altura para permitir a rebrota e os

galhos com sementes e folhas remanescentes foram disponibilizados na mesma área a campo,

para o acesso das ovelhas, tempo em que se aguardava a rebrota. M. tenuiflora começou a

rebrotar no mês de novembro, ainda na estação seca. No período de rebrota, as ovelhas

ficavam livres para pastar jurema preta que era a única fonte de alimentação volumosa, e

recebiam 1% de concentrado com base no peso vivo. Após as primeiras chuvas, em meados

de janeiro, brotou o estrato herbáceo, composto principalmente por Aristida setifolia (capim

panasco), Brachiaria plantaginea (milhã), Senna obtusifolia (mata-pasto) e Sida cordifolia

(malva branca). A partir daí, as ovelhas foram confinadas em baias e M. tenuiflora foi

fornecida até o fim do experimento. Os galhos da planta eram suspensos nas paredes laterais

das baias para facilitar a sua ingestão. A alimentação durante todo o experimento era

constituída de jurema preta à vontade e ração comercial em quantidade equivalente a 1% do

peso corporal e água ad libitum. A cada 15 dias era realizada ultrassonografia para

constatação da prenhez. Durante todo o experimento os animais foram observados

diariamente para detectar a ocorrência de abortos. As ovelhas com os cordeiros que nasceram

vivos malformados foram mantidas sob observação no Hospital Veterinário.

Durante o experimento, 32 ovelhas e um reprodutor permaneceram numa área de 17

hectares, da mesma propriedade, vizinha à área experimental, na qual havia escassas plantas

de M. tenuiflora. Esse rebanho foi, também, acompanhado, servindo como grupo controle.

40

RESULTADOS

No Grupo 1, das seis ovelhas que foram introduzidas na área experimental no 20º dia de

gestação, três abortaram fetos sem malformações, aos 52, 58 e 146 dias de gestação,

respectivamente. Nas necropsias não foram encontradas sinais de viabilidade nem lesões

significativas. Outra ovelha desse grupo pariu dois cordeiros, sendo que um apresentava

hiperflexão na articulação inter-falangeana proximal no membro torácico direito (Fig.1); esta

malformação reverteu-se após duas semanas. Outra ovelha pariu um cordeiro com hiperflexão

dos membros pélvicos na região da articulação tarso-metatársica (Fig.2). Esta lesão regrediu

em 28 dias. Apenas uma ovelha desse grupo teve parto normal e pariu um cordeiro sem

malformações.

No Grupo 2, das nove ovelhas, que estavam na área experimental, seis emprenharam

durante o período seco (outubro de 2009 a janeiro de 2010), quando estavam pastejando na

área com M. tenuiflora e três não emprenharam durante o período seco, mostrando cio e

acasalando repetidamente. Uma ovelha que emprenhou abortou aos 139 dias de gestação e as

outras cinco pariram cordeiros sem malformações, quatro partos simples e um gemelar. As

três ovelhas que não emprenharam no período seco permaneceram na área experimental com

o carneiro, após o início das chuvas, em janeiro de 2010, e pariram cordeiros normais em

junho do mesmo ano. As 32 ovelhas do rebanho utilizado como controle pariram 39 cordeiros

sem malformações. Uma teve um parto duplo distócico, morrendo os dois cordeiros.

Figura 1. Cordeiro mostrando hiperflexão na articulação inter-falangeana proximal no membro torácico direito, na intoxicação por Mimosa tenuiflora.

41

Figura 2. Cordeiro mostrando hiperflexão dos membros pélvicos na região da articulação tarso-metatársica, na intoxicação por Mimosa tenuiflora.

DISCUSSÃO

Neste trabalho observou-se a ocorrência de malformações em cordeiros nascidos de ovelhas

que ingeriram Mimosa tenuiflora, confirmando seu efeito teratogênico, semelhante ao

observado em trabalhos anteriores em caprinos (Pimentel et al. 2007) e ratos (Medeiros et al.

2008). Todavia, houve malformações de membros e não foram observadas malformações da

face, as quais são relatadas em casos espontâneos associados à ingestão de M. tenuiflora

(Nóbrega Junior et al. 2005, Dantas et al 2010). Em ovinos, o período de suscetibilidade

máxima às malformações começa quando a organogênese é iniciada em torno do 16º dia de

gestação e se estende na maioria dos órgãos até o 34° dia, quando termina a organogênese e

começa a fase fetal (Sinowatz 2010). Malformações ocorrem, também, em outras fases da

gestação, quando há alteração na conformação de uma estrutura do corpo que já sofreu

diferenciação normal, após o período de organogênese (Radostits et al. 2007). É o caso da

artrogripose, que ocorre devido à diminuição dos movimentos fetais (Gardner et al. 1998).

Panter et al. (1998) sugerem que esse tipo de malformação poderia ocorrer por ação de

bloqueio neuromuscular. As malformações observadas neste experimento regrediram após 14

e 28 dias, respectivamente. Isso pode ser porque a fixação artrogripótica dos membros

resultou de mobilidade fetal restrita, mas não o suficiente pra causar uma malformação

permanente. A gravidade da lesão depende, provavelmente, do grau de interferência do

principio ativo ingerido e da duração da redução dos movimentos fetais. O efeito teratogênico

42

é dose-dependente e a incidência, o tipo e a severidade da malformação dependem da

composição do principio ativo, do estágio da gestação em que ocorre a ingestão e da

quantidade do teratógeno ingerido (Panter et al. 1998, Welch et al. 2011). Alcaloides

esteroidais estão associados com malformações causadas por Astragalus lentiginosus, Conium

maculatum, Lupinus spp, Nicotiana glauca, Nicotiana tabacum, Oxytropis spp. e Veratrum

californicum (Keeler 1990, Cheeke 1998, Gardner et al. 1998, Panter et al. 2000, 2011, James

et al. 2004). O princípio ativo de M. tenuiflora é, ainda, desconhecido, mas alcaloides

derivados da triptamina foram isolados em folhas e sementes (Gardner et al. 2011).

Quando doses altas de princípios ativos ingeridas forem capazes de causar toxicidade

materna podem resultar em embrioletalidade ou mortalidade fetal (Panter et al. 1994, Bernardi

2002, Welch et al. 2011). M. tenuiflora não tinha sido, ainda, associada com abortos, o que

ficou evidenciando neste experimento. Algumas plantas como Astragallus spp. e Oxytropis

spp., além de causar deformações podem causar, também, morte fetal e aborto (Panter et al.

1994).

No Grupo 2, três ovelhas retornaram repetidamente ao cio e acasalaram mas não

emprenharam, possivelmente devido a mortalidade embrionária, como foi observado em

trabalho com caprinos (Dantas et al. 2012). Outras plantas associadas com malformações

causam, também, mortalidade e reabsorção embrionária, como Veratrum californicum,

quando é ingerida por ovelhas prenhes durante o período de 14 a 21 dias de gestação (Keeler

1990).

M. tenuiflora pode representar um grande obstáculo ao desempenho reprodutivo em

ovinos no semiárido; portanto, é importante evitar que ovelhas consumam M. tenuiflora

durante o período de acasalamento ou gestação. Numa região onde a disponibilidade de

forragem é limitada durante o período de estiagem, a melhor alternativa é a de armazenar

forragem na forma de feno e silagem durante o período das chuvas para alimentar as fêmeas

prenhes na seca.

Agradecimentos.- Trabalho financiado pelos Institutos Nacionais de Ciência e Tecnologia

(INCT) para o Controle das Intoxicações por Plantas (CNPq. Proc. 573534/2008-0).

REFERÊNCIAS

Bernardi M.M. 2002. Exposição aos medicamentos durante o período perinatal, p.692-699.

In: Spinosa H.S., Gorniak S.L. & Bernardi M.M. (Edes), Farmacologia Aplicada à

Medicina Veterinaria. 3ª ed. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, RJ. 752p.

43

Cheeke P.R. 1998. Natural Toxicants in Feeds, Forages, and Poisonous Plants. 2nd ed.

Danville, Interstate Publishers, Danville, p.691-699.



Toxicon 59 (5) 555-557.

Dantas A.F.M., Riet-Correa F., Medeiros R.M.T., Galiza G.J.N., Pimentel L.A., Anjos B.L. &

Mota R.A. 2010. Malformações congênitas em ruminantes no semiárido do Nordeste

Brasileiro. Pesq. Vet. Bras. 30(10):807-815

Gardner D.R., Panter K.E., Stegelmeier B.L., James L.F., Ralphs M.H., Pfister J.A. & Schoch

T.K. 1998. Livestock poisoning by teratogenic and hepatotoxic range plants, p.303-306. In:

Garland T. & Barr A.C. (Eds), Toxic Plants and Other Natural Toxicants. CAB


Gardner D.R., Riet-Correa F. & Panter K.E. 2011. Alkaloid profiles of Mimosa tenuiflora and

associated methods of analysis, p.600-605. In: Riet Correa F, Pfister J., Schild A.L. &

Wierenga T. (Eds), Poisoning by Plants, Mycotoxins and Related toxins. CAB


James L.F., Panter K.E., Gaffield W. & Molyneux R.J. 2004. Reviews: Biomedical

applications of poisonous plant research. J. Agric. Food Chem. 52:3211-3230.

Keeler R.F. 1984. Teratogens in plants. J. Anim. Sci. 58:1029-1039.

Keeler R.F. 1990. Early embryonic death in lambs induced by Veratrum californicum. Cornell

Vet. 80:203-207.


Correa F. 2005. Mortalidade perinatal em caprinos no semi-árido da Paraíba. Pesq. Vet.

Bras. 25(4):201-206.

Medeiros R.M.T., Figueiredo A.P.M., Benício T.M.A., Dantas F.P.M & Riet-Correa F. 2008.

Teratogenicity of Mimosa tenuiflora seeds to pregnant rats. Toxicon 51:316-319.



Pesq. Vet. Bras. 25(3):171-178.

Panter K.E., James L.F., Gardner D.R. & Molyneux R.J. 1994. The effects of poisonous

plants on embryonic and fetal development in livestock, p.325-332. In: Colegate S.M. &

Dorling P.R. (Eds), Plant Associated Toxins. CAB International, Wallingford, UK. 581p.

Panter K.E., Gardner D.R., Shea R.E., Molyneux R.J. & James LF. 1998. Toxic and

teratogenic piperidine alkaloids from Lupinus, Conium and Nicotiana species, p.345–350.

44

In: Garland T. & Barr A.C. (Eds), Toxic Plants and other Natural Toxicants. CAB


Panter K.E., Weinzweig J., Gardner D.R., Stegelmeier B.L. & James L.F. 2000. Comparison

of cleft palate induction by Nicotiana glauca in goats and sheep. Teratology 61:203-210.

Panter K.E., Wlech K.D., Lee S.T., Gardner D.R., Steegelmeier B.L., Ralphs M.H., Davis

T.Z., Green B.T., Pfister J.A. & Cook, D. 2011. Plants teratogenic to livestock in the

United States, p.236-242. In: Riet Correa F., Pfister J., Schild A.L. & Wierenga T. (Eds),

Poisoning by Plants, Mycotoxins and Related toxins. CAB International, Wallingford, UK.

739p.


Mota R.A. & Araújo J.A.S. 2007. Mimosa tenuiflora as a cause of malformations in

ruminants in the northeastern Brazilian semiarid rangelands. Vet. Pathol. 44(6):928-931.

Radostits O.M., Gay C.C., Hinchcliff K.W. & Constable P.D. 2007. Disease of the newborn,

p.127-172. In: Radostits O.M., Gay C.C., Hinchcliff K.W. & Constable P.D. (Eds),

Veterinary Medicine: A textbook of the diseases of cattle, horses, sheep, pigs and goats.

10th ed. Saunders Elsevier, Philadelphia. 2162p.

Sinowatz F. 2010. Teratology, p.339-382. In: Hyttel P., Sinowatz F. & Vejlsted M. (Eds),

Essential of Domestic Animal Embriology. Elsevier, China. 453p.

Welch K.D., Lee S.T., Gardner D.R., Panter K.E., Steegelmeier B.L. & Cook D. 2011. Dose-

response evaluation of Veratrum californicum in sheep, p.243-250. In: Riet Correa F.,

Pfister J., Schild A.L. & Wierenga T. (Eds), Poisoning by Plants, Mycotoxins and related

Toxins. CAB International, Wallingford, UK. 739p.

45

CAPÍTULO III

Lisencefalia e hipoplasia cerebelar em caprino

O presente trabalho foi submetido à revista Research in Veterinary Science (Anexo 4).

As normas desta publicação encontram-se no Anexo 5.

46

Lisencefalia e hipoplasia cerebelar em caprino

José R. S. Santos, Antônio Flavio M. Dantas, Clarice Ricardo M. Pessoa, Tatiane R. Silva,

Daniel Pedrosa, Franklin Riet-Correa1

From the Universidade Federal de Campina Grande, Hospital Veterinário, Patos,

Paraíba, Brasil (Pimentel, Dantas, Riet-Correa). 1Corresponding Author: Franklin Riet-Correa, Veterinary Hospital, CSTR, Campina

Grande Federal University, Patos Campus, Patos, Paraíba 58700-000, Brazil.

[email protected]

ABSTRACT - A case of lissencephaly and cerebellar hypoplasia is reported in a goat. The

goat presented sternal recumbence, absent menace response, intention tremors, ataxia, and

nystagmus. The goat was euthanized and necropsied after been hospitalized during eleven

days. At necropsy, the surface of the brain was smooth, cerebral sulci and gyri were absent,

and the cerebellum was reduced in size. Histologically, in all cerebral cortex, the grey matter

was thicker and the white matter was thinner than normal. The neurons were arranged

randomly in the grey matter. In the cerebellum, the layers were disorganized and Purkinje

cells were observed within the molecular and granular layer. The histologic and gross lesions

are characteristic of lissencephaly associated with cerebellar hypoplasia. Lissencephaly is a

rare disease in veterinary medicine and had not been reported previously in goats.

Key words: agyria, brain, malformations, nervous system diseases.

Resumo. Um caso de lisencefalia e hipoplasia cerebelar é descrito em um caprino de 30 dias.

No exame físico apresentava incoordenação e incapacidade de ficar em pé, decúbito esternal

permanente, ataxia, ausência do reflexo de ameaça, tremores de intenção e nistagmo. Após 11

dias de internamento, o caprino foi eutanasiado e necropsiado. Na necropsia, o cérebro não

apresentava giros nem sulcos e o cerebelo estava reduzido de tamanho. Histologicamente, em

todo o córtex cerebral, a substância cinzenta estava mais espessa e a substância branca mais

fina que o normal. Os neurônios estavam distribuídos de forma aleatória na substância

cinzenta. No cerebelo, as camadas estavam desorganizadas, com localização heterotópica das

células. Os achados macroscópicos e histológicos são característicos de lisencefalia e

hipoplasia cerebelar. Lisencefalia é uma doença rara na medicina veterinária e não tinha sido

descrita em caprinos.

47

Palavras chaves: agiria, cérebro, malformações, doenças do sistema nervoso.

Lisencefalia é uma desordem no desenvolvimento do telencéfalo, caracterizada pela

ausência de circunvoluções e sulcos cerebrais (agiria), associada ao espessamento da camada

cortical (paquigiria) (De Lahunta e Glass, 2009). É uma condição que decorre de falha na

migração dos neuroblastos da zona ventricular e subventricular para o córtex cerebral, durante

o desenvolvimento embrionário (Ayala et al., 2007). É uma malformação relativamente

comum em seres humanos, resultante de mutações dos genes duplacortina (DCX), filamina-1,

LIS1, Tubulina A1A (TUBA1A) e reelina (RELN), que controlam a organização espacial e

temporal das células no córtex telencefálico (Ayala et al., 2007; Keays et al., 2007; Guerrini e

Parrini, 2010). Essa patologia é rara na medicina veterinária, relatada em cães da raça Lhasa

Apso, que apresentam predisposição racial, e gatos (Zaki, 1976; Saito et al., 2002; Hermann et

al., 2011). Outros tipos de malformações encefálicas podem ocorrer nos animais com

lisencefalia. Em cães das raças Setter Irlandês e Wire Fox Terrier são descritos casos de

lisencefalia associada com hipoplasia cerebelar (Greene et al., 1976) e em gatos associada a

microencefalia e hipoplasia de corpo caloso e cerebelo (Herrmann et al., 2011). Relatos de

malformações no sistema nervoso de caprinos são escassos (Washburn e Streeter, 2004). Este

trabalho reporta os achados clínicos e patológicos de um caso de lisencefalia associado à

hipoplasia cerebelar ocorrido em um caprino no semiárido da Paraíba, Brasil.

Um caprino macho, de 8 kg, sem padrão racial, com 30 dias de idade, foi atendido no

mês de maio de 2011, no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Campina Grande

(HV-UFCG), Campus de Patos – PB, com histórico de que desde o nascimento não conseguia

manter-se em estação. O animal era oriundo de um rebanho de 80 caprinos e ovinos de

diferentes idades, que eram criados extensivamente em pastagem nativa, onde havia

Aspidosperma pyrifolium que causa aborto (Medeiros et al., 2004) e Mimosa tenuiflora que

causa malformações (Pimentel et al., 2007). Não havia histórico de introdução recente de

animais no rebanho. Ao exame físico observou-se incoordenação e incapacidade do animal

ficar em pé, decúbito esternal permanente, ataxia, ausência do reflexo de ameaça, tremores de

intenção e nistagmo. Quando forçado a ficar em pé mostrava aumento da base de sustentação

caindo imediatamente. Na análise do líquido cefalorraquidiano não foram observadas

alterações.

O animal ficou em observação por 11 dias e como não havia melhora dos sinais

clínicos e o prognóstico era desfavorável, foi eutanasiado e necropsiado. Na necropsia,

observou-se ausência das circunvoluções e sulcos na superfície telencefálica (Figura-1A).

48

Observaram-se dois sulcos rudimentares, o sulco rinal lateral que separa o paleopálio

(rinencéfalo) do neopálio e o sulco esplenial que está na parte medial de cada hemisfério

cerebral entre a borda dorsal dos hemisférios cerebrais e o giro cingular. Além dessas

alterações, havia hipoplasia cerebelar acentuada. O verme e os hemisférios cerebrais eram

vestigiais (Figura 1A). Havia uma reduzida presença de folhas cerebelares. Não foram

observadas lesões nos demais órgãos.

Em cortes transversais seriados do encéfalo observou-se que nos córtices frontal,

temporal, parietal e occipital a substância cinzenta apresentava-se espessada (paquigiria) e a

substância branca mais delgada. A substância branca não se invaginava na substância cinzenta

(Figura 1B). O nódulo não estava presente no verme cerebelar e o quarto ventrículo estava

aumentado de tamanho.

O sistema nervoso central e os demais órgãos foram fixados em formol tamponado a

10%. Posteriormente, foram clivados e encaminhados para diafinização e embebição em

parafina. Em seguida foram realizados cortes de 5μm e corados com hematoxilina e eosina e

azul rápido de luxol para exame histológico. Nas lâminas coradas com azul rápido de luxol

não foi observada desmielinização. Nas lâminas coradas com HE observou-se que a

substância cinzenta estava mais espessada que o normal e a substância branca se apresentava

mais fina. Na substância cinzenta havia desorganização na citoarquitetura, sem a distribuição

laminar dos neurônios e organização em camadas. Os neurônios distribuíam-se aleatoriamente

sem padrão desde a camada mais superficial até a camada profunda (Figura1D). Na camada

molecular, os neurônios estavam irregularmente distribuídos. Em algumas seções havia

hipercelularidade e em outras hipocelularidade. O neocortex continha ninhos de neurônios

granulares e ilhas de substância branca heterotópica dispersas. Não havia uma delimitação

regular de transição entre a substância branca e a cinzenta. No hipocampo as células estavam

difusamente desorganizadas, muitas vezes agrupadas ou dispersas.

No exame histológico do cerebelo, disgênese cortical foi observada. O número e

tamanho das folhas estavam diminuídos. Nessas folhas havia uma desorganização das células

de Purkinje e das células granulosas, sem delimitação regular de transição entre as camadas.

A camada molecular estava diminuída. As células de Purkinje estavam irregularmente

distribuídas dentro da camada granular e da camada molecular. Na substância branca

cerebelar, havia neurônios heterotópicos distribuídos aleatoriamente, sugerindo falha na

migração neuronal. Ocasionalmente, aglomerados de neurônios granulares com raras células

de Purkinje foram observados na periferia dessa área, parecendo uma interrupção na formação

da folha cerebelar (Figura1C).

49

Figura 1. Caprino com lisencefalia e hipoplasia cerebelar. (A) Vista dorsal mostrando

ausência de giros e sulcos na superfície telencefálica e hipoplasia cerebelar. (B) Corte

transversal. A substância cinzenta está mais espessa que o normal (paquigiria) e a substância

branca mais fina. A substância branca não se invagina na substância cinzenta. (C) Cortex

frontal. Desorganização dos neurônios corticais é observada na substância cinzenta. Os

neurônios estão distribuídos aleatoriamente da camada molecular superficial até a camada

cortical mais profunda, sem padrão de organização laminar (H-E, 10x). (D) Cerebelo

mostrando disgênese cortical caracterizada por ninhos de neurônios granulares com raras

células de Purkinje na periferia da substância branca (H-E, 10x).

O diagnóstico de lisencefalia foi realizado com base nos achados macroscópicos e

histológicos. Até o momento não foram encontrados registros na literatura de casos de

lisencefalia em caprinos. A agiria e o espessamento da camada cortical do telencéfalo

decorrem de um processo de migração incompleto que resulta na desorganização estrutural do

posicionamento dos neurônios que deveriam formar ordenadamente seis camadas celulares,

para formação cortical normal (Ayala et al., 2007). Essa apresentação do telencéfalo é normal

em algumas espécies como coelhos, ratos, camundongos, pássaros e morcegos e não tem

50

significado funcional (Greene et al., 1976; Zachary, 2007). Nas outras espécies é considerada

uma anomalia congênita rara e está associada a alterações funcionais. A função depende das

conexões produzidas pelos neurônios e seus alvos. Se há posicionamento inadequado, há falha

nas conexões neurais, consequentemente as células não podem interagir normalmente,

refletindo em funções anormais e sinais clínicos (Ayala et al., 2007).

O comprometimento do córtex cerebral na lisencefalia é responsável por uma

sintomatologia inespecífica. No presente caso os sinais clínicos são característicos de lesão

cerebelar (Washburn e Streeter, 2004). Sinais como cegueira, depressão e convulsões que são

de origem cortical, descritos em cães, gatos e seres humanos não foram observados nesse

caso. Como todas as funções motoras são coordenadas pelo cerebelo, o alto grau de disfunção

cerebelar pode mascarar os sinais de origem cortical. Ataxia cerebelar não progressiva foi

descrita, também, em cão com lisencefalia associada à hipoplasia cerebelar (Greene et al.,

1976). Esses sinais manifestam-se no nascimento ou logo após, o que deve servir de base para

a suspeita de algum tipo de malformação (Greene et al., 1976).

A lisencefalia é uma anomalia limitada ao neopálio e a presença do sulco rinal lateral é

esperada tendo em vista que ele separa o neopálio do paleopálio olfatório (Summers et al.,

1994). O arquipálio hipocampal é descrito como normal em casos de lisencefalia em

mamíferos (Greene et al., 1976; Summers et al., 1994); no entanto, no presente trabalho foi

observada desorganização de neurônios também no hipocampo, semelhante ao observado em

ratos com lisencefalia (Fleck et al., 2000).

No presente caso, a lesão cerebelar e a telencéfalica são similares, sugerindo que o

mecanismo de falha no processo de migração neuronal é o mesmo para ambas as lesões, como

mencionado por De Lahunta e Glass (2009). Contudo, a lesão cerebelar, que inclui a falha na

migração neuronal e a hipoplasia cerebelar, é mais grave do que a lesão telencefálica,

sugerido que o cerebelo é mais afetado que o telencéfalo.

A presença de um único registro de caprino com malformação no rebanho e a

inexistência de lesões inflamatórias no cérebro e outros órgãos, sugere que a malformação não

teve origem infeciosa. Por se tratar de um único caso de uma malformação não descrita

anteriormente na espécie caprina é pouco provável que a mesma seja hereditária. Entretanto,

as lesões observadas neste caso são similares às observadas em outras espécies, em que a

causa é genética. Em humanos, os genes envolvidos na lisencefalia são LIS1 e DCX, mas

outros genes responsáveis por malformações associadas à lisencefalia são pouco conhecidos

(Ross et al., 2001; Keays et al., 2007). A combinação de microencefalia associada à

hipoplasia cerebelar e hipoplasia de corpo caloso tem sido associada em humanos a herança

51

autossômica recessiva devida a mutações dos genes TUBA1A e RELN (Ross et al., 2001;

Fallet-Bianco et al., 2008). O processo de desenvolvimento do córtex cerebral é único em

mamíferos (Ayala et al., 2007), sugerindo que o mecanismo da malformação seja o mesmo

para as diferentes espécies. No entanto, devemos considerar que uma mesma malformação

pode ser devida a diferentes causas (Radostitis et al., 2007). Neste caso é provável que a

origem da malformação seja devida a um erro ocasional no desenvolvimento, sem causa

aparente (esporádica). Em humanos, hipóxia intrauterina ou falha na perfusão têm sido

sugeridas como causa de lisencefalia (De Lahunta e Glass, 2009; Roessman e Hori, 1985).

Roessman e Hori (1985) afirmam que insulto anóxico durante a migração neuronal, resulta

em uma hipocelularidade e consequente desorganização das camadas do telencéfalo, causando

lisencefalia e microcefalia.

A presença da planta teratogênica Mimosa tenuiflora, na fazenda, não descarta a

possibilidade que este caso de lisencefalia foi causado pela ingestão da planta. M. tenuiflora

causa principalmente malformações ósseas, mas outras malformações como malformações

oculares e aplasia intestinal tem sido associada a ingestão dessa planta (Pimentel et al., 2007).

Embora, doenças associadas com falha na migração neuronal, como lisencefalia, são

raras em animais domésticos, elas devem ser incluídas no diagnóstico diferencial de doenças

do sistema nervoso de caprinos. Na possibilidade de ocorrência de novos casos seria

necessário investigar a possível origem genética da malformação como tem sido descrito em

outras espécies.

Declaração de interesses conflitantes

O(s) autor(es) declarou(ram) não ter potenciais conflitos de interesse em relação a

pesquisa, a autoria, e/ou publicação deste artigo.

REFERENCIAS

Ayala, R., Shu, T., Tsai Li-Huei., 2007. Trekking across the Brain: The journey of neuronal

migration. Cell 128(12), 29-40.

De Lahunta, A., Glass, E., 2009. Development of nervous system. In: De Lahunta, A., Glass,

E., (Eds.), Veterinary Neuroanatomy and Clinical Neurology. 3th., Saunders Elsevier,

Saint Louis, Missouri, p. 23-53.

52

Fallet-Bianco, C., Loeuillet, L., Poirier, K., Loget, P., Chapon, F., Pasquier, L., Saillour, Y.,

Beldjord, C., Chelly, J., Francis, F. 2008. Neuropathological phenotype of a distinct form

of lissencephaly associated with mutations in TUBA1A. Brain 131, 2304–2320.

Fleck, M.W., Hirotsune, S., Gambello, M.J., Phillips-Tansey, E., Suares, G., Mervis, R.F.,

Wynshaw-Boris, A., McBain, C.J. 2000. Hippocampal abnormalities and enchaced

exitability in a murine model of human lissencephaly. The Journal of Neuroscience 20(7),

2439-2450.

Greene, C.E., Vandevelde, M., Braund, K.G., 1976. Lissencephaly in two Lhasa Apso dogs.

Journal of the American Veterinary Medicine Association 169(4), 405-410.

Guerrini, R., Parrini, E., 2010. Neuronal migration disorders. Neurology of Disease 38, 154-

166.

Herrmann, A., Hecht, W., Herden, C., 2011. Lissencephaly and microencephaly combined

with hypoplasia of corpus callosum and cerebellum in a domestic cat. Tierarztliche Praxis

Kleintiere 2,116-120.

Keays, D.A., Tian, G., Poirier, K., Huang, G., Siebold, C., Cleak, J., Oliver, P.L., Fray, M.,

Harvey, R.J. Molnar, Z., Pinon, M.C., Dear, N., Valdar, W., Brown, S.D.M., Davies,

K.E., Rawlins, J.N.P., Cowan, N.J., Nolan, P., Chelly, J., Flint, J., 2007. Mutations in α-

tubulin cause abnormal neuronal migration in mice and lissencephaly in humans. Cell

128, 45-57.

Medeiros R.M.T., Neto S.A.G., Riet-Correa F., Schild A.L. Sousa N.L. 2004. Mortalidade

embrionária e abortos em caprinos causados por Aspidosperma pyrifolium. Pesquisa

Veterinária Brasileira. 24(Supl.):42-43.

Pimentel, L.A., Riet Correa, F., Gardner, D., Panter, K.E., Dantas, A.F., Medeiros, R.M.,

Motas, R.A., Araújo, J.A., 2007. Mimosa tenuiflora as a cause of malformation in

53

ruminantes in the northeastern Brazilian semiarid ragelands. Veterinary Pathology 44,

928-931.

Radostits O.M., Gay C.C., Hinchcliff K.W. & Constable P.D. 2007. Diseases of the newborn.

In: Veterinary Medicine - A textbook of the diseases of cattle, horses, sheep, pigs and

goats. 10th., Saunders Elsevier, Philadelphia, pp.127-172.

Roessman, U. Hori, A. 1985. Agyria (Lissencephaly) with anomalous pyramidal crossing:

Case report and review of literature. Journal of the Neurological Science 69, 357-364.

Ross, M.E., Swanson, K., Dobs, W.B., 2001. Lyssencephaly with cerebellar hypoplasia

(LCH): a heterogenous group of cortical malformations. Neuropediatrics 32, 256-263.

Saito, M., Sharp, N.J.H., Kortz, G.D., de Lahunta, A., Leventer, R.J., Tokuriki, M., Thrall,

D.E., 2002. Magnetic resonance imaging features of lissencephaly in 2 Lhasa Apso dogs.

Veterinary Radiology & Ultrasound 43(4), 331-337.

Summers, B.A., Cummings, J.F., De Lahunta, A. (Ed.), 1994. Veterinary neuropathology.

Mosby-Year Book Inc, St. Louis, 527pp.

Washburn, K.E., Streeter, R.N., 2004. Congenital defects of the ruminant nervous system.

Veterinary Clinical Food Animal 20, 413-434.

Zachary, J.F., 2007. Nervous System. In: Macgavin, M.D., Zachary, J.F. (Eds), Pathologic

basis of veterinary disease. 4tf. Mosby Elsevier, St. Louis, pp. 833-971.

Zaki, F.A, 1976, Lissencephaly in Lhasa Apso dogs. Journal of the American Veterinary

Medicine Association 169(11), 1165-1168.

54

CONCLUSÕES

As malformações podem ocorrer na forma de surto como casos de intoxicação por

Mimosa tenuiflora ou casos esporádicos como a lisencefalia. A necessidade do estudo da

reprodução experimental das malformações associadas à Mimosa tenuiflora surgiu a partir de

investigações epidemiológicas que levaram a crer no seu potencial teratogênico. Não menos

importante o caso da lisencefalia em caprino, apesar de ser esporádico, demanda estudos no

sentido de se sua origem for gênetica, que seja identificada para que esse não se perpetue para

gerações posteriores. Só através de adequada investigação epidemiológica é que se pode

chegar a etiologia e traçar medidas eficientes para o seu controle.

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